正丁酸钠对脓毒症大鼠高迁移率族蛋白B1表达的拮抗作用

目的观察正丁酸钠对严重脓毒症时多器官高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因表达的影响及意义.方法采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)造成脓毒症模型.动物分为正常对照组(n=10)、假手术组(n=10)、盲肠结扎穿孔组(n=20)及正丁酸钠治疗组(n=20).留取肝、肺、肾及小肠组织和血标本,分别检测HMGB1 mRNA表达及各器官功能指标;同时观察正丁酸钠对脓毒症大鼠的治疗效果(n=57).结果正丁酸钠处理可显著降低腹腔感染后12及24h大鼠肝、肺、肾及小肠等组织HMGB1 mRNA表达,感染后12h血清丙氨酸转氨酶、肌酐水平比未治疗组显著降低(P<0.01),24h肺组织髓过氧化物酶活性亦明显下降(P<0.01).早期给予正丁酸钠治疗,大鼠1～6天存活率显著高于未治疗组(P<0.05或0.01). 结论正丁酸钠对晚期致炎因子HMGB1介导的炎症反应具有潜在的治疗作用.

中国鲎素和正丁酸钠对人胃腺癌BGC-823细胞形态与超微结构的影响

目的以正丁酸钠为平行对照,比较观察鲎素和癌细胞诱导分化物对人胃癌细胞形态与超微结构变化的影响。方法采用光镜、扫描电镜与透射电镜,观察经2.0 mg/L鲎素、2.0 mmol/L正丁酸钠和1.0 mg/L鲎素+1.0 mmol/L正丁酸钠组合处理的人胃腺癌BGC-823细胞。结果光镜观察显示,鲎素和正丁酸钠以及鲎素+正丁酸钠处理的BGC-823细胞形态均较为一致,细胞体积增大、趋于扁平铺展状态,细胞核质比例减小,细胞核形状较圆整,核仁数量减少。扫描与透射电镜观察可见经鲎素、正丁酸钠及其组合处理的BGC-823细胞均出现细胞表面微绒毛稀少,细胞边缘丝状伪足减少,片状伪足增多;细胞核形态较规则,核内异染色质减少,常染色质增多:细胞质内线粒体增多,结构较为一致,高尔基复合体呈较为典型发达状态,并出现粗面内质网增多和多聚核糖体减少等变化。结论鲎素具有与正丁酸钠等诱导分化物相似的改变人胃癌细胞形态与超微结构恶性表型特征的作用,和与诱导分化物协同加成的诱导分化效果。

正丁酸钠诱导人肝癌细胞表型分化的观察

目的 探讨ＳＢ对人肝癌细胞的诱导分化作用。方法 以０－２ｍｍｏｌＬ的ＳＢ作用于培养的人肝癌细胞ＧＨＣ－ ３，作用３０ 天后恢复正常培养，观察癌细胞表型的变化。结果 人肝癌细胞生长抑制；ＳＢ作用３０ 天细胞形态由多角型转变为棱形，ＣｏｎＡ凝集现象消失，琼脂集落形成率下降；染色体主流范围变窄，二倍体及亚二倍体比例升高；３Ｈ－ ＴｄＲ 掺入率、细胞ＤＮＡ含量下降与对照比较有显著差异（ Ｐ＜ ０－０１） ；并观察到，上述细胞再经不含ＳＢ 的正常培液继续培养三代后该细胞表型未发生明显改变。结论 人肝癌细胞在低剂量丁酸钠持续作用下，某些恶性表型可发生部分逆转，且这些改变在恢复正常培养后可保持相对稳定。

正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-2侵袭、迁移的影响及机制研究

目的探讨不同浓度正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-2侵袭、迁移的影响与其作用机制。方法噻唑蓝(MTT)法探索正丁酸钠作用ACC-2细胞的最佳浓度,Transwell小室实验检测正丁酸钠对ACC-2细胞侵袭、迁移能力的影响,Western blot和实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别检测5组浓度药物作用后ACC-2细胞中高迁移率族蛋白1(HMGB1)、TLR4的mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mmol/L 5组浓度的正丁酸钠均能抑制ACC-2细胞增殖(P<0.05)且呈明显浓度依赖性;5组浓度正丁酸钠对细胞侵袭能力的影响差异无统计学意义(P>0.05);2.500、5.000、10.000mmol/L浓度正丁酸钠可以抑制ACC-2细胞的迁移能力(P<0.05),同时降低ACC-2细胞HMGB1、TLR4的mRNA及蛋白表达(P<0.05);相关性分析显示TLR4蛋白表达的降低与HMGB1的抑制呈正相关(r=0.810,P<0.05)。结论正丁酸钠能够抑制ACC-2细胞增殖,浓度较高时可以抑制ACC-2细胞的迁移能力,同时降低HMGB1、TLR4的mRNA与蛋白表达,提示NaB对ACC-2迁移能力抑制可能通过下调HMGB1、TLR4的mRNA及蛋白表达来实现。

