阿帕替尼治疗进展期胃癌对患者血清正常上皮细胞特异性-1及免疫功能的影响

目的探讨阿帕替尼治疗进展期胃癌的临床疗效及对患者血清正常上皮细胞特异性-1(NES1)及免疫功能的影响。方法将118例进展期胃癌患者按治疗方案不同分为观察组(n=68)和对照组(n=50),观察组给予阿帕替尼^(+)替吉奥治疗,对照组给予替吉奥治疗,观察两组疗效及总生存时间,检测CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞及NES1水平。结果观察组患者疗效优于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。治疗前,两组患者CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞比例比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);治疗后,观察组患者CD4^(+)T淋巴细胞比例明显高于对照组,CD8^(+)T淋巴细胞比例明显低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。治疗前,两组患者血清NES1水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);治疗后,两组患者血清NES1水平均升高(P﹤0.05),且观察组血清NES1水平明显高于对照组(P﹤0.01)。观察组患者中位生存时间为9个月(95%CI:8.64~9.36),明显长于对照组的5个月(95%CI:4.51~5.49),差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论阿帕替尼治疗进展期胃癌有较好的临床疗效,改善免疫功能,升高血清NES1水平。

冠心病心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂、不规则趋化因子、单核细胞趋化蛋白-1与心功能、心肌损伤指标相关性分析

目的:探讨冠心病(CHD)心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、不规则趋化因子(Fractalkine)与心功能、心肌损伤指标的相关性。方法:选取150例CHD心绞痛患者作为观察组(不稳定型心绞痛患者64例为A组、稳定型心绞痛患者86例为B组),同期收治的164例非CHD患者为C组。比较三组血清Fractalkine、Vaspin、MCP-1水平、心功能指标及心肌损伤指标,相关性采用Pearson相关性分析。结果:A组血清Vaspin水平低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组血清Fractalkine、MCP-1水平高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组各心肌损伤指标水平均高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。Pearson相关性分析:CHD心绞痛患者血清Vaspins水平与LVEF、FS成正比;血清Vaspins水平与LVEDD、LVESD、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEF、FS成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEDD、LVESD、CK、CK-MB、cTnI、H-FABP成正比(均P<0.05)。结论:随着CHD心绞痛患者病情加重,患者心功能及心肌损伤越严重,且患者血清Vaspins、Fractalkine、MCP-1与患者心功能及心肌损伤具有密切联系,临床可根据其水平变化评估病情进展情况。

正常上皮细胞特异性-1基因超甲基化在肝癌发病机制中的作用

目的：探讨正常上皮细胞特异性-1基因在正常肝细胞和肝癌细胞株中的表达及其甲基化状态对该基因表达和细胞生物学的影响。方法用实时PCR 和实时 QPCR 方法检测NES1 mRNA在肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞L02中的表达，用MSP检测基因甲基化状态。以不同浓度DNA甲基化酶抑制剂（5-aza-dC）处理肝癌细胞株后，分别用实时QPCR检测NES1 mRNA表达量， MTT法检测细胞的存活率，蛋白印迹（ WB）检测细胞周期蛋白cyclin D1、P21和P53表达水平。结果NES1 mRNA在肝癌细胞株中的表达量较正常肝细胞明显降低。肝癌细胞株中NES1外显子3 CpG岛的甲基化程度远远高于正常肝细胞。肝癌细胞株去甲基化后，NES1 mRNA表达水平有所上调，细胞存活率明显下降，P21和P53表达水平上升，cyclinD1表达水平下调。结论 NES1在肝癌细胞株中的低表达与该基因外显子3 CpG岛甲基化有关。 NES1基因外显子3甲基化可能是肝癌细胞中NES1表达缺失的分子机制。去甲基化药物5-aza-dC可通过阻滞细胞周期而抑制肝癌细胞株的增殖。

