PPARα激动剂橙皮油素对小鼠摄食的影响

探讨橙皮油素(Auraptene,AUR)的摄入对正常小鼠摄食的影响及其作用机制。将正常小鼠分为3组,正常对照组、AUR(2μmol/kg)组、AUR(1μmol/kg)组,连续灌胃给予AUR 2周,检测小鼠的累积摄食,检测血清、肝脏和下丘脑中胰岛素样生长因子(IGFs)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)、下丘脑中厌食因子阿片促黑色素原(POMC)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、靶基因肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)mRNA和蛋白水平的变化。结果发现:AUR能够浓度依赖性地促进小鼠摄食,抑制下丘脑厌食因子POMC的表达(P<0.01),对肝脏IGFBP-1的表达有显著的促进作用(P<0.01),在血清和下丘脑中IGF-1的含量显著减少(P<0.01),但并未影响肝脏IGF-1的表达(P>0.05),同时,AUR显著增加了CPT1A在肝脏中的表达(P<0.01)。综上,AUR可显著促进小鼠摄食,其机制主要为AUR激活了PPARα,促使肝脏IGFBP-1表达增加,从而结合了血清中游离的IGF-1,使进入下丘脑的IGF-1含量减少,抑制了厌食因子POMC的表达,促进了小鼠摄食。

超临界CO_2萃取甜橙皮油的实验研究

在140～160kg/cm^2压力范围内,用超临界CO_2萃取甜橙皮中的绝大部分油,所得皮油具有浓厚的桔香味且富含天然色素。经过GC/MS分析,发现其可与进口优质皮油相媲美,这对于开发利用我国丰富的天然资源有实用价值。

环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肌球蛋白轻链激酶表达量的影响

目的研究环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肌球蛋白轻链激酶表达量的影响。方法考察在钙离子存在的条件下,环氧橙皮油素对20 kDa肌球蛋白轻链的钙离子依赖性磷酸化反应的影响;用孔雀绿法测定环氧橙皮油素对肌球蛋白Mg2+-ATPase活性的影响;采用蛋白免疫印迹方法考察环氧橙皮油素对平滑肌细胞中肌球蛋白轻链激酶的表达量影响。结果环氧橙皮油素在20～320μmol/L范围内剂量依赖性抑制肌球蛋白轻链磷酸化,在5～20 min范围内时间依赖性抑制肌球蛋白轻链磷酸化;在5～20 min时间范围内,随着环氧橙皮油素用药浓度增加,呈现剂量依赖性抑制肌球蛋白Mg2+-ATPase活性;在40～320μmol/L范围内剂量依赖性抑制肌球蛋白轻链激酶表达,在0～96 h范围内时间依赖性抑制肌球蛋白轻链激酶表达。结论环氧橙皮油素可通过抑制平滑肌肌球蛋白功能及肌球蛋白轻链激酶表达量,抑制胃肠道平滑肌的收缩。

红橙皮油化学成分的分析

本文通过GC／MS／DS检索，人工解析质谱与标准质谱对照的方法，从红橙皮油中分析鉴定了49个成分。它们包括：（1）37个烃类化合物如：含量高达89．26％的柠檬烯，其次为香叶烯，罗勒烯，△-蒈烯，β-荜澄茄烯和杜松烯等；（2）14个醇类化合物，主要有1．07％的芳樟醇，α-甲基十二烷醇，环已醇，α-松油醇等；（3）醛类，如：0．10％的橙花醛，香叶醛，十四醛；（4）酯类和有机酸类。

草地贪夜蛾对添加橙皮油助剂的 阿维菌素敏感性分析

为了提高化学药剂对草地贪夜蛾的生物活性,分别采用了浸虫法、浸饲料法和浸虫、饲料法比较了不同橙皮油助剂添加量下草地贪夜蛾对阿维菌素的敏感性,同时借助表面张力仪测定了不同橙皮油助剂添加量下药液的表面张力。结果表明,3种方法获得阿维菌素对草地贪夜蛾的LC_(50)值以浸虫法最高,浸饲料法其次,浸虫、饲料法最低。随着橙皮油助剂含量的增加,阿维菌素对草地贪夜蛾的LC_(50)值先减小后增加,这一变化趋势和橙皮油助剂溶液的表面张力相一致。当橙皮油助剂添加量为0.10%时,阿维菌素对草地贪夜蛾活性最好。本研究结果可为喷雾助剂的科学使用和草地贪夜蛾的化学防治提供依据。

