欣力康胶囊对血液性肿瘤细胞的增殖抑制作用研究

目的 探索欣力康胶囊在血液肿瘤上应用的可能性,以拓展欣力康胶囊的应用范围。方法 采用MTS比色法检测欣力康胶囊对8株人血液性肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测欣力康胶囊对急性髓系白血病MV-4-11细胞周期阻滞和凋亡促进的作用;采用蛋白免疫印迹法检测欣力康胶囊对MV-4-11细胞内pro-Caspase 3、cleaved-Caspase 3以及NF-κB p65蛋白水平的影响;依托MV-4-11皮下移植瘤裸小鼠模型,考察欣力康胶囊对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。结果 欣力康胶囊对MV-4-11、RS4;11、MM.1S、RPMI-8226、Mino、Jeko-1、OCI-LY10和TMD8细胞增殖抑制的IC_(50)值分别为(54.05±6.33)、(125.33±2.46)、(655.87±7.95)、(153.33±8.50)、(188.70±9.11)、(180.87±7.31)、(186.10±6.55)、(253.53±8.88)μg·mL^(-1);欣力康胶囊可促进MV-4-11细胞凋亡,且具有浓度依赖性,当质量浓度达到500 μg·mL^(-1)时凋亡率为(99.41±0.36)%(P<0.001),而对细胞周期影响较弱;欣力康胶囊可促进MV-4-11细胞中凋亡相关蛋白pro-Caspase 3的剪切,下调NF-κB p65,且呈一定的浓度依赖性;临床用药浓度(1000 mg·kg^(-1))的欣力康胶囊能够显著抑制荷MV-4-11皮下移植瘤小鼠的肿瘤生长,其抑瘤率为57.28%。结论 欣力康胶囊对8种血液性肿瘤细胞株的增殖均有一定的抑制作用,其中对人急性髓性白血病MV-4-11细胞的增殖抑制作用最优,其机制主要是抑制NF-κB通路以及促进细胞凋亡,且在体内药效上,临床用药浓度的欣力康胶囊可显著抑制荷MV-4-11皮下移植瘤小鼠肿瘤的生长。以上结果提示欣力康胶囊可用于血液性肿瘤的辅助治疗。

欣力康胶囊对Lewis肺癌模型小鼠生存期的影响及作用机制初探

目的:观察欣力康胶囊对尾静脉注射肺癌细胞建立的肺转移模型小鼠生存期和生存状态的影响,并分析其潜在的作用机制。方法:尾静脉注射造模,建立Lewis 肺癌(lewis lung carcinoma, LLC)转移模型小鼠,共分3 组,每组各10 只,分别为生理盐水组、低浓度欣力康组(0.08 g/mL)、高浓度欣力康组(0.40 g/mL)。分别观察3 组小鼠精神状态、摄食量、毛色光泽度以及生存期,同时荧光素酶报告基因法(Luciferase assay)分析欣力康胶囊对肿瘤相关信号转导与激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)和核转录因子-κB(nuclear factor-κB, NFκB)信号通路的影响。结果:生理盐水组小鼠普遍表现为精神萎靡、嗜睡,毛色无光泽,基本无活动,且极少进食与饮水;低浓度欣力康组小鼠表现与生理盐水组相似;高浓度欣力康组小鼠精神状态明显改善,毛色相对光泽,活动性增强,且进食与饮水量明显增加。生理盐水组小鼠中位生存时间为17 d,低浓度欣力康组为17.5 d,高浓度欣力康组为21 d,高浓度欣力康组小鼠生存时间明显长于生理盐水组(P <0.05)。欣力康胶囊能够显著抑制肿瘤相关的STAT3 和NFκB 信号通路。结论:欣力康胶囊能够延长肺癌转移模型小鼠的生存时间,改善模型小鼠的生存状态,这可能和欣力康抑制STAT3 和NFκB 信号通路有关。

欣力康胶囊对肿瘤细胞增殖抑制作用初探

目的:初步探讨欣力康胶囊的抑瘤作用,同时分析其可能有效的抗肿瘤活性成分。方法:以MTT法检测欣力康胶囊及其6个单体(人参皂苷、黄芪甲苷、阿魏酸、秋水仙碱、姜黄素、野黄芩苷)对人肿瘤细胞株MDA-MB-231、MCF-7、silla、caski、C33A5增殖的抑制能力,并计算其IC_(50)值。结果:欣力康胶囊对MDA-MB-231、MCF-7、silla、caski、C33 A5抑制的IC_(50)值分别为0.688 mg/m L,0.874 mg/m L,>1.0 mg/m L,>1.0 mg/m L,>1.0 mg/m L,秋水仙碱的IC_(50)值分别为<2μg/m L,<2μg/m L,8.00μg/m L,3.58μg/m L,8.59μg/m L,姜黄素的IC_(50)值分别为10.74μg/m L,14.34μg/m L,18.37μg/m L,13.90μg/m L,22.80μg/m L,人参皂苷、黄芪甲苷、阿魏酸和野黄芩苷的IC_(50)值均为>100μg/m L。结论:欣力康胶囊对5种肿瘤细胞株的增殖均有一定的抑制作用,其所含姜黄素和秋水仙碱可能为其有效成分。