血清细胞角质蛋白19片段抗原21-1、神经元特异性烯醇化酶、组织因子水平对肺癌患者术后发生肺栓塞的预测价值

目的探讨血清细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、组织因子(TF)水平与肺癌患者凝血功能指标的关系及对术后发生肺栓塞的预测价值。方法选取80例肺癌患者和80例肺良性病变患者,分别作为肺癌组和对照组,比较两组患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平及凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)、血小板计数],依据是否继发肺栓塞,比较栓塞和未栓塞肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平。血清CYFRA21-1、NSE、TF水平与凝血功能指标的相关性采用Pearson相关分析;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估CYFRA21-1、NSE、TF单独及联合检测对肺癌患者术后发生肺栓塞的预测价值。结果肺癌组患者血清CYFRA21-1、NSE、TF、血小板计数、D-D水平均明显高于对照组(P﹤0.01),PT明显长于对照组(P﹤0.01)。80例肺癌患者中,发生肺栓塞16例,未发生肺栓塞64例,发生肺栓塞肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平均高于未发生肺栓塞患者(P﹤0.05)。Pearson相关分析结果显示,肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平与血小板计数、PT、D-D水平均呈正相关(P﹤0.05)。ROC曲线显示,CYFRA21-1、NSE、TF联合检测预测肺癌患者术后发生肺栓塞的AUC为0.847(95%CI:0.749~0.918),高于各指标单独检测。结论血清CYFRA21-1、NSE、TF水平在肺癌患者血清中异常升高,且与凝血因子D-D、PT、血小板计数均呈正相关,CYFRA21-1、NSE、TF联合检测对肺癌患者术后发生肺栓塞具有较高的预测价值。

内皮细胞特异性分子-1和Presepsin对脓毒症引起的ARDS预后评估价值

目的 探讨血清Presepsin和内皮细胞特异性分子-1 (ESM-1)对脓毒症引起的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)预后评估意义。方法 选择2017年6月至2018年6月首次收治的由脓毒症引起的ARDS患者83例作为研究对象,根据第28天预后将患者分为生存组43例和死亡组40例。在入院第1天使用抗菌药前、第3、7、14天都采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清Presepsin和内皮细胞特异性分子(ESM-1)水平,并行急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分。结果 生存组与死亡组患者的年龄和性别差异均无统计学意义(P均>0.05)。生存组的APACHEⅡ评分、血清Presepsin和ESM-1逐渐降低,而死亡组相反。在第7天、14天生存组的APACHEⅡ评分与死亡组差异有统计学意义(P<0.05);第3、7、14天死亡组的血清Presepsin和ESM-1水平差异均有统计学意义(P均<0.05)。以Presepsin>927.5 pg·mL^(-1)和ESM-1>4.96 ng·mL^(-1)为界值,在灵敏度方面,Presepsin第1天和第3天高于APACHEⅡ评分,在特异度方面,第3、7、14天Presepsin的均高于APACHEⅡ评分(P均<0.05);在灵敏度方面,ESM-1第1天高于APACHEⅡ评分(P<0.05),在特异度方面,第1、3、7、14天ESM-1的评分均高于APACHEⅡ评分(P均<0.05);各时间点血清Presepsin和ESM-1的AUC高于APACHEⅡ评分。结论 血清Presepsin检测能够提高早期脓毒症引起ARDS诊断率,ESM-1检测可以提高其死亡的预测能力。

内皮细胞特异性分子-1对急性ST段抬高型心肌梗死患者的临床意义

目的探讨内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清中的表达及临床意义。方法选取2019年3月至2021年3月常熟市第二人民医院心内科收治的50例因STEMI行急诊经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)患者作为观察组,选取同期50例冠脉造影检查确定为稳定型心绞痛行PCI的患者作为对照组。比较两组血清ESM-1水平及炎症因子[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)]含量,分析ESM-1在STEMI型心肌梗死患者血清中的表达及ESM-1和炎症因子的相关性。结果术前,观察组ESM-1、hs-CRP、TNF-α、Lp-PLA2水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后1 d,两组ESM-1、hs-CRP、TNF-α、Lp-PLA2水平均高于术前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。多重线性回归分析结果显示,ESM-1与hs-CRP和Lp-PLA2呈明显正相关(P<0.05)。结论ESM-1和炎症因子在STEMI患者血清中的表达水平明显升高,且呈正相关,对STEMI患者进行ESM-1的检测具有重要的临床意义。

