中国锦紫苏类病毒的检测及其分子生物学特征研究

从无明显症状表现的11株锦紫苏叶片中抽提低分子量的RNA，经Return-PAGE、RT-PCR和Dot-blot hybridization检测，结果表明11株锦紫苏全部带有锦紫苏类病毒（Coleus blumei viroid，CBVd）。将部分PCR产物克隆到pGEM-3Zf（＋）载体上并进行DNA序列测定。序列分析结果，所克隆的序列（GenBank登录号分别为DQ178395、DQ178396、DQ178397、DQ178398和DQ178399）与GenBank中报道的锦紫苏类病毒1号（CBVd—1）序列同源性为85．23％～99．20％。从市场上购买的锦紫苏种子经Return—PAGE和RT-PCR检测不携带锦紫苏类病毒。这是中国发生的锦紫苏类病毒的首次报道。

菊花矮化类病毒两种检测方法的建立与比较

菊花矮化类病毒可通过接种寄主植物和电泳方法进行检测。正反向电泳法可从相当于 2 8mg鲜重的菊花样品中检测到菊花矮化类病毒RNA ,并可同时检测 10 - 2 0个样品材料。生物检测则需要较大的空间、严格的温度条件和较长时间 。

北京、天津地区锦紫苏类病毒疫情调查与检测

从购自北京和天津市的花卉市场的27株锦紫苏的叶片中抽提低分子量的RNA,进行Return-PAGE和Dot-blothybridization检测,与从北京丰台区新发地种业市场芳萱苑花卉种子公司和北京大森林花卉种子市场购买的锦紫苏种子所生长的实生苗对比,结果发现,从北京和天津花卉生产基地购买的27株锦紫苏成品苗中带毒苗高达25株,而利用种子所得的实生苗无一株带毒。