橘红素经PI3K/Akt/mTOR信号通路调控胃癌细胞BGC-823和SGC-7901的增殖和凋亡

目的探讨橘红素对胃癌细胞BGC-823和SGC-7901的自噬作用及其机制。方法不同浓度橘红素(7.5、15、30、60、120μmol/L)处理两株细胞后,CCK-8法检测其吸光度值,计算细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;用60μmol/L浓度的橘红素处理后通过细胞划痕法检测两种细胞迁移能力;Western blotting法检测自噬相关蛋白p62、凋亡蛋白Bax、Bcl-2及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果与对照组相比,橘红素处理组增殖、迁移能力显著下降(P<0.01),细胞凋亡数增加,自噬蛋白p62的表达浓度依赖性升高(P<0.05),凋亡蛋白Bax表达增加(P<0.05),Bcl-2表达下降(P<0.05),磷酸化的p-Akt和p-mTOR的表达水平显著降低(P<0.05)。结论橘红素可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路调控SGC-7901和BGC-823细胞的增殖和凋亡,并可抑制其自噬。

橘红素对去卵巢大鼠子宫及血清激素、骨代谢和炎症因子的影响

目的观察橘红素(TG)对去卵巢(OVX)大鼠子宫形态的影响及对血清激素、骨代谢和炎症因子的调节作用。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、模型+雌二醇0.05 mg·kg^(-1)组、模型+TG 50和100 mg·kg^(-1)组,每组8只。除假手术组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除术,术后各给药组大鼠连续12周每周4次ig给予不同药物,假手术组和模型组给予等量0.5%羧甲纤维素钠。经麻醉处死大鼠,称量体重和子宫重量,计算子宫指数;HE染色观察子宫内膜厚度和子宫面积;ELISA检测大鼠血清雌激素(E)、睾酮(T)、甲状旁腺素(PTH)、1,25双羟维生素D3[1,25(OH)_(2)D_(3)]、骨碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型前胶原氨基末端肽(PINP)、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、白细胞介素1(IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。比色法检测大鼠血清钙(Ca)和磷(P)水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠体重明显增加(P<0.01),子宫的重量、指数、内膜厚度和面积均明显减少(P<0.01),血清E水平显著下降(P<0.01),血清T,Ca,P,PTH,1,25(OH)_(2)D_(3),BALP,PINP,CTX,IL-1,IL-6和TNF-α水平均显著上升(P<0.01),血清TRACP-5b水平无明显改变。与模型组相比,模型+雌二醇0.05 mg·kg^(-1)组大鼠体重明显减轻(P<0.01),子宫的重量、指数、内膜厚度和面积明显增加(P<0.01);模型+TG 50和100 mg·kg^(-1)组大鼠体重、子宫的重量、指数、内膜厚度和面积均无明显变化;模型+雌二醇0.05 mg·kg^(-1)组血清E水平均显著升高(P<0.01),血清T,Ca,P,PTH,1,25(OH)_(2)D_(3),BALP,PINP,CTX,TRACP-5b,IL-1,IL-6和TNF-α水平均显著降低(P<0.01),模型+TG 50和100 mg·kg^(-1)组血清E水平均显著升高(P<0.01),血清T,Ca,P,PTH,1,25(OH)_(2)D_(3),BALP,PINP,CTX,IL-1,IL-6和TNF-α水平均显著降低(P<0.01),血清TRACP-5b水平无显著改变。结论TG干预在提高OVX大鼠血清E水平的同时不刺激子宫内膜增生,并能降低骨代谢和血清炎症因子水平。