血清内皮细胞特异性分子-1、降钙素原水平变化与脓毒症患者APACHEⅡ评分的相关性及临床意义

目的探讨血清内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、降钙素原(PCT)水平变化与脓毒症患者急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ评分)的相关性及临床意义。方法选取2021年1月至2023年1月该院收治的100例脓毒症患者作为研究对象,根据入院28 d后预后情况分为病死组(21例)和存活组(79例)。比较病死组和存活组患者不同时间(入院时、治疗3 d后、治疗7 d后)血清ESM-1、PCT水平,以及不同严重程度患者入院时血清ESM-1、PCT水平及APACHEⅡ评分,分析入院时血清ESM-1、PCT水平与APACHEⅡ评分的相关性、入院28 d后病死的影响因素及治疗3、7 d后血清ESM-1、PCT水平,血清ESM-1、PCT水平联合检测对入院28 d后病死的预测价值。结果病死组患者治疗3、7 d后血清ESM-1、PCT水平均高于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05);轻度脓毒症患者入院时血清ESM-1、PCT水平及APACHEⅡ评分均低于重度脓毒症患者和脓毒症休克患者,差异均有统计学意义(P<0.05);入院时血清ESM-1、PCT水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,治疗3、7 d后血清ESM-1、PCT水平升高是脓毒症患者入院28 d后病死的危险因素(P<0.05);受试者工作特征曲线分析结果显示,治疗3 d后血清ESM-1、PCT联合检测预测脓毒症患者入院28 d后病死的曲线下面积(AUC)为0.902,灵敏度、特异度分别为90.48%、78.48%;治疗7 d后血清ESM-1、PCT联合检测预测脓毒症患者入院28 d后病死的AUC为0.929,灵敏度、特异度分别为95.24%、83.54%。结论动态监测血清ESM-1、PCT水平有助于评估脓毒症患者的病情程度,且2项指标联合检测可有效预测其预后,可为临床治疗方案制订提供依据。

