木犀草素、欧当归内酯A和黄芪皂苷Ⅰ单用及联用对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化的影响

目的 探讨木犀草素(Lut)、欧当归内酯A(Lev)和黄芪皂苷Ⅰ(Ast)单用及联用对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化的影响。方法 取对数生长期的LX-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法考察Lut、Lev和Ast对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的LX-2细胞增殖的影响、联用比例确定及Lut、Lev和Ast联用对TGF-β1诱导LX-2细胞增殖的影响;应用CalcuSyn软件计算Lut、Lev及Ast联用抑制LX-2细胞增殖的联合指数(CI),分析3者联用类型;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3者对LX-2细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,Lut、Lev和Ast联用摩尔比为1∶1∶10,3者单用及联用对TGF-β1诱导的LX-2细胞增殖均具有抑制作用(P<0.05),并呈浓度依赖性;CalcuSyn软件分析结果显示,3者联用对LX-2细胞的增殖抑制率>15%时CI<1,说明3者联用具有协同增效的作用;Western blot结果显示,Lut、Lev及Ast联用能够显著降低TGF-β1诱导的LX-2细胞中α-SMA蛋白的表达(P<0.01),降低LX-2细胞中TGF-β1蛋白的表达(P<0.05)。结论 Lut、Lev和Ast单用及联用均能抑制LX-2细胞的增殖、活化,3者联用作用更强、具有协同增效的作用,该作用可能与下调肝星状细胞TGF-β1蛋白表达有关。

欧当归内酯A对实验性纤维化肝脏NO及内皮细胞功能的影响

目的:探讨欧当归内酯A调节纤维化肝脏NO释放的抗肝纤维化作用机制。方法:40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、欧当归内酯A 3 mg/kg组、欧当归内酯A 6 mg/kg组,每组10只。以四氯化碳(CCl4)与高脂低蛋白饮食复合因素诱导肝纤维化模型,连续6周。药物观察组于造模第4周腹腔注射给药至结束。观察肝组织炎性反应及胶原沉积、eNOS表达及MDA、SOD、NO、NOS水平。体外以800μmol/L氯化钴作用于SK-HEP-1细胞24 h诱导细胞缺氧损伤,药物处理后观察细胞活力、vWF表达、上清及胞内NO水平。结果:与模型组比较,欧当归内酯A各组肝细胞变性和炎性反应坏死有所减轻,纤维化改善;高剂量组SOD和MDA显著改善,NO和NOS降低,eNOS阳性表达下降(P<0.05)。体外实验显示,药物干预后细胞活力得到改善,vWF平均荧光强度减弱,NO释放显著改善(P<0.05)。结论:欧当归内酯A具有抗肝纤维化的作用,其机制可能与抗脂质过氧化损伤,改善内皮细胞功能,调节NO释放有关。

川芎中欧当归内酯A的提取纯化与结构表征

以川芎中的内酯成分得率为指标,选取提取温度、提取时间、液固比、药材颗粒度以及水解p H 5个因素,在单因素考察基础上采用正交实验对提取工艺进行优化,继而分离得到单体化合物,最后用液相色谱质谱(LC MS)联用技术及核磁共振仪(NMR)对产物进行结构表征。结果表明,最佳提取工艺条件为:提取温度30℃,提取时间50 min,液固比15 m L/g,药材颗粒度>150~180μm,水解p H=13.0,川芎内酯得率可达5.91%。在最佳工艺条件下制得的化合物进一步分离得到欧当归内酯A。

HPLC法测定川芎中藁本内酯和欧当归内酯A的含量

[目的]测定川芎药材中的藁本内酯和欧当归内酯A的含量。[方法]采用HPLC法,色谱柱为SymmetryShieldTMRP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;检测波长为280 nm;柱温为30℃;进样量为10μl。[结果]藁本内酯和欧当归内酯A浓度在各自范围内与峰面积的线性关系良好,相关系数R分别为0.999 0和0.999 1;测得各样品中藁本内酯含量为15.97～18.71 mg/g,欧当归内酯A的含量为0.67～0.81 mg/g。[结论]该方法准确,操作较为简便易行,精密度及重现性良好,可用于川芎药材的质量评价。