橘红素对大鼠成骨细胞增殖、分化和成骨功能的影响

目的研究橘红素(TG)对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化和成骨功能指标基因蛋白表达的影响。方法选取出生24 h内的SD大鼠乳鼠颅骨,通过酶消化法培养原代成骨细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和状态,并以碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(ARS)染色法进行细胞鉴定;分别采用噻唑蓝(MTT)法、ALP染色法、ARS染色法检测TG对原代成骨细胞的存活率、评价成骨细胞分化能力和矿化能力的影响;采用Western印迹检测TG对原代成骨细胞成骨相关转录因子(OSX)、ALP、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和骨桥蛋白(OPN)等成骨功能指标基因的蛋白表达。结果与Control组相比,TG作用浓度为5、10、15、20μmol/L时可明显促进成骨细胞的增殖(P<0.01);TG共培养7 d后,与Control组比较,TG作用浓度为5、10、15、20μmol/L时ALP染色明显增加,说明TG能明显促进成骨细胞分化(P<0.05);TG共培养21 d后,与Control组比较,TG浓度为5、10、15、20μmol/L时ARS染色明显增加,说明TG能明显促进成骨细胞的矿化功能(P<0.05)。Western印迹检测结果表明,TG可提高成骨功能指标基因CollagenⅠ、ALP和OPN蛋白表达,其中以10μmol/L TG时最显著(均P<0.05)。结论TG能显著提高原代培养的大鼠成骨细胞的增殖、分化和矿化能力,并显著提高成骨功能指标基因的蛋白表达。

橘红素上调Cyclin B1和抑制ERK磷酸化诱导人胃癌AGS细胞周期阻滞

目的探讨橘红素对人胃癌AGS细胞增殖和周期的作用及其机制。方法采用MTT法观察橘红素对人AGS胃癌细胞增殖的作用;流式细胞仪检测橘红素对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素对Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1和ERK、p-ERK蛋白表达的影响。结果橘红素可明显抑制AGS胃癌细胞的增殖(P<0.01),呈时间和剂量依赖性。橘红素作用于AGS细胞24 h,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);作用48和72 h,S期阻滞消失,G2/M期细胞百分比增高(P<0.05,P<0.01)。作用48 h,橘红素可上调Cyclin B1蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),对Cyclin D1和Cyclin E1蛋白表达无明显影响;对ERK蛋白表达无影响,可降低p-ERK蛋白的表达(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论橘红素可明显抑制人AGS胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于S期和G2/M期,主要机制可能是通过抑制ERK磷酸化和上调CyclinB1蛋白表达。

橘红素增强5-氟尿嘧啶抑制人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制研究

目的探讨橘红素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制。方法采用MTT法观察5-Fu和橘红素联合5-Fu对AGS胃癌细胞增殖作用;流式细胞仪检测橘红素联合5-Fu对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素联合5-Fu对p53和p21蛋白表达的影响。结果 5-Fu可呈剂量依赖地抑制人AGS胃癌细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),橘红素联合5-Fu可明显增强5-Fu对AGS胃癌细胞增殖的抑制作用,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P<0.01);橘红素联合5-Fu作用于AGS细胞,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);橘红素联合5-Fu可上调p53和p21蛋白的表达,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论橘红素联合5-Fu可增强5-Fu抑制人AGS胃癌细胞的增殖作用,主要机制可能是通过上调p53和p21蛋白,使细胞阻滞于S期。