内皮细胞特异性分子1和血管内皮细胞生长因子在宫颈鳞癌中的表达及其与上皮-间质转化的相关性

目的研究内皮细胞特异性分子1(ESM-1)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达在宫颈鳞癌中的关系及其与上皮-间质转化(EMT)的相关性。方法收集2018年12月至2019年12月在南阳市中心医院接受宫颈癌根治术的180宫颈鳞癌病例术后石蜡组织标本作为研究组,另外收集同期南阳市中心医院源于子宫肌瘤切除术的正常宫颈组织石蜡组织标本60例作为正常组,免疫组化检测石蜡组织标本中ESM-1、VEGF、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的阳性表达率,比较正常宫颈和宫颈鳞癌组织中ESM-1、VEGF、E-Cadherin和Vimentin的阳性表达情况。比较其与宫颈鳞癌临床病理特征的关系,并分析ESM-1、VEGF与EMT相关蛋白E-Cadherin、Vimentin的相关性。结果免疫组化结果显示,ESM-1(81.7%比0.0%)、VEGF(66.7%比12.5%)、Vimentin(44.4%比0.0%)在宫颈鳞癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织,E-Cadherin在宫颈鳞癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织(45.6%比100.0%),差异有统计学意义(χ^(2)=40.00,P<0.05)。随着宫颈鳞癌FIGO分期越高,ESM-1和Vimentin阳性表达率越高,差异有统计学意义(χ^(2)=17.24,14.72,P<0.05),对VEGF和E-Cadherin阳性率的影响差异无统计学意义(χ^(2)=0.05,0.91,P>0.05);随着宫颈鳞癌分化程度越高,E-Cadherin和Vimentin阳性表达率越高,差异有统计学意义(χ^(2)=29.45,23.31,P<0.05),对ESM-1和VEGF阳性率的影响差异无统计学意义(χ^(2)=2.26,0.68,P>0.05);伴有淋巴结转移病人的ESM-1、VEGF及Vimentin阳性率高于不伴有淋巴结转移者,E-Cadherin阳性率低于不伴有淋巴结转移者,差异有统计学意义(χ^(2)=4.03,11.65,24.38,31.57,P<0.05);随着宫颈鳞癌宫颈浸润深度的增加,ESM-1和VEGF阳性表达率升高,差异有统计学意义(χ^(2)=6.87,12.92,P<0.05),对E-Cadherin和Vimentin阳性率的影响差异无统计学意义(χ^(2)=1.58,1.53,P>0.05)。宫颈组织中,ESM-1和VEGF的表达与E-Cadherin呈负相关(r=−0.46,−0.31,P<0.05);ESM-1和VEGF的表达与Vimentin的表达呈正相关(r=0.43,−0.36,P<0.05)。结论宫颈组织中ESM-1和VEGF的表达与宫颈鳞癌临床病理特征具有一定关系,可能参与了宫颈鳞癌的EMT过程。

肌腱蛋白-C与内皮细胞特异性分子-1及血管生成素样蛋白4与心房颤动射频消融术后复发的关系

目的:探讨血清肌腱蛋白-C(tenascin-C,TNC)、内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell specific molecule-1,ESM-1)、血管生成素样蛋白4(angiopoietin like protein 4,ANGPTL4)与阵发性心房颤动(paroxysmal atrial fibrillation,PAF)患者射频消融术后复发的关系。方法:选择2016年6月至2018年12月,我院行射频消融术治疗的PAF患者134例,随访3年,根据随访结果分为复发组(n=42)和未复发组(n=92),比较两组血清TNC、ESM-1、ANGPTL4水平,应用多因素Logistic回归分析射频消融术后复发的关联影响因素,并建立联合应用的风险预测模型。应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清TNC、ESM-1、ANGPTL对PAF患者射频消融术后复发的预测价值。结果:复发组血清TNC、ESM-1水平显著高于未复发组,ANGPTL4水平显著低于未复发组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,PAF病程≥3年、CHA2DS2-VASc评分≥2分、术中出现心房扑动/房性心动过速、TNC升高、ESM-1升高、ANGPTL4降低是PAF患者射频消融术后复发的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清TNC、ESM-1、ANGPTL4联合检验对PAF患者射频消融术后复发预测的效能最高。结论:PAF射频消融术后复发患者血清TNC、ESM-1水平升高,ANGPTL4水平降低,检测血清TNC、ESM-1、ANGPTL对PAF患者射频消融术后复发具有一定预测价值。

