关于发布《人正常乳腺及乳腺癌类器官制备、冻存、复苏和鉴定操作指南》的通告

我会组织业内骨干单位及专家参考其他国家相关指南和我国已经发布的相关规定和标准,经过多次研讨,起草了《人正常乳腺及乳腺癌类器官制备、冻存、复苏和鉴定操作指南》。经协会标准工作专家委员会审定,并完成了公示程序。现将《人正常乳腺及乳腺癌类器官制备、冻存、复苏和鉴定操作指南》予以发布。

苯甲酸雌二醇对植入裸鼠体内的人正常乳腺组织的影响

目的观察苯甲酸雌二醇对人正常乳腺的影响。方法将9只裸鼠随机分为A、B、C3组,每组3只。取3例人正常乳腺组织标本,并将每例标本分为3份,分别植入各组中的1只裸鼠。植入2周后,从A组取出部分植入组织作对照组,之后A、B、C组裸鼠开始分别肌肉注射苯甲酸雌二醇3、6、9μg,每天1次,共28d;后处死裸鼠,取出植入组织。采用免疫组化方法检测各组植入组织的增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)、雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、孕激素受体(progesteronereceptor,PR)的蛋白表达。结果与对照组相比,B、C组乳腺上皮细胞PCNA表达明显升高(P<0.05),A组乳腺PCNA无明显改变。随苯甲酸雌二醇剂量升高,ER表达逐渐下降(P<0.05),PR表达则逐渐上升(P<0.05)。结论一定剂量的苯甲酸雌二醇可促进正常乳腺的增生。

Twist基因逆转录病毒载体的构建及其诱导正常乳腺上皮细胞发生上皮间质转化

目的构建Twist基因逆转录病毒载体,研究其对人正常乳腺上皮细胞MCF10A的影响。方法酶切pcDNA3/mycTwist获得myc-Twist,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组质粒pBABE-myc-Twist。通过酶切、测序鉴定Twist基因正确后,在体外将质粒pBABE-myc-Twist和其对照分别与包装质粒pAmpho共同转染人胚肾上皮细胞系293T细胞,进行逆转录病毒的包装,并感染人正常乳腺MCF10A上皮细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选,获得成功转入Twist的MCF10A-Twist细胞和MCF10A-Vector对照细胞。通过RT-PCR和Western blot法验证Twist细胞在MCF10A-Twist和MCF10A-Vector细胞内的表达。免疫荧光技术和Western blot法检测细胞内上皮间质转化(EMT)标志蛋白的表达。Transwell^(?)法检测细胞的迁移和侵袭能力。结果重组逆转录病毒载体质粒pBABE-myc-Twist经酶切和测序鉴定构建正确;Twist基因被逆转录病毒成功导入MCF10A细胞,并在靶细胞内稳定表达,RT-PCR检测到Twist mRNA在MCF10A-Twist细胞中表达,Western blot法检测发现myc-Twist蛋白在MCF10A-Twist细胞中表达;免疫荧光和Western blot法检测显示在MCF10A-Twist细胞中E-cadherin表达显著下调、vimentin表达明显上调;与MCF10A-Vector细胞相比,Transwell^(?)法检测发现MCF10A-Twist细胞迁移和侵袭能力明显增加(P<0.01)。结论 Twist诱导MCF10A细胞发生EMT转化,并促进其迁移和侵袭。

P27在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达及其意义

目的探讨P27在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达变化与临床病理意义。方法应用免疫组织化学方法,分别检测71例乳腺癌及32例正常乳腺组织P27的表达情况,并分析它与相关临床病理参数的关系。结果在乳腺癌中P27的阳性表达率28.2%(20/71),正常乳腺组织中P27的阳性表达率84.4%(27/32),差异有统计学意义(P<0.05);同时P27阳性表达率与乳腺癌的分化程度及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 P27蛋白的低表达可增加肿瘤细胞增殖活性,促进肿瘤的发生;同时过度增殖活跃的肿瘤细胞也是乳腺癌淋巴结转移的因素之一。