橘红素通过调控AMPK/SIRT3信号轴影响胃癌AGS细胞自噬的机制

目的探讨橘红素(tangeretin,Tan)通过腺苷酸活化的蛋白激酶(AMP activated proteinkinase,AMPK)/沉默信息调节因子2相关酶3(silent information regulator factor 2related enzyme 3,SIRT3)信号轴对人胃癌AGS细胞自噬的影响及机制。方法用不同浓度(5、10、30、60、120μmol·L^(-1))Tan分别作用于AGS细胞24、48、72 h,用MTT法检测Tan对细胞的抑制作用,计算半抑制浓度(50% inhibitory concentration,IC_(50)),观察细胞形态变化情况;将细胞随机分为对照组、Tan组、激动剂组,其中Tan组、激动剂组分别用IC_(50)的Tan、AMPK激动剂A-769662处理细胞,对照组不做处理,培养48 h后,用透射电镜观察自噬泡,用MDC染色法观察细胞自噬情况,用qRT-PCR法检测AMPK以及SIRT3基因诱导量的变化,用Western blot检测细胞中相关蛋白AMPK、p-AMPK、SIRT3、LC3II、p62的表达水平。结果培养24、48、72 h后,AGS细胞对Tan的IC_(50)值分别为(46.42±5.62)、(59.76±7.01)、(83.56±8.86)μmol·L^(-1),不同浓度的Tan作用于细胞,细胞形态发生改变,随着Tan浓度的升高,细胞形态变化程度加剧;透射电镜下对照组有少量自噬泡形成,Tan组无自噬泡形成,激动剂组有大量自噬泡形成;MDC染色结果显示,与对照组比较,Tan组的荧光强度较弱,激动剂组的荧光强度较强;与对照组比较,Tan组SIRT3 mRNA的相对表达量降低,激动剂组SIRT3 mRNA的相对表达量升高(P<0.05)。与Tan组比较,激动剂组SIRT3 mRNA的相对表达量升高(P<0.05)。与对照组比较,Tan组细胞中p-AMPK、SIRT3、LC3II蛋白的相对表达量降低,p62蛋白的相对表达量升高,激动剂组p-AMPK、SIRT3、LC3II蛋白的相对表达量升高,p62蛋白的相对表达量降低(P<0.05)。与Tan组比较,激动剂组细胞中p-AMPK、SIRT3、LC3II蛋白的相对表达量升高,p62蛋白的相对表达量降低(P<0.05)。各组细胞中AMPK mRNA和蛋白的相对表达量比较,差异无统计学意义。结论Tan可抑制人胃癌AGS细胞发生自噬,可能是通过调控AMPK/SIRT3信号通路发挥作用。

橘红素药理作用研究进展

橘红素,也称橘皮素,是从柑橘属果皮中提取的一种天然多甲氧基黄酮成分,具有多种药理活性,近年来得到广泛的关注。本文对近3年橘红素抗肿瘤、抗炎、抗哮喘、神经保护等方面的药理作用研究进展进行综述,为橘红素的进一步研究提供依据。

橘红素对人胃癌AGS细胞自噬的作用及其机制研究

目的探讨橘红素(Tangeretin,Tan)对人胃癌AGS细胞自噬的作用及其机制。方法Western blot检测Tan对LC3II、p62及p-Akt蛋白表达的影响,以及自噬抑制剂CQ和促进剂Rapa干预后,LC3II和p62蛋白表达的变化。Annexin V/PI双染,流式细胞术检测CQ对Tan诱导细胞凋亡作用的影响。结果作用24 h,Tan可呈剂量依赖地增强LC3II蛋白(P<0.05,P<0.01)和p62蛋白(P<0.05)的表达;作用48 h,Tan可呈剂量依赖地增强p62蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。作用24 h和48 h,与Tan单独处理组比较,CQ与Tan联合处理可明显增强LC3Ⅱ和p62蛋白的表达(P<0.01),而Rapa和Tan联合处理则下调LC3Ⅱ和p62蛋白的表达(P<0.05)。10μmol·L^-1 CQ与60μmol·L^-1 Tan联合作用48 h,CQ+Tan组与Tan组比较,细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。Tan作用24 h和48 h,p-Akt蛋白的表达均呈剂量依赖地下降(P<0.05,P<0.01)。结论橘红素可以抑制人胃癌AGS细胞的自噬流,造成自噬体的堆积,促进AGS细胞凋亡,Akt蛋白的磷酸化可能参与其中。

橘红素预处理对过氧化氢诱导成骨细胞损伤的保护作用及机制

目的研究橘红素预处理对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的成骨细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法①酶消化法分离培养大鼠颅骨来源的原代成骨细胞,分别培养7和21 d后,采用碱性磷酸酶(AKP)染色和茜素红染色鉴定细胞。②橘红素5~40μmol·L^(-1)孵育成骨细胞48 h后,加H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1)1 h,采用CCK-8法测定细胞存活率,AKP试剂盒测定AKP活性。③培养的成骨细胞分为细胞对照组、模型组(H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1),孵育1 h)、模型+橘红素组(橘红素10μmol·L^(-1)预处理48 h后加H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1),1 h)。茜素红染色检测钙化结节数量,流式细胞术检测成骨细胞内活性氧(ROS)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒检测SOD活性,Western印迹法检测成骨细胞转录因子(OSX)和骨保护素(OPG)蛋白表达水平。结果①AKP染色成骨细胞细胞胞质呈蓝色,茜素红染色可见钙化结节,结节呈深红色。②与模型组相比,橘红素(10~30μmol·L^(-1))预处理组成骨细胞存活率显著升高(P<0.01),橘红素(10~20μmol·L^(-1))预处理组成骨细胞AKP活性显著增加(P<0.05)。③与细胞对照组相比,模型组成骨细胞矿化结节数量显著降低(P<0.05),ROS水平明显升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01),OSX和OPG蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,模型+橘红素10μmol·L^(-1)预处理组矿化结节数量明显增加(P<0.05),ROS水平显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.01),OSX和OPG的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论橘红素可通过激活SOD、减少ROS累积而降低氧化应激,对H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞氧化损伤具有保护作用。