LncRNA XIST调节miR-574-5p/TLR4轴对呼吸道合胞病毒感染的支气管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨长链非编码(long non-coding,Lnc)核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)X-非活性特异性转录本(X-inactive specific transcript,XIST)调节微小RNA(microRNA,miR)-574-5p/Toll样受体(Toll-like receptor 4,TLR4)轴对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染的支气管上皮细胞凋亡的影响。方法将人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial,16HBE)分为阴性对照(negative control,NC)组、RSV感染(RSV infection,RSV)组、小干扰RNA阴性对照(small interfering RNA negative control,si-NC)组、XIST小干扰RNA(XIST small interfering RNA,si-XIST)组、siXIST+抑制剂阴性对照(inhibitor negative control,inhibitor-NC)组、si-XIST+miR-574-5p抑制剂(miR-574-5p inhibitor)组,实时荧光定量聚合酶链反应检测LncRNA XIST、miR-574-5p表达;5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)染色、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡;酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β的分泌;双荧光素酶报告基因实验验证miR-574-5p与LncRNA XIST和TLR4的关系;蛋白质印迹检测TLR4、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、细胞抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(B lymphoblastoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cysteine aspartate proteolytic enzyme 3,Cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果相较于NC组,RSV组、si-NC组LncRNA XIST、凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、TLR4、Bax、Cleaved Caspase-3表达升高,EdU阳性率、miR-574-5p、PCNA、Bcl-2表达降低(P均<0.05);相较于si-NC组,si-XIST组LncRNA XIST表达、凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、TLR4、Bax、Cleaved Caspase-3表达降低,EdU阳性率、miR-574-5p、PCNA、Bcl-2表达升高(P均<0.05);下调miR-574-5p可逆转敲低LncRNA XIST对RSV感染的16HBE细胞凋亡和炎症反应的抑制(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-574-5p与LncRNA XIST、miR-574-5p与TLR4存在靶向调控关系(P<0.05)。结论LncRNA XIST在RSV感染的16HBE细胞中上调表达,敲低LncRNA XIST可能通过上调miR-574-5p来下调TLR4表达,抑制RSV感染后的16HBE细胞凋亡。

非小细胞肺癌患者血清中CYFRA21-1、NSE表达及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA 21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达及临床意义。方法 选取NSCLC患者132例纳入NSCLC组,另择同期良性肺疾病者90例、健康体检者90名分别纳入肺良性疾病组、健康对照组;通过化学发光法检测3组研究者血清CYFRA 21-1、NSE表达水平,分析血清指标表达与NSCLC患者的临床病理关系;依照患者随访2 a预后情况分为生存组与死亡组,通过受试者工作曲线(ROC)分析患者血清CYFRA 21-1、NSE水平对NSCLC疾病诊断和预后评估的应用价值。结果 NSCLC组患者血清CYFRA 21-1、NSE水平高于肺良性疾病组、健康对照组(P<0.05);血清CYFRA 21-1水平评估NSCLC的发生ROC曲线下面积为0.792,高于血清NSE评估曲线下面积0.671(P<0.05);NSCLC患者中,不同性别、年龄患者血清CYFRA 21-1、NSE水平比较差异无统计学意义(P>0.05);临床分期Ⅲ/Ⅳ期、发生淋巴结转移者血清CYFRA 21-1、NSE水平高于Ⅰ/Ⅱ期、无淋巴结转移者(P<0.05);肺鳞癌患者血清CYFRA 21-1表达水平高于肺腺癌患者(P<0.05);随访2 a, NSCLC患者中失访4例,死亡组(34例)患者血清CYFRA 21-1、NSE水平高于生存组(94例)(P<0.05);血清CYFRA 21-1、NSE水平联合检测预测NSCLC患者2 a预后的ROC曲线下面积为0.798,高于两项指标单独检测曲线下面积0.689、0.665(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清CYFRA 21-1、NSE水平呈现高表达,且CYFRA 21-1对NSCLC的评估价值更高,二者高表达可预示NSCLC患者不良预后。