Y14和Upf1在人乳腺癌组织与正常乳腺组织中的表达及意义

目的探讨Y14和Upf1在人乳腺癌组织与正常乳腺组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法和激光共聚焦扫描法测定Y14和Upf1在人乳腺癌组织与正常乳腺组织中的表达情况。结果①乳腺癌组织中Y14和Upf1的表达均明显高于正常乳腺组织(P<0.05)。②在乳腺癌组织中,组织学分级为Ⅲ级者的Y14和Upf1表达均明显高于Ⅰ和Ⅱ级者(P<0.05)。③有腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中Y14和Upf1表达均高于无腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织(P<0.05)。结论Y14和Upf1在乳腺癌组织中的表达明显高于正常乳腺组织,在组织学分级为Ⅲ级和有腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中Y14和Upf1表达均明显增高。

胰岛素样生长因子-1受体在淋巴结阴性、淋巴结阳性乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达

目的:探讨胰岛素样生长因子-1受体(in sulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)在淋巴结阴性、淋巴结阳性的乳腺癌组织和正常乳腺组织中的分布和表达。方法:采用免疫组织化学方法,对淋巴结阳性、淋巴结阴性的乳腺癌组织和正常的乳腺组织中IGF-1R的表达情况进行检测分析。结果:淋巴结阴性的乳腺癌组织中IGF-1R的阳性表达率为94.12％(16／17),淋巴结阳性的乳腺癌组织中IGF-1R的阳性表达率为91.30％(21／23),正常组织中IGF-1R的阳性表达率为58.33％(7／12)。淋巴结阴性的乳腺癌组织中有12例呈强阳性表达(强表达率70.59％)。淋巴结阳性的乳腺癌组织中有8例呈强表达(强表达率34.78％)。淋巴结阳性和淋巴结阴性的乳腺癌组织中IGF-1R的阳性表达率均明显较正常乳腺组织高(P<0.05),淋巴结阴性的乳腺癌组织中IGF-1R的强表达率比淋巴结阳性的乳腺癌组织高(P<0.05)。结论:由此推断,IGF-1R在乳腺癌发生发展过程中发挥着重要作用。IGF-1R有可能成为临床乳腺癌诊断和判断预后的一个重要指标。

正常乳腺及乳腺癌中Fas的表达及意义

乳腺癌的发生发展过程中，细胞凋亡的异常是其中一个重要原因．细胞凋亡因子Fas包含有细胞膜上Fas（mFas）及可溶性（sFas）形式，mFas可介导正常人体细胞凋亡，而肿瘤细胞通过抑制细胞凋亡得以逃脱免疫监控，成为肿瘤发生和发展的一个途径，sFas在其中起到一定作用。我们通过检测血清sFas的水平，探讨sFas在乳腺癌中的意义：对mFas的表达进行了检测与比较分析．以期有利于对乳腺癌认识的深化。并为将来治疗方案的制订提供理论依据。

Y14和Upf1在人乳腺癌组织与正常乳腺组织中的表达及意义

目的探讨Y14和Upf1在乳腺癌组织与正常乳腺组织中的表达及意义，以及人乳腺癌组织中Y14和Upf1的表达与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学、激光共聚焦方法测定Y14和Upf1在人乳腺癌组织与正常乳腺组织的表达情况。结果①乳腺癌组织中Y14和Upf1的表达明显高于正常乳腺组织（P〈0．05）。②在乳腺癌组织中，组织学Ⅲ级组的Y14和Upf1表达明显高于Ⅰ和Ⅱ级组（P〈0．05）。③有腋窝淋巴结的乳腺癌组织中Y14和Upf1表达高于无腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织（p〈0．05）。结论Y14和Upf1在乳腺癌组织中的表达明显强于正常乳腺组织。在组织学Ⅲ级和有腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中Y14和Upf1表达明显增高。

胰岛素样生长因子-1受体在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达

目的 探讨胰岛素样生长因子 1受体 (IGF 1R)在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的分布和表达。方法 采用免疫组织化学方法 ,对乳腺癌组织和正常的乳腺组织中IGF 1R的表达情况进行检测分析。结果 乳腺癌组织中IGF 1R的阳性表达率均明显较正常乳腺组织高 (P <0 .0 5 )。结论 由此推断 ,IGF 1R在乳腺癌发生发展过程中发挥着重要作用。IGF 1R有可能成为临床乳腺癌诊断和判断预后的一个重要指标。

正常乳腺相关的组织学变化在病理诊断中的意义

熟悉正常乳腺组织的病理特点及乳腺在各种因素(年龄、性别、月经周期、炎症刺激等)影响下的形态学变化,有助于对乳腺病变性质的判断,也是作出正确乳腺病理诊断的前提和根本。