橘红素2种脂质纳米粒的制备、表征和口服吸收生物利用度评价

目的 制备橘红素纳米结构脂质载体(tangeretin nanostructured lipid carriers,Tan-NLCs)和橘红素固体脂质纳米粒(tangeretin solid lipid nanoparticles,Tan-SLNs),考察相对口服吸收生物利用度。方法 采用包封率、载药量和粒径为指标,单因素结合Box-Behnken设计-效应面法(Box-Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM)优化Tan-NLCs处方,并制备Tan-SLNs。透射电子显微镜观察Tan-NLCs和Tan-SLNs外貌形态,考察在pH 2.0和pH 6.8磷酸盐缓冲液(PBS)中的释药情况。X射线粉末衍射(X-ray powder diffraction,XRPD)法和示差量热扫描(differential scanning calorimetry,DSC)法对晶型进行分析,并考察Tan-NLCs和Tan-SLNs冻干粉的稳定性。以橘红素原料药为参考,比较Tan-NLCs和Tan-SLNs口服药动学行为。结果 Tan-NLCs和Tan-SLNs平均包封率分别为(85.13±1.01)%和(73.07±1.38)%,载药量分别为(5.43±0.19)%和(4.11±0.22)%,粒径分别为(184.77±8.63)nm和(226.09±10.25)nm。Tan-NLCs和Tan-SLNs呈椭圆形或球形,橘红素在Tan-NLCs和Tan-SLNs冻干粉中可能以无定型形式存在,其释药速率和累积释放率明显提高。Tan-NLCs冻干粉稳定性高于Tan-SLNs冻干粉。口服药动学结果显示,Tan-SLNs冻干粉C_(max)和相对口服吸收生物利用度分别提高至2.01倍和3.10倍;Tan-NLCs冻干粉C_(max)和相对口服吸收生物利用度分别提高至2.83倍和4.59倍。结论 Tan-NLCs和Tan-SLNs均可促进橘红素口服吸收,但Tan-NLCs冻干粉稳定性更高,促吸收作用更大。

微波辅助提取橘皮中川陈皮素和橘红素的工艺研究

目的:建立高效液相色谱含量测定方法,研究微波辅助提取橘皮中川陈皮素和橘红素的最佳工艺。方法:利用高效液相色谱法测定川陈皮素和橘红素的含量,在单因素实验基础上,设计正交实验方法,考察乙醇浓度、微波功率、微波提取时间、料液比对川陈皮素和橘红素提取率的影响,并将其结果与加热回流法和超声法进行比较。结果:微波提取的最佳工艺条件为微波功率800W、乙醇体积比75%、料液比1:15、提取时间5min,川陈皮素和橘红素提取率分别为90.21%和84.25%。结论:微波提取川陈皮素和橘红素,提取率均高于加热回流法和超声法,且时间大大缩短,是一种适合于橘皮中川陈皮素和橘红素提取的快速、高效、节能的方法。