miR-29b通过靶向调节特异性蛋白1调控糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化的作用

目的探究miR-29b通过靶向调节特异性蛋白1(SP-1)调控糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化(EMT)的作用机制。方法体外培养人晶状体上皮细胞(HLE-B3),分为正常组、高糖组、阴性组、miR-29b mimics组和miR-29b mimics+SP-1组。除正常组细胞外,其余各组细胞于35.5 mmol·L^(-1)D-葡萄糖环境中培养。阴性组、miR-29b mimics组和miR-29b mimics+SP-1组分别共转染miRNA模拟物scramble和阴性siRNA序列、转染miR-29b模拟物、共转染miR-29b模拟物和SP-1基因序列。采用实时荧光定量PCR检测各组细胞miR-29b和SP-1 mRNA表达,采用Transwell法和细胞划痕实验检测各组细胞迁移活性。采用免疫荧光染色和Western blot检测和各组细胞钙黏蛋白(E-Cadherin、N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、SP-1蛋白表达情况。根据生物信息学数据库和双荧光素酶报告基因验证miR-29b和SP-1基因的靶向关系。结果35.5 mmol·L^(-1)D-葡萄糖组处理HLE-B324 h,细胞中miR-29b mRNA相对表达量较正常组降低,SP-1 mRNA和蛋白相对表达量均升高(均为P<0.05)。与正常组相比,高糖组细胞Transwell小室迁移数量和划痕愈合率增加,E-Cadherin蛋白表达降低,N-Cadherin和Vimentin蛋白表达升高(均为P<0.05)。而与高糖组和阴性组相比,miR-29b mimics组细胞miR-29b mRNA相对表达量和E-Cadherin蛋白表达增加,SP-1、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达降低,细胞Transwell小室迁移数量和划痕愈合率均减少(均为P<0.05)。miR-29b mimics+SP-1组较miR-29b mimics组细胞中E-Cadherin蛋白表达降低,N-Cadherin和Vimentin蛋白表达增加,细胞Transwell小室迁移数量和划痕愈合率增加(均为P<0.05)。经双荧光素酶报告基因验证,转染miR-29b mimics质粒可降低SP1-3’UTR-WT荧光素酶活性(P<0.05),但不降低SP1-3’UTR-MUT荧光素酶活性(P>0.05)。结论miR-29b在糖尿病性白内障体外细胞模型中表达下调。上调miR-29b表达可通过靶向SP-1基因参与抑制高糖诱导晶状体上皮细胞EMT的进程。

巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1在大鼠2型星形胶质细胞中的表达

目的观察1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)是否表达神经干细胞的标志物、是否具有神经干细胞的特性。方法取新生大鼠脑皮质,体外培养纯化的O-2A祖细胞、T1A和T2A,应用激光共焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达;观察O-2A祖细胞、T1A和T2A在碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)的培养液中生长方式的改变。结果巢蛋白在O-2A祖细胞和T2A中表达,T1A不表达;SSEA-1仅在T2A中表达。在干细胞培养基中培养10d,T2A形成能增殖和连续传代的细胞球,细胞球巢蛋白标记阳性,贴壁后分化细胞具有神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞样形态;但相同培养条件下的O-2A祖细胞和T1A生长方式无改变。结论巢蛋白和SSEA-1在两型星形胶质细胞中的表达存在差异,T2A具有神经干细胞的某些生物学特性。

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β和其相关因子及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶表达的影响

目的:研究三七总皂苷(Panax notoginsengsaponins,PNS)对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-1受体Ⅰ型(interleukin-1 receptor typeⅠ,IL-1RⅠ)、白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cysteinyl-aspartate specific protease,caspase)-1、3、8 mRNA表达的影响。方法:采用颈内动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在脑缺血前5 min和脑缺血后12 h分别腹腔注射给药1次。在脑缺血2 h再灌注22 h后,以逆转录-聚合酶链反应测定缺血脑组织IL-1β、IL-1RⅠ、IL-1ra、ICAM-1和caspase-1、3、8 mRNA的表达。结果:在脑缺血2 h再灌注22 h后,模型组脑组织IL-1β、IL-1RⅠ、IL-1ra、ICAM-1和caspase-1、3、8 mRNA表达较假手术组均增强(P<0.05或P<0.01)。PNS组脑组织IL-1β、IL-1ra和IL-1RⅠ表达低于模型组,高于假手术组,与模型组和假手术组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);PNS组脑组织caspase-3表达低于模型组(P<0.05),但PNS对ICAM-1、caspase-1和caspase-8表达无明显影响。结论:PNS可抑制caspase-3的表达,同时对脑缺血后IL-1β及其相关炎症因子的表达有一定抑制作用,从而对缺血性脑损伤发挥保护作用。

抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的研制和初步鉴定

运用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,以人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)蛋白为抗原 ,经PEG融合 ,有限稀释法筛选 ,获得了 7株稳定分泌抗人ESM 1的杂交瘤细胞株 ,其中 3A7细胞株特异性尤为显著 ,效价高达 1∶6 0 0 0。所分泌抗体亚型为IgG2b ,Westernblot结果表明对内皮细胞中的ESM 1蛋白及细胞培养上清中的ESM 1均可特异性识别。并观察到ESM 1主要分布在内皮细胞的细胞胞质伴胞核中。在肾组织中 ,ESM 1定位于血管内皮细胞 ,且肾癌标本中ESM 1阳性表达显著高于正常肾组织。免疫组化结果表明所获单抗具有一定的特异性和实用性。

青光安有效组分对兔青光眼术后滤过道瘢痕组织中胶原纤维、成纤维细胞特异性蛋白-1、结缔组织生长因子及转化生长因子-β1表达的影响

目的观察青光安4种有效组分对兔青光眼术后滤过道瘢痕组织中胶原纤维、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,对比青光安4种有效组分及青光安混悬液抗滤过道瘢痕化的效果。方法采用青光眼滤过手术制作动物模型。实验兔按体质量随机分为空白组(A组)、模型组(手术对照组,B组)、丝裂霉素C组(C组)、有效组分1组(D组)、有效组分2组(E组)、有效组分3组(F组)、有效组分4组(G组)和青光安混悬液组(H组)。各给药组给予相应药物。观察各组兔滤过道瘢痕组织中胶原纤维、FSP-1、CTGF、TGF-β1水平。结果术后C、E、H组兔眼压回升缓慢,眼压值较术前和A组差异均有统计学意义(P<0.05);胶原纤维面积比值除B、D、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);FSP-1表达除B、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);CTGF表达除B、D、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);TGF-β1表达除B、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论青光安有效组分2、丝裂霉素C及青光安混悬液通过抑制胶原纤维、FSP-1、CTGF、TGF-β1的表达,降低肌成纤维细胞和成纤维细胞的增殖,从而减少滤过道瘢痕组织的增生,有明显抗青光眼术后滤过道瘢痕化的作用,青光安有效组分2和青光安混悬液抑制滤过道瘢痕化效果基本相当。

肾癌组织中内皮细胞特异性分子-1 mRNA水平及其蛋白表达的关系

目的 探讨内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)mRNA及其蛋白在肾癌组织中的表达及其意义。方法 采用地高辛标记cDNA探针原位杂交方法、免疫组织化学S P法对 4 0例肾癌、2 9例癌旁正常肾组织中ESM 1mRNA及其蛋白进行检测。结果 ESM 1mRNA及其蛋白在正常肾组织和肾癌中均有表达 ,肾癌间质血管内皮中表达明显。肾癌组织中 ,肿瘤血管内皮的ESM 1mRNA和蛋白的高表达率显著高于正常肾组织血管内皮 ;而在肾小管上皮细胞与肾癌细胞中差异无显著性 ,ESM 1mRNA和蛋白表达具有较好的一致性。结论 ESM 1分子可能参与了肾癌的发生。