HPLC法测定新田七痛经胶囊中藁本内酯和欧当归内酯A的含量

目的建立新田七痛经胶囊中藁本内酯和欧当归内酯A含量测定方法。方法采用HPLC法对制剂中藁本内酯和欧当归内酯A进行含量测定。结果藁本内酯和欧当归内酯A能同时在HPLC中进行测定,藁本内酯的进样量在34.5-345μg/m L,线性范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率为99.76%。欧当归内酯A的进样量在0.145-2.9μg/m L线性范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率99.94%。结论所建立的方法简便可靠,可有效控制新田七痛经胶囊的质量。

抚芎与川芎中阿魏酸及欧当归内酯A的含量比较

采用ＲＰ－ＨＰＬＣ测定了抚芎中阿魏酸和欧当归内酯Ａ的含量，并与川芎进行了比较。结果表明，抚芎中阿魏酸的含量与川芎中的相当，但欧当归内酯Ａ的含量却远低于川芎中的含量。

响应面法优化川芎中欧当归内酯A的提取工艺

采用响应面分析法优化川芎中欧当归内酯A的超声辅助提取工艺。在单因素试验的基础上,以提取时间、液固比、提取温度为响应因子,欧当归内酯A质量分数为响应值,采用三因素三水平的响应面分析法优化,得到最佳工艺条件:液固比13 m L/g,提取温度40℃,提取时间62 min。在最佳工艺条件下,欧当归内酯A质量分数为0.525 mg/g,该值比《中国药典》所用方法的值提高48.7%。

欧当归内酯A对人胶质瘤细胞U251细胞凋亡及自噬的影响

目的探讨欧当归内酯A(LA)对人胶质瘤细胞U251凋亡及自噬的影响。方法将对数生长期的U251细胞随机分为空白组、30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组,分别用含有0、30、60、90μmol·L^(-1)的LA培养基培养24、48、72 h,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测4组细胞的增殖能力,应用流式细胞术检测4组细胞培养24 h时的细胞凋亡率。将对数生长期的U251细胞分为空白组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、90μmol·L^(-1)LA组、30μmol·L^(-1)LA+3-MA组、60μmol·L^(-1)LA+3-MA组、90μmol·L^(-1)LA+3-MA组,空白组不加LA和3-MA,其余5组分别加入含0、90、30、60、90μmol·L^(-1)LA和1、0、1、1、1 mmol·L^(-1)3-MA的培养基培养24 h,采用CCK-8检测各组细胞活性。应用Western blot法检测空白组、30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组细胞中p53、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、微管相关蛋白1A/1B-轻链3抗体(LC3)-Ⅰ及LC3-Ⅱ蛋白相对表达量。结果培养24、48、72 h时,30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组和90μmol·L^(-1)LA组的细胞增殖能力显著低于空白组,60μmol·L^(-1)LA组和90μmol·L^(-1)LA组细胞增殖能力显著低于30μmol·L^(-1)LA组,90μmol·L^(-1)LA组细胞增殖能力显著低于60μmol·L^(-1)LA组(P<0.05)。空白对照组培养24、48、72 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。30μmol·L^(-1)LA组培养72 h时的细胞增殖能力显著高于培养24、48 h时(P<0.05),培养24 h与48 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);60μmol·L^(-1)LA组培养48、72 h时的细胞增殖能力显著低于培养24 h时(P<0.05),培养48 h与72 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。90μmol·L^(-1)LA组培养48、72 h时的细胞增殖能力显著低于培养24 h时,培养72 h时的细胞增殖能力显著低于48 h时(P<0.05)。30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组细胞凋亡率显著高于空白组,60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组细胞凋亡率显著高于30μmol·L^(-1)LA组(P<0.05);60μmol·L^(-1)LA组与90μmol·L^(-1)LA组细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。90μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA+3-MA组细胞活性低于空白组、3-MA组、30μmol·L^(-1)LA+3-MA组和60μmol·L^(-1)LA+3-MA组,90μmol·L^(-1)LA组细胞活性低于90μmol·L^(-1)LA+3-MA组(P<0.05);空白组、3-MA组、30μmol·L^(-1)LA+3-MA组和60μmol·L^(-1)LA+3-MA组细胞活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。30μmol·L^(-1)LA组、60μmol·L^(-1)LA组和90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中p53和Bax蛋白相对表达量高于空白组,30μmol·L^(-1)LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量低于空白组,90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中Bcl-2蛋白相对表达量低于空白组,90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量高于空白组(P<0.05);30μmol·L^(-1)LA组和60μmol·L^(-1)LA组U251细胞中Bcl-2蛋白相对表达量及60μmol·L^(-1)LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中p53、Bcl-2蛋白相对表达量低于30μmol·L^(-1)LA组和60μmol·L^(-1)LA组,90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中Bax、caspase-3蛋白相对表达量高于30μmol·L^(-1)LA组,90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量高于60μmol·L^(-1)LA组(P<0.05)。90μmol·L^(-1)LA组与60μmol·L^(-1)LA组U251细胞中Bax蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。60μmol·L^(-1)LA组U251细胞中Bax、caspase-3蛋白相对表达量高于30μmol·L^(-1)组(P<0.05)。60μmol·L^(-1)LA组与30μmol·L^(-1)组U251细胞中p53、Bcl-2蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。4组U251细胞中LC3-Ⅰ蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。60μmol·L^(-1)LA组、90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中LC3-Ⅱ蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著高于空白组和30μmol·L^(-1)LA组(P<0.05);30μmol·L^(-1)LA组与空白组U251细胞中LC3-Ⅱ蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值比较差异无统计学意义(P>0.05);60μmol·L^(-1)LA组与90μmol·L^(-1)LA组U251细胞中LC3-Ⅱ蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论LA能够通过增加凋亡蛋白p53、Bax、caspase-3和减少Bcl-2蛋白的表达,以及增加自噬蛋白LC3-Ⅱ蛋白的表达,抑制U251细胞增殖,促进U251细胞凋亡和自噬。