苗族经验方欣力康胶囊的主要药效学研究

目的:评价欣力康胶囊的主要药效作用。方法:通过测定血清半数溶血值、小鼠肿胀试验和碳粒廓清试验来观察欣力康对免疫功能的影响。通过观察小鼠对S180瘤的作用来验证欣力康的抗肿瘤作用。通过观察药物对醋酸诱发的扭体数来观察欣力康的镇痛作用。通过观察环磷酰胺作用后各组动物肝、肾功能,外周血象及骨髓造血功能的变化来观察欣力康的减毒作用。结果:欣力康高剂量组能提高小鼠血清半数溶血素,高、中剂量组均有增强小鼠迟发性免疫反应的作用,可提高小鼠网状内皮系统吞噬功能作用,中、高剂量组能有效抑制小鼠S180瘤的生长,高剂量组对小鼠醋酸所致疼痛有显著的抑制作用,对环磷酰胺产生的毒副作用有明显的减轻作用。结论:欣力康具有明显的扶正作用,可增强细胞免疫和体液免疫功能,可抑制S180肉瘤的生长,具有较强的镇痛作用,同时对环磷酰胺的毒副反应有明显的对抗作用。

欣力康胶囊对膀胱癌5637细胞增殖抑制与转移潜能作用机制研究

目的欣力康胶囊已被临床广泛应用,但其对膀胱癌增殖与转移的潜能目前并不清楚。本研究旨在探讨欣力康胶囊对膀胱癌5637细胞增殖、侵袭和迁移的影响,及其作用机制。方法采用CCK-8法检测膀胱癌5637细胞活力,Trans-well和细胞划痕实验观察细胞侵袭与迁移能力,蛋白质印迹法检测侵袭转移相关基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)表达变化,荧光素酶报告基因法分析欣力康胶囊对肿瘤发展相关信号转导与激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)和核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的影响。结果 CCK-8法检测结果显示,1和5mg/mL欣力康提取物处理膀胱癌5637细胞24h后,能抑制其增殖,细胞存活率分别为(68.33±3.12)%和(27.79±2.06)%,与空白对照组比较差异有统计学意义,F=25.55,P<0.01。Transwell侵袭实验和细胞划痕实验表明,欣力康提取物处理细胞24h后,0、0.5、1和5 mg/mL组侵袭细胞个数分别为512.65±60.05、256.89±35.23、140.37±28.55和39.37±8.88,差异有统计学意义,F=35.28,P<0.001;细胞迁移率分别为(98.21±2.67)%、(58.56±5.02)%、(20.01±3.26)%和(5.68±0.66)%,差异有统计学意义,F=85.55,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,与对照组相比,0.5、1和5mg/mL欣力康组MMP-2、MMP-9和E-cadherin蛋白水平相对表达量均降低,F值分别为40.05、62.52和8.05,均P<0.001。荧光素酶报告基因法结果显示,0.1、0.5、1、5和10 mg/mL欣力康组对STAT3和NF-κB信号通路有抑制作用,差异有统计学意义,F值分别为25.27和31.91,均P<0.01。结论欣力康胶囊能够抑制膀胱癌5637细胞增殖与转移的潜能,其作用机制可能与降低MMP-2、MMP-9及E-cadherin蛋白表达,抑制STAT3和NF-κB信号通路有关。

欣力康胶囊对肺癌A549细胞增殖抑制作用机制及有效成分分析

目的 STAT1、STAT3和NF-κB信号通路是多种细胞因子和生长因子在细胞内传递信号的共同途径,其与肿瘤细胞增殖有密切关联。本研究观察欣力康胶囊提取物对A549细胞增殖的影响,同时研究欣力康胶囊对IFN-γ/STAT1、IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路的作用并分析其有效成分。方法利用MTT法检测欣力康提取物对A549细胞株增殖的影响;利用稳定转染了STAT1/STAT3-luciferase和NF-κB-luciferase报告基因质粒的细胞,分别检测欣力康提取物、欣力康10种药材提取物(丹参、当归、郁金、半枝莲、蛇莓、龙葵、黄芪、雪莲花、红参、轮环藤根)和10种药材对应单体成分(隐丹参酮、阿魏酸、姜黄素、野黄芩苷、齐墩果酸、澳洲茄碱、黄芪甲苷、秋水仙碱、人参皂苷、木兰花碱)对IFN-γ/STAT1、IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路的作用。结果欣力康提取物呈浓度依赖性的抑制A549细胞增殖,0.1、0.5、1、2.5和5mg/mL处理A549细胞,细胞存活率分别为(103.51±10.92)%、(78.14±6.03)%、(65.73±5.78)%、(40.41±9.20)%和(5.89±5.04)%,F=85.25,P<0.001;欣力康提取物对3条信号通路均有抑制作用,0.5、1和5mg/mL提取物对STAT1抑制率分别为(50.90±5.89)%、(70.24±2.39)%和(94.79±7.53)%(F=36.98,P<0.001),对STAT3抑制率分别为(30.39±3.86)%、(48.39±5.64)%和(97.40±5.34)%(F=41.23,P<0.001),对NF-κB抑制率分别为(-16.41±3.67)%、(1.01±3.85)%和(54.60±8.32)%(F=41.23,P<0.001);丹参、轮环藤根、半枝莲、蛇莓、雪莲花和龙葵提取物对3条信号通路均有不同程度抑制作用,10种单体成分对3条信号通路的抑制作用大部分都不同于其对应药材提取物作用。结论欣力康胶囊能够抑制A549细胞增殖,推断其作用机制可能与抑制IFN-γ/STAT1、IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路有关,其中丹参、轮环藤根、半枝莲、蛇莓、雪莲花和龙葵药材可能起主要作用,但其活性并非单一化合物,而是多种化合物成分共同作用的结果。