比色法和薄层扫描法测定橙皮油中柠檬烯的含量

本文报道了用硝酸银-硅胶H板,石油醚-乙醚展开,磷钼酸显色,于690nm处比色测定柠檬烯含量;用硅胶H-CMC板,石油醚展开,磷钼酸显色,于595nm扫描测定柠檬烯含量。两法所得结果与气相色谱法基本一致。

基于联产工艺的橙皮精油气相色谱-质谱指纹图谱的构建及成分分析

目的构建果胶精油联产工艺获得的橙皮精油的指纹图谱,并进行成分分析。方法通过气相色谱-质谱法采集20批次橙皮精油样品的总离子流图(total ions current,TIC),运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”寻找共有峰并建立对照指纹图谱,采用美国国家标准与技术研究院(National Institute of Standards and Technology,NIST)谱库检索结合保留指数技术对共有峰进行成分鉴定,运用SPSS 29.0软件对共有峰进行主成分分析。结果指纹图谱的精密度、重复性和稳定性等方法学考察符合要求,所有样品TIC图相似度均大于0.998,提炼出9个共有峰,经过质谱鉴定,在共有峰中,D-柠檬烯相对含量最高,占82.77%,其次为月桂烯、烩烯、右旋α-蒎烯等,依次占比8.79%、3.62%、3.27%;经主成分分析,前两个主成分因子的累积方差贡献率为67.4%,微量成分烩烯和3-蒈烯对主成分因子的贡献最大。结论对由果胶精油联产工艺获得的橙皮精油建立了气相色谱-质谱指纹图谱,探明其共性化合物成分及影响力,为其质量控制提供了科学依据。

CO_2超临界流体萃取技术提取甜橙皮精油的研究

采用甜橙皮作为实验材料，研究在超临界状态下，粉碎度、温度、压力、静态萃取与动态萃取对油脂萃取率的影响，为批量生产提供了依据。

枳实中活性单体环氧橙皮油素抗溃疡性结肠炎的作用

目的:观察环氧橙皮油素对溃疡性结肠炎小鼠治疗作用。方法:BALB/C小鼠分为6组,分别为环氧橙皮油素低、中、高剂量组(80,160,320μmol·L-1),正常组,柳氮磺砒啶肠溶片组(520 mg·kg-1)和葡聚糖硫酸钠(DSS)模型组。除模型组外均按0.01 m L·g-1体重剂量ig给药,正常组给予等体积的生理盐水。除正常组外各给药组在给药同时自由饮用4%DSS水溶液,连续造模10 d。观察各组药物对BALB/C小鼠疾病活动指数的影响;采用结肠损伤评分法,观察各组药物对病变肠组织的影响;ELISA法测结肠组织细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-10(IL-10)含量;Western blot法测定环氧橙皮油素对受损结肠平滑肌肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达水平影响。结果:与模型组比较,环氧橙皮油素中、高剂量组疾病活动指数明显降低(P<0.05),结肠损伤指数明显降低(P<0.05),环氧橙皮油素各剂量组结肠组织TNF-α含量逐渐降低,其中高剂量组与模型组有显著差异(P<0.05),环氧橙皮油素各剂量组结肠组织IL-10含量逐渐升高,其中中、高剂量组与模型组均有显著差异(P<0.05),环氧橙皮油素各剂量组均能使受损结肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶表达量降低,中、高剂量组与模型组有显著性差异(P<0.05)。结论:环氧橙皮油素通过不同作用机制对溃疡性结肠炎起到治疗作用。

环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响

目的:探讨环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白功能及肠平滑肌收缩性的影响。方法:在纯化的蛋白体系中进行平滑肌肌球蛋白Ca2+依赖性磷酸化反应,采用甘油聚丙烯酰胺凝胶电泳测定肌球蛋白轻链磷酸化程度,孔雀绿法测定肌球蛋白Mg2+-ATPase活性。以平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性、肌球蛋白磷酸化以及在克氏液中孵育的肠平滑肌收缩振幅为指标,考察环氧橙皮油素对平滑肌肌球蛋白Mg2+-ATPase活性和肌球蛋白磷酸化程度的调节作用,以及环氧橙皮油素对大鼠离体小肠平滑肌收缩性的影响。结果:在肌球蛋白轻链的Ca2+依赖性磷酸化反应中,在40～320μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素能抑制磷酸化肌球蛋白Mg2+-ATPase活性及其轻链磷酸化程度(P<0.01),这种抑制作用与1-(5-氯-1-萘-磺酰)-六氢-1,4-二氮杂卓(ML-9)具有协同作用;40～320μmol·L-1浓度内环氧橙皮油素可剂量依赖性抑制大鼠离体小肠平滑肌收缩,且可拮抗新斯的明、乙酰胆碱引起的促进收缩作用,相加阿托品引起的抑制收缩作用(P<0.01)。结论:环氧橙皮油素可通过抑制平滑肌肌球蛋白的功能,抑制胃肠平滑肌的收缩性。