超声波辅助提取川芎中欧当归内酯A的动力学模型

为建立川芎中的苯酞二聚体欧当归内酯A (LA)的提取动力学模型,以甲醇为溶剂,以欧当归内酯A质量浓度为考察指标,采用单因素试验对川芎中欧当归内酯A进行超声波辅助提取;在Fick第二扩散定律的基础上,通过合理化处理,求得该过程的扩散活化能、表观扩散速率常数等动力学参数的值。最终建立川芎中欧当归内酯A的提取动力学模型,检验结果表明数据吻合基本良好。该模型反映了提取液中欧当归内酯A的质量浓度与提取温度、超声功率、颗粒半径、液固比以及提取时间之间的关系,在提取方法、药材种类、提取溶剂一定的情况下,可预测不同提取条件下提取液中欧当归内酯A的浓度。

川芎有效成分欧当归内酯A的测定与分离研究

采用HPLC法测定川芎中欧当归内酯A含量,并对分析方法进行了方法学考察;在此基础上采用高速逆流色谱法和柱层析法对欧当归内酯A进行了分离制备.精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于1%,回收率大于98%,表明HPLC法适合川芎中欧当归内酯A含量的测定.利用高速逆流色谱技术,从800 mg乙酸乙酯提取物中得到欧当归内酯A 4.55 mg,纯度达到98.63%,回收率98.42%;采用柱层析法从川芎的石油醚提取物680g中能得到静置结晶的欧当归内酯A 1.827g(纯度为99.56%),将剩余油状物经结晶与重结晶,得到欧当归内酯A 0.835g(纯度99.37%).