内蒙地区女性正常乳腺CT测量的意义

目的：对进行胸部影像检查的女性患者行乳腺CT值测量，并观察乳腺形态；总结内蒙地区正常女性乳腺密度与年龄段的关系。了解内蒙地区女性正常乳腺CT测量值及CT检查的意义。方法：梳理我院近半年肺部CT检查的女性患者未发现有乳腺疾病1126例（年龄10～69岁）进行乳腺CT值测量，并对其形态进行分析。结果：通过肺窗或纵膈窗测量乳腺腺体密度值无明显差异，腺体型乳腺测量值为峰值，以后随年龄的增长测量值逐步下降。结论：CT检查对区分正常及异常乳腺有重要意义，内蒙地区正常女性乳腺密度测量值与国内正常女性乳腺筛查测量结果无明显差异，CT检查对乳腺疾病的诊断具有一定价值。

正常乳腺组织结构与超声表现

乳腺实质和间质成分随着年龄和月经周期的不同在发生动态变化。组织结构成分和分布的不同使得正常乳腺组织回声存在“明暗”的不同及其“明暗”范围的不一致性。而回声强弱程度的差别、是否具有可识别的边界是灰阶超声判断是否存在病灶的最重要依据，对于正常乳腺超声表现的掌握程度直接影响着乳腺病灶的检出率。已知各种乳腺疾病的首发部位可分别来源于不同的乳腺结构，

正常国人女性乳腺的CT表现(附160例分析)

目的 :研究正常女性乳腺的CT表现并分型 ,初步确立乳腺CT的常规检查方法。方法 :应用体部CT对 1 60例处于不同生理分期的健康女性进行乳腺CT检查 ,其中 5例行增强CT检查。测量增强前后各生理分期乳腺实质的CT值 ,并通过图像放大测量乳晕及乳房其他部位皮肤的厚度。结果 :描述了正常乳腺的CT表现 ,并将其分为七型。通过对不同扫描体位的对比研究 ,我们认为俯卧位、1 0 0mA、1 .8s ,标准算法重建可以作为乳腺CT检查的常规检查技术。正常乳腺实质增强后增加的CT值为 1 1 .89± 6 .80HU。结论 :乳腺CT能够较好地显示乳腺本身及其周围的结构 。

多参数MRI评价年轻女性正常乳腺组织随月经周期变化规律的研究

目的探讨育龄期正常乳腺组织在不同月经周期下磁共振体素内不相干运动（IVIM）、扩散张量成像（DTI）及扩散加权成像（DWI）各参数值变化情况。方法共搜集26名健康女性志愿者,年龄22~30岁,平均26岁,规律月经周期,无口服避孕药史,未育。分别在月经期（第2天）、增生期（第7天）、卵泡期（第14天）、黄体期（第21天）、分泌期（第27天）进行了1个月经周期的MRI扫描,扫描序列包括T1WI、T2WI、DTI、DWI及IVIM。基于感兴趣区（ROI）的方法,由2名观察者分别在不同时间测量相同区域正常乳腺组织的真实扩散系数（D）、灌注相关扩散系数（D^＊）、血管容积分数（f）、各向异性分数（FA）及表观扩散系数（ADC）。结果采用3.0 T MR获得的IVIM、DTI、DWI乳腺图像具有较高的图像质量和分辨率,其参数图无严重伪影,图像质量较好,能满足参数测量要求。2名观察者分别所测得（观察者间）D值、D^＊值、FA值及ADC值可重复性好（ICC值〉0.8）,f值可重复性较差。正常乳腺的D^＊值显示随月经周期规律波动,在黄体期最高,与月经期和增殖期对比,有显著性差异（P〈0.01）;f值在卵泡期高于其他阶段,但是对比没有显著差异。D值和ADC值随月经周期有相似趋势,D值在黄体期和增殖期对比,差异具有统计学意义（P=0.005）;ADC值的差异在月经周期中无统计学意义。FA值在月经期与分泌期对比差异有统计学意义（P=0.034）。结论乳腺D值、D^＊值、FA值及ADC值可重复性好,可以敏感地反映乳腺组织随月经周期激素调节的变化特点。

