云锦杜鹃菌根真菌吸收氮源特性及其接种效应

【目的】研究从云锦杜鹃根系分离的欧石南菌根(eriocoid mycorrhiza,ERM)真菌对铵态氮、硝态氮和无机氮吸收特性及其接种效应,检测ERM菌株吸收利用不同氮源能力及筛选培养菌株适宜的氮源,并分析ERM对寄主植物氮源吸收的影响。【方法】采用菌丝干重定量研究菌株的氮源吸收特性;在不同氮源培养基上,采用单菌株接种无菌云锦杜鹃(Rhododendron fortunei)幼苗研究ERM对寄主植物生长的影响。【结果】供试ERM真菌菌株在不同氮源培养基中生长量差异明显,所有菌株在各单一氮源培养基中菌丝干重均增加,其中铵态氮和硝态氮中生长量较大;各氮源培养基上,菌株接种幼苗生长均优于非接种苗,而且在牛血清蛋白培养基上接种苗干重显著高于其它氮源。【结论】铵态氮和硝态氮是供试ERM菌株培养的比较适宜氮源;ERM增加了云锦杜鹃对氮源的吸收,尤其是硝态氮和有机氮的吸收。

云锦杜鹃ERM真菌氮源吸收特性及其接种效应

本文采用菌丝干重定量研究从云锦杜鹃(Rhododendron fortunei)根系分离的菌根(Eriocoid Mycorrhiza,ERM)真菌的氮源吸收特性;在不同的氮源培养基上,采用单菌株接种无菌云锦杜鹃幼苗研究ERM对宿主植物生长的影响。结果表明,菌株在无机氮中生长量较大;在不同氮源培养基上,菌株接种幼苗生长均优于非接种苗,尤其在牛血清蛋白和硝态氮培养基上,接种苗优势最为明显。

锦绣杜鹃菌根真菌rDNA ITS序列分析及接种效应研究

利用rDNA ITS序列对锦绣杜鹃菌根真菌的16个菌株进行了分类分析。根据菌株ITS序列全长计算各菌株间序列相似度和遗传距离,并与GenBank中最相似菌株序列构建系统发育树。结果表明:16个菌株在系统树上聚为3个大分支。其中7个菌株在支持率为100%的基础上与树粉孢属真菌Oidiodendron sp.聚为一类;2个菌株与未鉴定的杜鹃花科植物根系真菌unidentified root associated fungi聚为一类,支持率为100%;其他7个菌株在98%的支持率上与几种未命名的欧石楠类菌根真菌聚为一大类。根据锥虫蓝染色压片检测结果,16个菌株的云锦杜鹃接种苗根系内均观察到菌根侵染细胞,初步确定16个菌株均为杜鹃花类菌根真菌。16个菌株均对云锦杜鹃的生长表现为有益作用,接种幼苗的平均株高和平均干重均高于对照。

云锦杜鹃菌根显微结构观察

采用扫描电镜、锥虫蓝染色压片和树脂切片法观察了云锦杜鹃（Rhododendron fortunei L．）菌根显微结构。结果表明：云锦杜鹃毛根由1层表皮细胞、1～2层皮层细胞和狭小的中柱组成；表面没有根毛，包裹着1层或疏松或紧密的菌丝层；菌根真菌的侵染没有改变毛根基本解剖结构，表皮细胞内具有欧石南类菌根（ericoid mycorrhizal，ERM）结构；菌丝复合体多出现在幼嫩毛根表皮细胞内，90％以上含有菌丝体的表皮细胞壁加厚不明显；根据菌丝及菌丝圈的形态判断，至少两类真菌参与云锦杜鹃ERM的形成，一类为粗菌丝形成紧密菌丝圈，另一类为细菌丝形成松散菌丝圈。

蓝莓根系复合共生体及其根区土壤中AM真菌调查

蓝莓Vaccinium uliginosum是欧石南菌根(ericoid mycorrhiza,ERM)真菌典型的寄主植物,但同时也可与丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)真菌和深色有隔内生真菌(dark septate endophytes,DSE)共生形成复合共生体。本研究旨在调查和评价不同栽培体制下蓝莓成年树花果期根系共生体发育状况及其根区土壤中AM真菌资源分布状况,以期为优质蓝莓栽培管理提供理论依据和技术基础。从青岛佳沃蓝莓基地采集暖棚、冷棚和露地3种方式栽培的9–10年生‘蓝丰’、‘奥尼尔’和‘公爵’蓝莓的根系及根区土样,观察测定根系共生体着生数量、根区土壤中AM真菌孢子数量和菌种组成。结果表明,所有栽培方式下供试品种蓝莓根系均形成ERM、AM和DSE结构及其复合共生体;其中,AM着生数量最多,其次是ERM,DSE侵染率最低;复合共生体中则呈现ERM+AM>ERM+DSE>ERM+AM+DSE;蓝莓复合共生体着生数量、AM真菌侵染率、丛枝着生率及孢子数量等不同种植方式下呈现暖棚>冷棚>露地,不同品种呈现‘蓝丰’>‘公爵’>‘奥尼尔’,而ERM和DSE侵染率也呈现上述变化趋势。依据AM真菌形态特征,供分离鉴定获得5属11种AM真菌,以暖棚栽培条件下分离获得的AM真菌数量最多,‘蓝丰’根区土壤中分布的AM真菌属种最多。暖棚内成年树花果期蓝莓根系共生体发育健全,AM真菌种类和孢子数量较多,可能有利于提高蓝莓的产量、改善果实品质和抗逆性。

长白山牛皮杜鹃ERM真菌Hyaloscypha hepaticicola及其生物学特性

牛皮杜鹃Rhododendron aureum是长白山自然保护区苔原带优势植被之一,为适应高山苔原带的贫瘠土壤和寒冷气候条件,其与部分土壤真菌形成的欧石南菌根ericoid mycorrhiza(ERM)为其生长和繁殖发挥了关键生态功能。本文以分离自长白山苔原带牛皮杜鹃根系的2株常见的ERM真菌为研究对象,通过形态学观察和ITS基因序列同源性比对及其系统进化分析确定其分类地位,并利用单因素试验研究其生物学特性。结果表明,通过形态学和rDNA ITS序列分析,2个菌株均鉴定为苔生晶杯菌Hyaloscypha hepaticicola。该菌最适培养条件为:葡萄糖为碳源,酵母粉为氮源,温度为20℃,pH 4,全黑暗培养。该菌适宜在相对低温和偏酸环境生长,与其在长白山苔原带生长的土壤条件和气候条件存在紧密联系。本研究为苔生晶杯菌及其他ERM真菌的深入研究和资源利用奠定了理论基础。