钾素对当归阿魏酸松柏酯、丁烯基酞内酯及欧当归内酯A含量的影响

目的研究不同钾素(K_2O)施用量对当归阿魏酸松柏酯、丁烯基酞内酯及欧当归内酯A累积量的影响。方法以钾素(K_2O)施用量为试验因素,设150(K_1),300(K_2),450(K_3),600(K_4),750 kg/hm^2(K_5)5个处理。田间试验采用随机区组设计,每个处理重复3次。在7—11月当归叶盛期到采收期,每25 d左右在田间取样1次,每次取样5株。采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同生长期当归根系中阿魏酸松柏酯、丁烯基酞内酯及欧当归内酯A的含量。结果钾素施用量对当归阿魏酸松柏酯含量影响显著(P<0.05),而对其他2个成分的影响不显著,其中钾素施用量为450 kg/hm^2时效果最好。结论合理施用钾素能促进当归品质的形成。

RP-HPLC法测定田七痛经胶囊中阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A

目的建立高效液相色谱法测定田七痛经胶囊中阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A的方法。方法选用Thermo Acclaim C_(18)色谱柱,Thermo SCIENTIFICSyncronis C18色谱柱;检测波长为321、280 nm;体积流量1.0 m L/min;柱温35℃结果阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A的质量浓度与峰面积分别在1.12~112.30、1.33~132.60、0.96~95.50μg/m L呈良好的线性关系;回归方程分别为Y=46 335 540 X+44 186.71(r=0.998),Y=14 514 060 X+8 715.27(r=0.999),Y=22 031 250 X+16 472.10(r=0.999)。结论该方法准确,简便,灵敏,可作为田七痛经胶囊质量控制的方法。

祛寒逐风颗粒质量标准研究

目的通过对祛寒逐风颗粒进行定性鉴别、定量分析,建立该制剂的质量控制方法。方法参照《中华人民共和国药典》方法,对秦艽、威灵仙及毒性成分乌头碱进行定性鉴别;采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃,流速1.0 mL/min,进样量10μL,以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,波长275、322 nm,同时测定龙胆苦苷、阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A含量;采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样量10μL,以乙腈-0.1%磷酸(90∶10,V/V)水溶液为流动相,波长210 nm,测定齐墩果酸含量。结果薄层色谱斑点清晰,专属性强,分离度高,阴性无干扰,能有效鉴别秦艽、威灵仙,并对乌头碱进行限量检查。龙胆苦苷、阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A、齐墩果酸分别在0.686~6.86μg(r=0.9994)、0.0134~0.134μg(r=0.9996)、0.016~0.16μg(r=0.9996)、0.002~0.02μg(r=0.9990)、0.011~0.088μg(r=0.9995)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.90%、99.44%、99.14%、97.74%、95.32%,RSD分别为1.49%、2.69%、2.24%、1.61%、2.79%。结论本研究建立的方法简便、准确,稳定性、重复性好,可用于祛寒逐风颗粒的质量控制。

UPLC指纹图谱结合化学计量学方法比较当归和欧当归药材的成分差异

目的 建立当归Angelica sinensis和欧当归Levisticum officinal药材的指纹图谱,结合化学计量学方法寻找二者的成分差异,从而为建立欧当归掺伪当归的鉴别方法提供依据。方法 采用UPLC法建立指纹图谱,色谱柱为Waters Cortecs T3柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm);流动相为0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;柱温35℃;检测波长为210 nm。采用相似度评价、主成分分析(principal component analysis,PCA)和层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)对2种药材的指纹图谱进行评价,寻找2者的成分差异。采用UPLC-MS/MS及NMR波谱等技术对主要差异性成分进行鉴定。结果 从当归和欧当归指纹图谱中分别识别出23个和19个共有峰,与当归指纹图谱共有模式相比,当归样品组内有3批样品相似度较低,为0.59~0.80,其余样品相似度均大于0.99,而欧当归与之相比,相似度在0.53~0.94,且组内差异较大。PCA和HCA结果显示,当归和欧当归可明显分为2组,对区分贡献较大的色谱峰有6个,鉴定为色氨酸、阿魏酸、E-藁本内酯、欧当归内酯A异构体、绿原酸和法卡林二醇,其中后2种成分在欧当归中含量较高,其余成分在当归中含量较高。结论 建立的UPLC指纹图谱结合化学计量学评价方法,简便可行,可有效区分当归和欧当归并揭示其差异性成分,为当归的质量控制及掺伪欧当归鉴别方法建立提供依据。同时首次从欧当归中分离得到法卡林二醇,该化合物为欧当归区别于当归的主要成分。