水蒸汽蒸馏法提取橙皮精油的研究

针对影响水蒸汽蒸镏法提取橙皮精油的各重要因素,即提取时加入NaCl的浓度、提取时间、料液比(溶剂量),首先设计各因素单因素实验,然后设计正交实验进行了综合探究。结果表明:加入NaCl浓度4%,提取时间2.5h,料液比为1∶2(即加水量为橙皮量的2倍)的组合是最佳工艺组合。

响应曲面法优化微波辅助萃取橙皮精油的工艺研究

本文研究了微波辅助正己烷法萃取橙皮中的橙皮精油,并用响应曲面法对工艺进行了优化。通过单因素试验确定了编码参数,采用响应曲面法考察了萃取时间、萃取温度、萃取剂用量对橙皮精油萃取得率的影响。结果表明微波辅助正己烷法萃取橙皮精油的最佳工艺条件为:萃取时间7 min、萃取温度57℃、萃取剂用量为275 mL,在此条件下橙皮精油的得率最高,为2.221%。

高压微射流制备橙皮精油纳米乳液影响因素研究

本文探讨了乳化剂类型、浓度和均质条件(压力和均质次数)对橙皮精油纳米乳液平均粒径(mean droplet diameter,MDD)、浊度以及贮藏稳定性的影响。采用四种乳化剂(皂树苷,QS;变性淀粉,MS;乳清分离蛋白,WPI;十二烷基硫酸钠,SDS),经高压微射流经不同均质压力和均质次数制备橙皮精油纳米乳液。结果表明,在一定范围,随着乳化剂浓度增加,MDD会逐渐减小,而SDS、QS、WPI和MS合适的浓度分别为2%、4%、4%和8%(w/w)。随着均质压力和均质次数增加,纳米乳液MDD和浊度都呈现较相似的减小趋势,在压力和次数分别增加到22000 psi和4次时,四种纳米乳液粒径可小于150 nm。研究发现,均质压力与MDD近似指数关系,乳液的相黏度比也会影响其MDD。贮藏实验表明,经25℃贮藏21 d,四种纳米乳液MDD基本稳定。

乳液粒径对橙皮精油微胶囊物理性质和氧化稳定性的影响

本文以橙皮精油为芯材,变性淀粉和麦芽糊精为壁材,通过高压(1000、2500、3500和22000 psi)均质制备了不同粒径橙油乳液,从而探讨乳液粒径对喷雾干燥橙油微胶囊平均粒径、包埋率、总油量、含水量、微观形貌以及重组乳液粒径分布的影响。同时以柠檬烯氧化程度评价微胶囊稳定性并预测其货架期。结果表明,均质压力越高,乳液粒径越小。乳液粒径对微胶囊的总油量(1.5 g/20 g)、包埋率(>95%)和含水量(<4%)没有明显影响,但会影响微胶囊的平均粒径、微观形貌以及重组乳液的粒径分布。乳液粒径越小,微胶囊平均粒径越小,表面越光滑,重组乳液也具有更窄的粒径分布。微胶囊在37℃贮藏5周,经零级动力学方程拟合氧化柠檬烯/柠檬烯(mg/g)变化的结果表明,以22000 psi制备的微胶囊货架期可长达11周左右,是其余微胶囊货架期的2.97~4.63倍。研究结果可为喷雾干燥精油微胶囊的工艺优化及质量控制提供理论参考。

超声波辅助提取橙皮香精油的工艺研究

以橙皮为原料,采用超声波辅助提取精油。选择料液比、石油醚体积分数、静置时间、超声温度和超声时间进行单因素试验。在此基础上,设计响应面试验对橙皮香精油的提取工艺参数进行优化。结果表明,最佳提取工艺为料液比1∶20(g∶mL),石油醚体积分数99.16%,静置时间15 min,超声温度40℃,超声时间15.77 min,在此条件下橙皮香精油的提取率为2.56%。