正常妇女乳腺不同月经周期表观扩散系数差异的初探

随着磁共振成像（MRI）技术的飞速发展．磁共振扩散加权成像（DWI）得以广泛应用于人体。近年来，其在乳腺良恶性肿瘤的鉴别、新辅助化疗效果评价方面的作用也越来越得到广大研究者的关注。因此探明正常乳腺的表观扩散系数（apparent diffusion coefficient，ADC）值在不同月经周期的变化及其变化趋势，为乳腺病变的DWI检查选择合适的时间，对乳腺良恶性肿瘤界值的确定、新辅助化疗效果的评价有重要意义。

Bcl-2蛋白在乳腺正常组织、良性病变及乳腺癌中表达的免疫组织化学研究

目的 :通过检测Bcl- 2蛋白在 70例乳腺正常组织、乳腺良性病变及乳腺癌中的表达 ,探讨Bcl- 2对乳腺细胞增生、生存和凋亡的影响。方法 :应用S -P法抗Bcl- 2免疫组织化学染色 ,光镜观察。结果 :2 0例乳腺正常导管上皮、15例乳腺良性病变及 35例乳腺癌Bcl- 2蛋白阳性表达率分别为 95 0 %、80 0 %、5 1 4% ,三组Bcl - 2蛋白表达有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :Bcl- 2蛋白过表达与乳腺细胞增生、生存和凋亡有一定的关系。

傅里叶变换红外光谱应用于乳腺癌临床诊断的探索

应用了ATR探头测定了10例正常乳腺组织块和8例乳腺癌组织块的傅里叶变换红外(FTIR)光谱,用统计学的方法详细比较了乳腺癌组织与正常乳腺组织的13条谱带的19个红外光谱指标的差异。结果表明乳腺癌组织的红外光谱中与蛋白质、脂类、碳水化合物和核酸相关的谱带同正常乳腺组织之间存在明显的差异(1)N—H的相对强度明显增高,蛋白质酰胺Ⅰ带显著红移。(2)—CH2基团的对称伸缩振动和反对称伸缩振动以及CO的伸缩振动明显减少;(—CH2)n变角振动的相对强度降低。(3)1160cm-1谱带与1120cm-1谱带的相对强度明显降低。(4)1080cm-1谱带红移。这些差异是应用红外光谱诊断乳腺癌的基础。FTIR光谱在乳腺癌的临床诊断和治疗方面有着十分美好的前景。

人乳腺癌组织的显微拉曼光谱研究

研究了人类正常与癌变乳腺组织的显微拉曼光谱特性。与正常乳腺组织相比,癌变组织的核酸骨架磷酸离子νS(PO-2)特征谱线由1082移到1097cm-1、强度加强,位于817cm-1的RNA主链νS(O—P—O)的谱线强度增加;蛋白质酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ两个特征谱带从1657,1273cm-1分别位移到1662和1264cm-1,其中1264cm-1谱线的宽度和强度均增加,某些氨基酸残基的C—O谱线向高波数位移,色氨酸特征峰1368cm-1在癌变组织中几乎观察不到;脂类特征谱线减少。上述谱线变化表明,癌变组织中核酸的相对含量增加、主链结构发生变化;蛋白质结构同时呈现α螺旋、无规卷曲、β折叠以及β回折4种构象特征,其分子间的氢键近乎断裂,蛋白质变得松散和无序,色氨酸残基的吲哚环呈现“暴露式”;脂类含量减少。研究表明,显微拉曼光谱可以为乳腺癌变的生化机理研究以及活体诊断提供有力的实验依据。

ADAM17在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化及免疫印迹2种方法检测ADAM17蛋白在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤及正常乳腺组织中的表达情况,并分析其在这三者中的表达差异。结果免疫组化结果显示ADAM17主要在胞浆表达。其在正常乳腺组织中呈阴性表达,在乳腺纤维腺瘤组织部分呈弱阳性表达(54.5%),部分呈阴性表达(45.5%),但乳腺癌组织中ADAM17以强阳性表达为主(69.2%)。乳腺癌与乳腺纤维腺瘤、乳腺癌与正常乳腺组织之间的ADAM17表达均有显著性差异。免疫印迹结果显示,与正常乳腺组织相比,乳腺纤维腺瘤组织中ADAM17表达轻度增高,在乳腺癌表达却显著增高;乳腺癌中的ADAM17表达水平明显高于乳腺纤维腺瘤,有显著性差异。结论 ADAM17在纤维腺瘤中呈低表达,而在乳腺癌中却是高表达,因此ADAM17的表达水平可作为临床诊断乳腺癌的一个新的辅助指标,并可成为一个新的乳腺癌靶向治疗的靶点。