HPLC-QAMS法测定金果含片中哈巴苷、哈巴俄苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B

目的建立高效液相结合一测多评(HPLC-QAMS)法同时测定金果含片中哈巴苷、哈巴俄苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的方法。方法采用Agilent HC C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长为210 nm(哈巴苷和哈巴俄苷)和296 nm(柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B);体积流量1.0 mL/min;进样量10μL;柱温30℃。进行专属性试验、线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验。以橙皮苷为内参物,建立该成分与哈巴苷、哈巴俄苷、柚皮芸香苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的相对校正因子(RCF),并计算金果含片中8种成分的含量,同时与外标法的测定结果进行比较,验证该方法的可行性。结果哈巴苷、哈巴俄苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B检测质量浓度的线性范围分别为6.54~163.50、2.27~56.75、8.16~204.00、17.95~448.75、1.88~47.00、0.54~13.50、1.48~37.00和0.76~19.00μg/mL(r值范围0.9991~0.9998);平均加样回收率及RSD值分别为99.85%(0.76%)、97.62%(1.07%)、100.09%(0.64%)、99.80%(0.71%)、97.48%(1.44%)、98.25%(1.60%)、96.90%(1.03%)、96.87%(1.31%),方法学验证结果均符合要求。HPLC-QAMS法计算值与外标法实测值无显著性差异。结论所建立的HPLC-QAMS法简便、有效、准确,可用于金果含片中多指标成分含量的同时测定,为提升金果含片的质量控制方法提供参考依据。

橘红素自微乳给药系统的制备及体内吸收研究

目的:设计和优化橘红素自微乳给药系统,改善药物的溶解及吸收,提高橘红素的口服生物利用度。方法:通过考察自微乳的粒径与粒径分布、乳化速度、Zeta电位、外观等指标,筛选并优化橘红素自微乳给药系统的处方,利用MDCK模型测定自微乳给药系统的体外吸收转运行为,并评价该给药系统在大鼠体内的药动学特性。结果:MDCK实验证实橘红素自微乳给药系统能够提高橘红素的吸收和转运,在SD大鼠体内的药动学结果表明橘红素的AUC_((0-∞))由(3 491.77±404.06)μg·L^(-1)·h提高至(9 435.18±1 633.81)μg·L^(-1)·h(P<0.01),C_(max)由(1 211.39±382.73)μg·L^(-1)·h提高至(2 371.73±481.87)μg·L^(-1)·h(P<0.05)。结论:制备出稳定的橘红素自乳化给药系统,体外溶出速度显著提高,从而有效提高橘红素的生物利用度。

光、热、金属离子对越橘红色素稳定性的影响

在不同条件下对越橘红色素稳定性的研究结果表明:越橘红色素热稳定性较差、温度对其影响明显,在70℃时,越橘红色素会受到一定影响;45℃以下低温避光条件下,稳定性较好;低pH值稳定性较好,添加异抗坏血酸钠、三聚磷酸钠可提高越橘红色素的稳定性;金属离子Fe2+和Cu2+使越橘红色素的颜色改变或发生明显的沉淀,而Pb2+、Al3+、Zn2+、Mg2+、Mn2+影响较小。

HPLC一测多评法测定神术合剂中广藿香酮等7个活性成分的含量

目的:建立高效液相色谱一测多评法测定神术合剂中白术内酯Ⅱ、苍术素、柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、广藿香酮的含量。方法:采用Agilent Eclipse C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃;乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,流速0.8 mL·min^(-1);检测波长分别为270 nm(白术内酯Ⅱ和苍术素)和310 nm(柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素和广藿香酮);以橙皮苷为内参物,建立与其它6种成分的相对校正因子,计算各成分含量。结果:白术内酯Ⅱ、苍术素、柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、广藿香酮分别在2.37~59.25、5.28~132.00、4.69~117.25、5.86~146.50、1.47~36.75、0.74~18.50、0.56~14.00μg·mL-1(r≥0.9991)范围内线性关系良好;平均加样回收率(RSD)分别为98.45%(1.29%)、100.05%(0.68%)、98.58%(1.80%)、99.05%(1.54%)、97.60%(1.51%)、96.98%(0.88%)、97.31%(1.03%);神术合剂中7个成分一测多评法计算结果与外标法实测值间无明显差异。结论:本方法操作便捷、专属性强,稳定性和重复性好,能够同时测定神术合剂中广藿香酮等7个成分含量,可用于神术合剂的质量控制。

多甲氧基黄酮抗肿瘤作用研究进展

肿瘤是死亡率很高的一种疾病,严重威胁人类的生命和健康。从中药或天然药物中提取有效成分,研究其抗肿瘤作用或对某些抗肿瘤化学药物的增敏和抗耐药作用已成为当前医药学界关注的热点。多甲氧基黄酮是近年来发现的一类具有较强抗肿瘤活性的黄酮类成分。该文就多甲氧基黄酮类成分抗肿瘤作用及其机制的研究进展作一综述。