正丁酸钠对涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-M侵袭、迁移的影响及机制研究

背景与目的:有研究证实,正丁酸钠(sodium butyrate,Na B)对肿瘤细胞具有抑制增殖、诱导分化和促凋亡的作用,但对涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)的作用机制尚不明确。该研究主要探讨不同浓度Na B对SACC细胞株ACC-M侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:MTT法探索Na B作用ACC-M细胞的最佳浓度并观察细胞的生长情况,Transwell小室实验检测Na B对ACC-M细胞侵袭、迁移能力的影响,实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测5组浓度药物作用后ACC-M细胞中高迁移率蛋白-1(high mobility group box-1,HMGB1)、toll样受体-4(toll like receptor-4,TLR4)m RNA和蛋白的表达。结果:与对照组相比,加入Na B 0.625、1.25、2.5、5及10 mmol/L的5组均能抑制ACC-M细胞增殖且呈明显浓度依赖性(P<0.05)。5组浓度Na B均可抑制ACC-M细胞体外侵袭和迁移能力(P<0.05),同时能降低ACC-M细胞HMGB1、TLR4 m RNA及蛋白的表达(P<0.05);相关性分析显示TLR4蛋白表达的降低与HMGB1的抑制呈正相关(r=0.810,P<0.05)。结论:Na B可抑制ACC-M细胞增殖,显著降低ACC-M细胞的侵袭和迁移能力,同时降低HMGB1、TLR4 m RNA和蛋白的表达,且2者表达量呈明显正相关,提示Na B可能是通过下调HMGB1、TLR4 m RNA和蛋白的表达来实现对ACC-M细胞侵袭、迁移能力的抑制。

正丁酸钠对人胃腺癌细胞染色体数目和DNA含量的影响

培养的人胃腺癌MGc 80-3细胞经过正丁酸钠处理7天后,生长抑制率达50.7%,约有90%的细胞形态发生分化,其超微结构亦有显著改变。而且,在染色体数目上,超二倍体细胞由对照组的78%增加到实验组的96%,超三倍体和超四倍体细胞则分别从6%和14%下降至2%。同时应用~3H-TdR放射自显影和福尔根细胞光度法测定未标记细胞(G_1期)DNA含量,结果显示实验组比对照组降低了。而且在实验组的同一制片中,未分化细胞DNA含量平均为超六倍体值(DI=3.67和3.56),其中90%的细胞超过6C;分化细胞DNA含量则平均为近四倍体值(DI=2.03和1.99),其中近60%的细胞少于4C。两者差异统计显著,表明形态分化的人胃腺癌细胞的遗传物质含量明显减少,但这些细胞并非就是正常二倍体细胞。

正丁酸钠对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用的研究

目的:观察正丁酸钠拮抗高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的保护作用。方法:建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,将40只雄性Wistar大鼠随机先分成5组(n=8):假手术组,缺血组,预处理组、治疗1组、治疗2组。分别于缺血再灌注6h前后给药观察血清AST、ALT、TNF-α水平及肝组织HMGB-1含量变化,并行肝组织病理学检查。结果:缺血再灌注组中HMGB-1的含量高,预处理组、治疗1组、治疗2组这三组中相应时间点的HMGB-1含量、AST、ALT水平、TNF-α含量均较缺血再灌注组中低,预处理组较治疗1组、治疗2组效果显著且肝细胞病理损害较轻。结论:正丁酸钠预处理组对肝脏缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。

正丁酸钠对失血性休克大鼠肺部HMGB1 mRNA的调节

目的研究正丁酸钠（sodium butyrate）对失血性休克大鼠肺部HMGB1 mRNA的影响。方法由股动脉抽血建立失血性休克模型。30只动物随机分为假手术组、休克复苏组及正丁酸钠治疗组，于复苏后12h处死动物。检测肺湿／干质量（W／D）比值、支气管肺泡灌洗液（BALF）中中性粒细胞（PMN）百分比和总蛋白浓度；测定肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）含量；RT—PCR法检测肺组织HMGB1 mRNA表达。结果正丁酸钠组与休克复苏组相比，肺W／D、BALF中总蛋白含量及PMN百分比显著减少（P〈0．05），肺组织MPO和MDA含量、肺组织HMGB1 mRNA表达明显降低（P〈0．05）。结论正丁酸钠对失血性休克诱发的肺损伤有保护作用，可能与下调HMGB1 mRNA表达有关。