橙皮精油对苯染毒小鼠的保护作用及机制研究

目的:研究低剂量亚慢性苯染毒对小鼠的毒性作用,探讨橙皮精油对中毒小鼠的保护作用及作用机制。方法:取30只清洁级健康ICR小鼠,随机分为对照组、苯染毒组和苯+精油组(10只/组)。其中,苯染毒组以200 mg·kg^(-1)体重的剂量行苯灌胃染毒,苯+精油组给予苯+精油的混合溶液,对照组给予等剂量的乙醇溶液。均染毒30 d。比较三组的体重变化情况、各脏器(心、肝、肾、脾、睾丸、卵巢、子宫等)的脏器系数、干预前后的血常规情况[包括红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白(HGB)和血小板(PLT)]及各组血清和肝组织中的抗氧化指标含量[包括超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]。结果:对照组小鼠体重呈持续缓慢增长,苯染毒组体重下降明显,苯+精油组体重较为平稳、略有下降;三组小鼠肝脏、脾脏和肺的脏器系数均表现为:苯染毒组>苯+精油组>对照组(P<0.05),而心脏、肾脏的脏器系数相比差异无统计学意义(P>0.05);在各血常规指标(RBC、HGB和PLT)及血、肝SOD指标方面,苯染毒组<苯+精油组<对照组(P<0.05);而在血和肝MDA水平上,苯染毒组>苯+精油组>对照组(P<0.05)。结论:低剂量亚慢性苯染毒可对小鼠的血液系统和抗氧化指标造成损伤作用,橙皮精油具有有效的改善作用。

橙皮精油对B16小鼠黑色素瘤细胞的生物学效应

目的:探讨橙皮精油对B16小鼠黑色素瘤细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法:将B16小鼠黑色素瘤细胞分为对照组、不同浓度橙皮精油组,观察不同浓度精油对细胞形态的变化,分别采用MTT法和建立3D胶滴模型培养细胞的方法检测橙皮精油对黑色素瘤细胞的抑制作用; Trabswell迁移实验检测不同浓度橙皮精油对小鼠黑色素瘤细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测不同浓度橙皮精油对小鼠黑色素瘤细胞体外迁移能力的影响。结果:显微镜下经染色后,随着精油浓度增加,B16黑色素瘤细胞增殖的抑制作用越来越明显,精油浓度为0～1. 25%时,对B16黑色素瘤细胞的抑制作用显著;精油浓度为1. 25%～5%时,抑制作用达到一定极限; 3D胶滴模型培养的细胞,随着精油浓度的增加细胞越来越少,染色深度越来越浅; transwell迁移实验提示随着精油浓度增加,细胞侵袭能力的越弱;划痕实验提示随着精油浓度增加,对细胞迁移能力的抑制作用越强。结论:橙皮精油能够抑制B16小鼠黑色素瘤细胞的增殖和侵袭迁移能力。

橘皮与橙皮精油抑菌、抗氧化、抗肿瘤活性研究

目的:研究两种精油的抑菌能力、抗氧化活性与抗肿瘤细胞活性。方法:以橘皮与橙皮为原料提取精油,通过测定枯草芽孢杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌3种指示菌的抑菌圈、最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)研究抑菌能力;通过测定DPPH自由基和OH-自由基的清除能力,研究抗氧化活性;采用MTT比色法检测抗肿瘤细胞活性。结果:橘皮与橙皮精油终产率分别为2.50%和2.37%。橘皮精油的对金黄色葡萄球菌的MIC为25~50(V/V%),MBC为50(V/V%);橙皮精油对金黄色葡萄球菌的MIC为25~50(V/V%),MBC为50(V/V%)。橘皮精油清除DPPH抑制率为33.8%,橙皮精油清除DPPH抑制率为41%;橘皮精油清除羟自由基抑制率为62.3%,橙皮精油清除羟自由基抑制率为54.1%。浓度梯度为0.2、2、20mg/mL的条件下,橘皮精油对肝癌细胞(HepG-2细胞)的抑制率分别为66.3%、67.5%、69.6%;橙皮精油对肝癌细胞HepG-2细胞的抑制率分别为70.4%、74.1%、78.2%。结论:两种精油对3种指示菌均有抑制作用,尤其对金黄色葡萄球菌抑制能力最强,都具有较强抗氧化性,使肿瘤细胞凋亡或坏死的效果显著。

水蒸气蒸馏法提取橙皮精油的影响因素研究

目的研究水蒸气蒸馏法提取橙皮精油的影响因素。方法分别对橙皮的干湿度、颗粒度、蒸馏时间、料液比、NaCl固体添加剂比例等进行单因素实验。结果最佳提取条件为阴干30 d左右,颗粒直径8 mm,蒸馏90 min,料液比1∶1,NaCl固体盐的添加量为橙皮量的2.5%。结论实验数据可靠,最佳提取工艺可行。