多甲氧基黄酮的神经保护作用研究进展

多甲氧基黄酮(polymethoxyflavonoids,PMFs)是从柑橘属植物中提取的一类黄酮成分,生物活性广泛,具有神经保护作用。本文综述了PMFs在动物和细胞模型中对中枢神经系统损伤(阿尔茨海默病、帕金森病、脑缺血、脂多糖诱导的神经损伤等)的保护和改善作用,并重点阐述其潜在作用机制,旨在深入理解PMFs的药效及分子作用机制,为神经系统相关疾病的预防和治疗提供新的思路。

HPLC法同时测定枳壳中伞形花内酯等9种成分的量

目的建立同时测定枳壳中伞形花内酯、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,(3,4)-七甲氧基黄酮、橘红素、橙皮油素的HPLC方法,测定和比较不同周长大小枳壳中的9种化学成分的量。方法采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-水(用磷酸调p H至3.0);梯度洗脱为0~25 min,30%~50%A;25~35 min,50%~70%A;35~40 min,70%~75%A;40~55 min,75%~100%A。体积流量为1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长320 nm;进样量20μL。结果伞形花内酯、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,(3,4)-七甲氧基黄酮、橘红素和橙皮油素分别在0.002 18~0.07μg(r=0.999 8)、0.021 8~0.70μg(r=0.999 9)、0.242 5~7.76μg(r=0.999 8)、0.024 38~0.78μg(r=0.999 4)、0.523 76~16.76μg(r=0.999 3)、0.004 13~0.132μg(r=0.999 6)、0.003 13~0.10μg(r=0.999 3)、0.002 75~0.088μg(r=0.999 6)和0.000 93~0.03μg(r=0.999 3)呈良好的线性关系;其平均回收率(n=6)分别为98.50%、98.80%、99.51%、98.43%、99.64%、99.21%、100.03%、98.75%和101.11%。结论该法简便,重复性好,可用于枳壳中伞形花内酯、3,5,6,7,8,(3,4)-七甲氧基黄酮等成分的含量测定。

基于UPLC特征图谱和Q-Marker量值传递评价经典名方半夏白术天麻汤颗粒剂的关键生产工艺

目的基于特征图谱相关性和质量标志物(quality markers,Q-Marker)转移率评价半夏白术天麻汤(Banxia Baizhu Tianma Decoction,BBTD)颗粒剂的生产环节,明确关键控制点。方法采用Acclaim;RSLC Lot Validation-120 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.2μm)进行分离,流动相为乙腈-水溶液,梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,检测波长235 nm,柱温30℃。以BBTD基准样品为参比,建立3批中试样品的UPLC指纹图谱,并进行相似度评价,分析Q-Marker在各生产环节的损失,评价生产工艺的合理性。结果与BBTD基准样品相比,提取液、浓缩液、干膏粉、颗粒剂中均存在对应特征峰,以10种指标性成分及其总量表征的3批BBTD中试样品关键质量属性与其基准样品基本保持一致。结论基于特征图谱和Q-Marker在各环节之间的量值传递,为经典名方BBTD制备工艺评价和质量控制提供了的理论依据。

RP-HPLC法同时测定橘叶中3个黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定橘叶中川陈皮素、橘红素、5-去甲川陈皮素含量的反相高效液相色谱法。方法:采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水(体积比30∶30∶40),流速1.0 mL.min-1,检测波长342 nm;柱温为室温(25℃)。结果:川陈皮素、橘红素、5-去甲川陈皮素线性范围分别为0.239～2.870μg(r=0.9995),0.102～1.224μg(r=0.9995),0.054～0.643μg(r=0.9995);平均回收率(n=6)分别为98.06%,98.02%,97.61%,RSD分别为2.6%,1.9%,2.0%。结论:本法快速、简便、准确,重复性好,可用于橘叶川陈皮素、橘红素、5-去甲川陈皮素的定量分析和质量控制。