川芎药材薄层指纹色谱鉴别研究

目的:建立川芎药材薄层指纹色谱鉴别方法。方法:以阿魏酸对照品、欧当归内酯A对照品、藁本内酯对照品和川芎对照药材为对照,且与藁本、山川芎作比较,采用薄层色谱法进行鉴别研究,并计算其相似度。结果:川芎供试品色谱中,在与对照品色谱和对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,以甲苯-冰醋酸-甲醇(3∶1∶3)、正己烷-乙酸乙酯-甲酸(3∶1∶0.05)、正己烷-乙酸乙酯-甲酸(7∶1∶0.05))展开后Rf值适中,斑点清晰且与藁本、山川芎薄层指纹色谱上有明显的区别。结论:建立的薄层指纹色谱鉴别方法对川芎中阿魏酸、欧当归内酯A和藁本内酯鉴别有较好的适应性,重现性好,为提升其质量标准提供了技术支撑。

一测多评法测定川芎中7种成分含量

目的:建立一测多评法(QAMS)测定川芎中绿原酸、川芎嗪、阿魏酸、洋川芎内酯A、正丁基苯酞、Z-藁本内酯、欧当归内酯A 7种成分的含量,并验证该法在川芎质量控制中应用的可行性。方法:以结构稳定的阿魏酸为内参物,确定其余6种化学成分的相对校正因子(fk/s),实现一测多评;同时采用外标法测定各化学成分的含量,比较其与QAMS法的差异。结果:确定了6种化学成分的相对校正因子(fk/s);6批川芎中7种成分QAMS法与外标法测定值间无显著差异。结论:QAMS法能准确地分析川芎中7种化学成分的含量,可用于川芎中多指标质量控制。

川芎调节血脑屏障通透性的作用及机制研究

目的探讨川芎Chuanxiong Rhizoma调节血脑屏障通透性的作用特点,并从紧密连接蛋白、外排蛋白表达、埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白(ezrin/radixin/mesin,ERM)磷酸化水平变化的角度阐述影响血脑屏障通透性的机制。方法小鼠单次给予川芎提取物(5.8 g/kg)后iv不同相对分子质量(4×10^(3)、4×10^(4)、7×10^(4)、1.5×10^(5))的异硫氰酸荧光素-葡聚糖(fluorescein isothiocyanate-dextran,FITC-dextran),测定给药后0、0.5、1、2、4、6、8 h脑组织中FITC-dextran的荧光强度,定量描述川芎对体内血脑屏障通透性的影响。建立b End.3细胞单培养血脑屏障模型,给予川芎单体成分洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、阿魏酸、洋川芎内酯I、藁本内酯、欧当归内酯A、4-羟基-3-丁基苯酞,比较相同作用时间内血脑屏障模型中荧光素钠(fluorescein sodium,Na-F)的表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp),确定各成分开放血脑屏障的效应。采用Western blotting检测川芎提取物给药前后小鼠脑组织及洋川芎内酯I给药b End.3细胞中闭锁小带蛋白1(zonula occluden-1,ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、血管内皮细胞钙黏合素(VE-cadherin)、p-ERM/ERM的表达水平。结果川芎提取物给药0.5 h后可显著增加小鼠脑组织中FITC-dextran(相对分子质量4×103)的透过量(P<0.001),作用强度随给药时间延长减弱,但对相对分子质量4×10^(4)、7×10^(4)、1.5×10^(5)的FITC-dextran透过量无影响。在脑组织中,川芎提取物给药0.5 h时下调ZO-1、Occludin蛋白表达(P<0.05),上调P-gp蛋白表达;给药2 h时上调ZO-1、Occludin蛋白表达(P<0.05、0.01),下调P-gp蛋白表达(P<0.01);给药8 h时,ZO-1、Occludin、P-gp的蛋白表达水平与对照组无明显差异。不同浓度(1、10、100μmol/L)的洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、阿魏酸8 h给药时间内显著增加Na-F透过血脑屏障模型的Papp,其中洋川芎内酯I的促透效应最强。洋川芎内酯I(10μmol/L)给药bEnd.3细胞0.5 h时可下调Occludin、ZO-1、p-ERM/ERM的蛋白表达(P<0.01),给药1 h时上调Occludin、ZO-1、p-ERM/ERM的蛋白表达(P<0.01),给药8 h时Occludin、ZO-1、p-ERM/ERM的蛋白表达水平与对照组无明显差异。结论川芎在一定程度上可增加血脑屏障通透性,且该作用具有时效性,其机制与调节Occludin、ZO-1、P-gp的蛋白表达及ERM磷酸化水平有关。