内皮细胞特异性因子ESM-1在肝癌血管内皮细胞的表达及作用

目的本研究拟通过分离纯化肝癌的血管内皮细胞,检测内皮细胞特异性分子1(ESM-1)在肝癌内皮细胞中的表达,并探讨其变化与肿瘤血管生成和侵袭的关系。方法收集山东大学附属省立医院肝胆外科行手术切除治疗且经术后病理证实的新鲜肝癌组织和癌旁组织。应用CD31单抗标记的免疫磁珠法进行分离并纯化血管内皮细胞,经内皮细胞鉴定并分析细胞纯度,应用荧光实时定量PCR、Western blot等方法检测血管内皮细胞中ESM-1的表达。应用酶联接免疫吸附剂测定(ELISA)法检测相应肝癌患者及正常对照者血清中ESM-1的水平。结果经测定,ESM-1在肝癌患者血清中为(12.643±2.280)ng/mL,相比正常对照(4.660±1.172)ng/mL表达水平明显升高(t=10.16,P<0.01),同时,在肝癌内皮细胞中ESM-1的mRNA和蛋白水平的表达均明显升高。结论 ESM-1可能参与了肝癌的血管生成和侵袭过程,有望作为新的肿瘤治疗靶点。

生长停滞特异性转录本5在乳腺癌中低表达并抑制上皮细胞-间充质转化

目的探讨生长停滞特异性转录本5(lncRNA-GAS5)在乳腺癌中发展和上皮细胞-间充质转化(EMT)过程中的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应法检测乳腺癌组织和癌旁组织(n=36)、乳腺癌MCF-7亲本和耐药细胞中lncRNA-GAS5的表达,并分析GAS5表达与乳腺癌临床分期和淋巴结转移相关性;qRT-PCR法、Western blot和免疫组化法检测细胞周期和EMT相关蛋白的表达;迁移、趋化和黏附分离实验检测细胞生物学活性;通过光学显微镜观察细胞的形态学变化;以耐药细胞株构建裸鼠乳腺癌模型,体内探讨过表达GAS5对紫杉醇抗乳腺癌作用的影响。结果 LncRNA GAS5转录本水平相对于癌旁组织是显著降低的(P<0.05),GAS5低表达与乳腺癌TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05);耐药细胞株中GAS5表达下调(P<0.05),GAS5与P21表达正相关,而与CDK6表达呈负相关;体外干扰GAS5促进乳腺癌亲本细胞株发生EMT表型改变和侵袭能力增加,而过表达lncRNA GAS5可抑制乳腺癌耐药细胞株EMT表型和侵袭能力(P<0.05),并提高紫杉醇的药物敏感性。体内实验发现,过表达GAS5通过逆转EMT标志蛋白,提高紫杉醇抑制肿瘤生长和肺转移的作用。结论 LncRNA GAS5低表达可能通过诱导EMT促进乳腺癌的肺转移,可能是乳腺癌的一个潜在治疗靶点。

通腑通络开窍汤治疗急性脑梗死疗效及对患者髓鞘碱性蛋白、可溶性细胞间黏附分子-1和神经元特异性烯醇化酶的影响

目的:探讨通腑通络开窍汤治疗风痰瘀阻型急性脑梗死(ACI)效果及对可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的影响。方法:选取60例风痰瘀阻型ACI患者为研究对象,以随机数字表法分为对照组和观察组各30例,对照组采用常规治疗,观察组采用常规治疗联合通腑通络开窍汤,比较两组治疗前后中医临床症状评分、神经功能评分、脑血流情况及血清神经因子变化情况,统计两组不良反应发生情况。结果:两组治疗前中医临床症状评分相近(P>0.05),两组治疗后评分均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组治疗前美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分、改良Rankin量表(mRS)评分差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后NIHSS评分、mRS评分均降低(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);两组治疗前双侧大脑中动脉(MCA)峰流速、MCA平均流速、血流灌注指数(PI)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后MCA峰流速、MCA平均流速均提高(P<0.05),且观察组均高于对照组(P<0.05),两组治疗后PI水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组治疗后sICAM-1、MBP、NSE水平均降低(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率相接近(P>0.05)。结论:对风痰瘀阻型ACI患者实施通腑通络开窍汤治疗可有效减轻其病情及神经功能损伤,改善脑血流及血清神经因子状况,且安全性良好。