正丁酸钠对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾通道的影响

目的研究正丁酸钠对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾通道(Ito)的影响。方法酶解法分离单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,研究0.5,2,5mmol/L浓度的正丁酸钠对急性分离的成年大鼠心室肌细胞Ito动力学特性的影响。结果 0.5,2,5mmol/L的正丁酸钠对Ito峰电流的抑制率分别为2.19%±3.35%,39.56%±7.92%,73.63%±5.37%。使Ito电流的I-V曲线下移,失活曲线左移、失活后恢复曲线右移。结论正丁酸钠对Ito具有抑制作用,使得Ito失活加快,失活后恢复时间延长。

正丁酸钠对人胃腺癌细胞超微结构的影响

本实验观察到正了酸钠能有效地抑制人胃腺癌细胞系的增殖,查明其生长特性。在光镜下看到,经过正丁酸钠处理的胃癌细胞体积增大,充分铺展,核与质比例下降。电镜下可见这些细胞表面微绒毛减少或消退;高尔基复合体组数增多,体积较大,具有典型的完整结构;粗面内质网变长;游离核糖体减少。这两类形态结构的变化可作为癌细胞分化的指标。

正丁酸钠逆转人肝癌细胞恶性表型的动态观察

目的探讨正丁酸钠对人肝癌细胞恶性表型的逆转作用。方法以0．2mmol／L的正丁酸钠（sodiumbutyrate，SB）作用于培养的人肝癌细胞GHC－3，动态观察癌细胞生长、形态、ConA凝集性、琼脂集落形成率、染色体数目、DNA合成、DNA含量等表型的变化。结果SB作用7天，人肝癌细胞生长抑制；SB作用15天ConA凝集现象减弱；作用30天后细胞形态由多角型转变为棱形，细胞ConA凝集现象基本消失；经SB作用15天、30天、45天的细胞球脂集落形成率由对照组的4．54％下降为2．53％、1.45％、1．31％；SB作用30天、45天细胞3小时3H－TdR掺入率由2330．24士10．31cpm／105cells下降为1372．5123．41cpm／105cells和1136．23土17．23cpm／105cells，细胞DNA含量由198．511．18μg/107cells下降为134．78土0．53μg/107cells和104．78土0．53μg/107cells；均有显著差异（P＜0．01）。染色体主流范围变窄，二倍体比例逐渐升高而亚三倍体比例逐渐下降，三倍体消失。结论人肝癌细胞在正了酸钠持续作用下，某些恶性表型可发生进行性逆转。

正丁酸钠对人肝癌细胞的生物学效应

探讨正丁酸钠对人肝癌细胞的生物学效应。方法：以１ｍｍｏｌ／Ｌ的ＳＢ的作用于培养的人肝癌细胞，观察肝癌细胞某些生物学行为的变化，结果：在ＳＢ作用下，人肝癌细胞生长抑制，细胞形态改变，ＣｏｎＡ凝集现象消失，琼脂集落形成率下降，染色体主流范围变突，二倍体及亚二倍体比例升高，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率、细胞ＤＮＡ含量下降与对照比较有显著差异，结论：人肝癌细胞在丁酸钠作用下，某些恶性生物学行为可发生部分逆性。

正丁酸钠对培养的细胞的多种作用

正丁酸钠是一种只含四个碳原子的简单有机酸盐,但它对培养的哺乳动物细胞和培养的人细胞却有多种多样的作用,这的确是一个谜。为了引起更多的注意,也为了能早日将已取得成果加以推广利用。

