菜油加热产物的正向突变试验（SV50）和不同加热温度对其致变性的影响

菜油加热产物的正向突变试验（ＳＶ５０）和不同加热温度对其致变性的影响徐冠雄，方君成，黄飞，瞿永华，高玉堂上海市肿瘤研究所（上海２０００３２）为了探讨上海地区女性肺癌构成比和相对比较高，可能与中国传统烹饪高温煎炒习惯有关，我们曾研究并发现食用菜油加热至...

磷氧氮丙啶诱发CHO细胞HGPRT基因位点正向突变的分子特征

ＭＡＰＯ诱发的ＣＨＯ细胞ＨＧＰＲＴ基因位点突变克隆ＤＮＡ，经ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ酶切消化后，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法，与ＨＧＰＲＴ基因探针杂交。从杂交图谱可见，正常ＣＨＯ细胞基因组ＤＮＡ经ＰｓｔＩ酶切后杂交可显出６条杂交带，其中８３ｋｂ，７６ｋｂ，６０ｋｂ，和３２ｋｂ带为Ｘ染色体连锁的ＨＧＰＲＴ基因所有，分别代表外显子２，６８，４和３，其余两条带为假基因。而经ＥｃｏＲＩ酶切后，正常ＣＨＯ细胞基因组ＤＮＡ有１７５ｋｂ和１１３ｋｂ两条ＨＧＰＲＴ基因杂交带，分别代表了外显子６９和２４。而从ＭＡＰＯ所诱发的ＨＧＰＲＴ基因突变细胞杂交图谱可见，其主要改变是ＨＧＰＲＴ基因全部缺失或部分缺失，同时出现了新的杂交带。ＰｓｔＩ酶切的７个突变克隆均显出基因缺失或新的杂交带型，而ＥｃｏＲＩ酶切８个突变克隆中，有３个无ＨＧＰＲＴ基因改变。由此可见，ＭＡＰＯ诱发ＨＧＰＲＴ基因位点突变的分子机理主要是由于基因缺失或重排。

太湖梅梁湾冬季表层水体致大肠杆菌阿拉伯糖抗性正向突变

本文采用阿拉伯糖抗性正向突变试验(ara试验)并辅以鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷回复突变试验(Ames试验)对太湖梅梁湾冬季表层水样品致突变性进行分析研究.ara试验结果表明9个点样品中有5个(主要为入湖河口及近岸样品)表现显著的直接致突变性,加入哺乳动物来源的代谢活化系统S9后,结果仍呈现同样的趋势.A-mes试验在增加两倍半上样剂量的条件下表现出与ara试验大体一致的检出率.在本研究中.ara试验对于成分复杂的环境样品表现更高的检出灵敏度.表明ara试验作为首选方法来检测环境中复杂化学物基因毒性方面有良好前景.

V79细胞HGPRT位点正向突变试验方法初探

~v79细胞HGPRT位点正向突变试验具有快速、灵敏、可靠、可检测的遗传学改变多等优点,已在遗传毒理学诱变机理研究,诱变剂的检测和致癌剂的筛试等领域得到越来越广泛的应用。

V_（79）细胞HGPRT位点正向突变试验方法探讨

本文在－Ｓ９或＋Ｓ９实验条件下，用ＥＭＳ或ＡＦＢ_１在Ｖ_（７９）细胞ＨＧＰＲＴ位点测试系统中获得良好的剂量反应关系。分别从未染毒组、ＥＭＳ或ＡＦＢ１染毒组分离１０个ＴＧ抗性突变克隆。经鉴定，抗性突变细胞是ＨＧＰＲＴ位点突变的Ｖ_（７９）细胞；所建立的诱变性测试方法是可靠的。此外，本文对选择开始后不同时间（０、６、１２或２４小时）加入选择剂的情况进行了研究。结果表明，６小时加入选择剂突变体频率略有升高，但升高无显著性；２４小时加入选择剂突变体频率明显下降，经统计分析差异有显著性。

体细胞正向突变实验中细胞群体的选择

本文介绍一种用于体细胞正向突变实验的根据泊松分布和诱变效应的细胞群体选择法。在用EMS诱发V79细胞的叫oua^R突变体的实验中,该法重复性较好且节约人力和物力。实验测得EMS的诱变潜能(D_(10C))为0.13±0.014mM。

抗生素89－07的细胞染色体畸变

抗生素８９－０７的细胞染色体畸变张慧娟，朱玉珍（上海医药工业研究院，上海２００４３７）用中国仓鼠肺细胞（ＣＨＬ）染色体畸变试验评价抗生素８９－０７的诱变能力。实验包括加入和不加代谢活化系统两部分，抗生素８９－０７浓度为３、６、１２ｍｇ／ｍｌ，以环磷酰...

产D-乳酸菊糖芽孢乳杆菌的诱变及发酵条件研究

以菊糖芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus inulinus)为出发菌株,经紫外线、硫酸二乙酯的诱变处理,采用碳酸钙平板初筛及摇瓶复筛得到1株高产D-乳酸的正向突变株D11。通过单因素试验研究D11菌株发酵产D-乳酸的条件。结果表明,当发酵温度37℃,初始p H 6.5,转速160 r/min,接种量5%,装液量50m L/250 m L,发酵68 h,该菌株D-乳酸产量达到56.18 g/L,比出发菌种提高49.53%。

乙型脑炎病毒野毒株SA14包膜蛋白K279M突变对其神经毒力的影响

目的构建乙型脑炎病毒野毒株SA14包膜蛋白K279M突变株感染性克隆并拯救病毒,探索K279M突变对其毒力的影响。方法应用重叠延伸PCR和分子克隆技术构建含有K279M突变的乙脑突变病毒全长cDNA质粒,经酶切鉴定后,以其为模板体外转录获得RNA,电转染BHK21细胞,得到恢复病毒JEV SA14(K279M)。分别用野毒株JEV SA14和JEV SA14(K279M)接种BHK21细胞和脑内接种昆明鼠,比较突变株与野毒株的蚀斑大小、生长特点以及对昆明鼠的神经毒力。结果酶切鉴定表明,突变病毒感染性克隆成功构建。病毒蚀斑试验显示,JEV SA14(K279M)的蚀斑直径约为2~3 mm,大于野毒株蚀斑直径的1~2 mm。突变株病毒LD50为0.21PFU,大于野毒株病毒LD50的0.05PFU。结论乙脑包膜蛋白K279M突变增大了病毒的蚀斑,但降低了病毒的脑内神经毒力。

常压室温等离子体诱变扭脱甲基杆菌AM1高产吡咯喹啉醌

吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone,PQQ)作为一种新型的氧化还原酶辅酶,在医药和食品等领域有广阔的应用前景。为改善扭脱甲基杆菌Methylobacterium extorquens AM1 PQQ生产性能,采用常压室温等离子体(Atmospheric and room temperature plasma,ARTP)进行诱变,结合高通量快速筛选方法,得到以PQQ产量为指标的正向突变株。ARTP诱变的菌株正突变率为31.6%,筛选得到的较优正突变株M.extorquens AM1(E-F3),PQQ产量达到54.0 mg/L,是出发菌株的近3倍。系统的高通量方法筛选ARTP诱变菌为后续进一步提高M.extorquens AM1菌株PQQ的产量奠定了基础,亦为改善菌株生产性能提供了新思路。