以药效成分群-活性-功效关联作用筛选当归质量标志物

目的基于质量标志物(quality markers,Q-Marker)概念,通过构建当归的药效成分群-生物活性关联网络,确定影响当归药材质量的Q-Marker,建立当归药材的整体质控方法。方法以当归药材表征成分结合主成分分析结果,对15批次不同产地当归药材差异显著的活性成分进行筛选,将初步选定的差异成分作为当归质控的药效成分群。基于关联规则,建立体外、体内活性成分筛选评价模型,通过挖掘组分间关系,以此确定当归药材的Q-Marker,并建立了Q-Marker同时定量的测定方法。结果经UPLC-TOF/MS技术及药动学参数预测,找到当归中11个具有潜在药效活性的药效成分群。经药效成分群-生物活性关联网络分析,将阿魏酸、Z-藁本内酯和欧当归内酯A作为当归质控的Q-Marker,其方法学结果显示,3种化合物线性关系良好,r>0.990,精密度、重复性和稳定性良好,平均加样回收率范围为99.18%~100.25%。结论基于药效成分群-生物活性关联概念,采用多元统计结合液质联用分析技术的当归药材Q-Marker辨析方法,可以初步明确与当归药效紧密联系的化学成分来源,为当归的整体质量控制提供相关数据。

高效液相色谱法同时测定还脑益聪方中5种川芎成分含量

目的 建立还脑益聪方中阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、藁苯内酯和欧当归内酯A 5种成分含量测定方法,探究其物质基础。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱AgilentExtend-C_(18)(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相:甲醇(A),0.3%磷酸溶液(B),乙腈(C);流速:1m L/min;柱温:30℃;检测波长:280nm。结果 还脑益聪方中川芎的5种化学成分均被检测到,建立的方法无阴性干扰,5种成分均达到良好的分离效果,标准曲线线性范围良好。结论 该方法简便稳定,重复性好,可用于还脑益聪方中川芎成分的定量检测,为还脑益聪方治疗AD的物质基础提供依据。

当归药材热风-微波联合干燥方法研究

目的研究热风-微波联合干燥方法加工当归药材的可行性,并对加工药材进行质量评价研究。方法分别对热风干燥温度、热风干燥时间、微波干燥电流、微波干燥时间进行考察,根据《中国药典》2015年版当归项下指标对加工药材进行质量评价,结合微生物数量和产能,选出最优工艺;分别检测最优工艺加工样品、硫熏样品和阴干样品的微生物数量、重金属及有害元素量和10种活性成分(阿魏酸、阿魏酸松泊酯、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、E-藁本内酯、Z-藁本内酯、正丁烯基苯酞、riligustilide、欧当归内酯A)量。结果最终确定热风(70℃)干燥20 h+微波(100 m A)干燥6 min为最优工艺。经新方法加工的样品微生物数量与硫熏样品相当,所加工样品重金属及有害元素均未超标,并且对药材活性成分无显著影响。结论经新方法加工的当归药材各项理化指标均符合《中国药典》2015年版规定,热风-微波联合干燥技术可以作为当归药材产地加工中的一种快速干燥方法。