正丁酸钠对肺腺癌细胞增殖、凋亡和Notch信号通路的影响

目的 探讨正丁酸钠对肺腺癌细胞增殖、凋亡和Notch信号通路的影响。方法 体外培养肺腺癌细胞,采用MTT法检测不同正丁酸钠浓度(0 mmol/L、1.25 mmol/L、2.50 mmol/L、5.00 mmol/L、10.00 mmol/L、20.00 mmol/L和40.00 mmol/L)对肺腺癌细胞生长的抑制效果,筛选出正丁酸钠的有效作用浓度和作用时间进行后续实验,同时设置对照组(不做任何干预)。采用Western blot检测各组肺腺癌细胞的Ki-67、增殖性细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Notch受体1(NOTCH1)、Hes家族BHLH转录因子1(HES1)、周期素D3(cyclin D3)蛋白表达水平,采用克隆形成实验检测各组肺腺癌细胞的克隆形成率,采用流式细胞术检测各组肺腺癌细胞的凋亡率。结果 随着药物浓度的升高和培养时间的延长,正丁酸钠对肺腺癌细胞的抑制率逐渐升高(均P<0.05),呈现浓度依赖性和时间效应。干预72 h后,对照组、5.00 mmol/L正丁酸钠组、10.00 mmol/L正丁酸钠组、20.00 mmol/L正丁酸钠组的Ki-67、PCNA、Bcl-2、NOTCH1、HES1和cyclin D3蛋白表达水平和克隆形成率均依次降低,Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率均依次升高(均P<0.05)。结论 正丁酸钠可抑制肺腺癌细胞的生长、增殖并促进其凋亡,这可能与其抑制增殖相关蛋白和Notch信号通路相关蛋白的表达,以及促进凋亡相关蛋白的表达有关。

正丁酸钠对急性CO中毒家兔血液循环的影响

目的：观察正丁酸钠对急性CO中毒后家兔血液循环的影响,探讨其脑保护的可能作用机制。方法：取24只普通级健康家兔,随机分为正常对照组、急性CO中毒组（模型组）和急性CO中毒正丁酸钠预处理组（干预组）,每组8只。家兔腹腔注入高纯CO气体制备急性CO中毒模型。干预组在家兔造模前10 min经耳缘静脉注射500 mg/kg正丁酸钠。造模后第7天检测血液流变学及血小板聚集率指标。结果：模型组血液流变学及血小板聚集率各指标较对照组差异均有统计学意义（P〈0.01）,干预组血液流变学和血小板聚集率各指标均较模型组下降（P〈0.05~P〈0.01）,而干预组较对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：正丁酸钠可明显改善急性CO中毒引起的血液循环障碍,其作用机制极可能是通过抑制核因子-κB信号转导途径发挥抗炎效应,阻断炎症-凝血网络,从而改善血液循环而发挥脑保护作用。

正丁酸钠通过抑制高迁移率族蛋白B1的表达与释放减轻刀豆蛋白A诱导的小鼠急性肝损伤

本文旨在研究正丁酸钠预处理对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及机制。给小鼠腹腔注射正丁酸钠(500 mg/kg)0.5 h后,尾静脉注射Con A(15 mg/kg)诱导小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的水平;HE染色观察病理学改变;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)水平;RT-PCR和免疫组化法检测小鼠肝组织HMBG1的表达与释放。结果显示,正丁酸钠预处理能明显降低Con A诱导的急性肝损伤小鼠血清中ALT和AST水平(P<0.01);显著改善肝组织损伤程度;明显降低血清中TNF-α和IFN-γ的水平(P<0.01);显著抑制肝组织HMGB1的表达与释放(P<0.05或P<0.01)。以上结果提示,正丁酸钠预处理对Con A所诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,可能与其减少炎性细胞因子TNF-α和IFN-γ的产生及抑制HMGB1的表达与释放有关。

正丁酸钠对肺纤维化大鼠高迁移率族蛋白B1和α平滑肌肌动蛋白表达影响

目的:观察正丁酸钠对肺纤维化大鼠高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)和α平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-α,α-SMA)表达的影响。方法:将30只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。3组大鼠用水合氯醛腹腔注射麻醉,竖立固定,经口气管插管,对照组气管内注入生理盐水,模型组和治疗组利用博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,治疗组多次静脉注射正丁酸钠,14d分离肺,将肺组织用甲醛固定,切片,行常规HE和Masson染色,镜下比较3组肺泡炎和肺纤维化程度;并行HMGB1和α-SMA免疫组织化学染色。结果:对照组大鼠肺组织结构完整,可见极少红色纤维,无α-SMA阳性表达,HMGB1少量阳性表达,模型组肺泡间隔内成纤维细胞增多,HMGB1和α-SMA蛋白表达较对照组明显增多(P<0.01),治疗组肺组织中HMGB1、α-SMA蛋白阳性染色细胞较对照组多,但较模型组明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠的肺组织中,HMGB1和α-SMA蛋白表达明显增加,且二者表达量明显正相关,正丁酸钠干预治疗后肺组织HMGB1表达受抑制,并抑制α-SMA的活化,对肺纤维化大鼠有治疗作用。

脓毒症大鼠肾组织高迁移率族蛋白-1对肿瘤坏死因子-α表达的影响

采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)造成脓毒症模型 ,探讨脓毒症时肾组织高迁移率族蛋白 1(HMG 1)的改变及其对TNF α表达的调节作用。动物分为正常对照组 (10只)、CLP组 (2 0只 )及正丁酸钠治疗组 (2 0只 ) ,CLP后 12h和 2 4h处死动物 ,留取肾组织和血标本分别检测HMG 1和TNF αmRNA表达、组织TNF α蛋白水平和血清肌酐含量。结果显示 ,CLP组 12h及 2 4h肾组织HMG 1和TNF αmRNA表达均显著增强 (P <0 0 5或 0 0 1)。正丁酸钠处理可显著抑制CLP后 12h及 2 4h肾组织HMG 1mRNA表达 (P <0 0 5 ) ,并明显下调 2 4h组织TNF αmRNA表达 (P <0 0 5 )及TNF α水平(P <0 0 1) ,同时血清肌酐含量比未治疗组亦显著降低(P <0 0 5或 0 0 1)。提示脓毒症时肾组织HMG 1表达可促进局部TNF α的合成与释放 ,从而诱导脓毒症动物急性肾功能损害。

缬草波春对大鼠非炎症性结肠致敏模型的影响

目的:探讨中药提取物缬草波春对大鼠非炎症性结肠致敏模型的影响.方法:将32只雄性Wistar大鼠随机分为4组(n=8):空白对照组、模型对照组、吗啡对照组及缬草波春药物实验组.正丁酸钠灌注直肠法制造大鼠非炎症性结肠致敏模型,缬草波春药物实验组给予缬草波春2.5mg/(kg-d),吗啡对照组吗啡0.4mg/(kg-d),生理盐水对照组和模型对照组等量生理盐水灌胃,共2wk.直肠扩张法检验大鼠直肠的敏感性,水囊通过压力感受器记录结肠用药前后直肠压力改变.分析各组直肠初始压力感觉与最大压力,结肠平均压力与最大耐受压力.结果:缬草波春组与模型对照组比较,在压力为0、1.33、2.66kPa时,直肠扩张积分差异无统计学意义,在压力为3.99、5.32、6.65、7.98kPa时,则有统计学意义(t=-2.50,-4.58,-3.00,-2.38,P<0.05或P<0.01),而与吗啡对照组比较,在上述压力下差异均无统计学意义;缬草波春组与模型对照组初始感觉压力比较明显升高,差异有显著意义(t=5.892,P<0.01),而与吗啡对照组比较,差异无显著意义;缬草波春组与模型对照组初始感觉压力和最大压力耐受值比较明显升高,差异有显著意义(t=5.892,5.075,均P<0.01),而与吗啡对照组上述两项指标差异无显著意义;缬草波春组与模型对照组和与吗啡组比较结肠运动平均压力与其运动最大压力明显降低,差异有显著意义(t=-6.583,-3.85,-3.698,-2.440,P<0.01或0.05).结论:缬草波春可降低大鼠非炎症性结肠致敏模型结、直肠的敏感性,抑制模型大鼠的结肠运动.

HMGB1乙酰化在脓毒症相关性脑病中的作用

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)乙酰化在脓毒症相关性脑病(SAE)大鼠认知功能中的作用及HMGB1抑制剂对其的影响。方法成年雄性SD大鼠48只,随机分为三组,每组16只:假手术组(S组)、盲肠结扎穿孔术组(C组)、盲肠结扎术+正丁酸钠组(B组)。采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立SAE模型,S组只做假手术。S组和C组大鼠于CLP术后30min和4h分别腹腔注射生理盐水5ml/kg,B组大鼠于CLP术后30 min和4h分别侧脑室注射正丁酸钠500 mg/kg。CLP术后第4天行Morris水迷宫测试,CLP术后第7天行空间探索实验,并记录探索时间。行为学测试结束后取大鼠海马组织,Western blot法测定IL-6浓度、脑源性神经营养因子(BDNF)、HMGB1和乙酰化HMGB1的含量。结果C组逃避潜伏期明显长于S组,探索时间明显短于S组(P<0.05);B组逃避潜伏期明显短于C组,探索时间明显长于C组(P<0.05)。C组海马IL-6浓度、HMGB1和乙酰化HMGB1含量明显高于S组(P<0.05),BDNF含量明显低于S组(P<0.05);B组海马IL-6浓度、HMGB1和乙酰化HMGB1含量明显低于,BDNF含量明显高于C组(P<0.05)。结论 HMGB1抑制剂正丁酸钠可抑制SAE大鼠海马内HMGB1乙酰化的表达,减轻脓毒症诱发的认知功能损伤。