组蛋白乙酰化抑制哮喘易感基因ADRB2的表达

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)及组蛋白乙酰化转移酶(histone acetyltransferase,HAT)调控的组蛋白乙酰化修饰对β2肾上腺素受体(β2-drenergic receptor,ADRB2)基因的影响。方法将ADRB2启动子质粒(pADRB2-1918)转染到人正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)细胞后,分别加入丁酸钠(sodium butyrate,SoB)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA),将pADRB2-1918质粒和腺病毒E1A相关的300kDa蛋白(p300)质粒共转染到BEAS-2B细胞,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用双荧光素酶报告基因检测经SoB、TSA及p300处理后BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性。向BEAS-2B细胞中分别加入SoB和TSA,或向BEAS-2B细胞中转染p300质粒,使BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测BEAS-2B细胞中ADRB2mRNA的相对表达,利用Western blot法检测BEAS-2B细胞中ADRB2蛋白的表达。结果在BEAS-2B细胞中分别加入SoB、TSA和转染p300质粒,参与BEAS-2B细胞中组蛋白乙酰化,发现BEAS-2B细胞中ADRB2启动子活性、mRNA和蛋白的表达均较对照组下降(P<0.05),差异均有统计学意义。结论组蛋白乙酰化可下调哮喘易感基因ADRB2的表达。

柴油机废气颗粒潜在致癌作用机制及其细胞毒性观察

目的通过柴油机废气颗粒(DEP)作用于正常支气管上皮细胞(HBE),从表皮生长耐受体(EGFR)、磷酸肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的变化探讨柴油机颗粒潜在致癌机制及对细胞毒性影响。方法将DEP以0、50、100、200、400μg/mL加入待测HBE细胞中,用Western blot检测EGFR表达量的变化,从中选择对HBE细胞影响最大的浓度作为研究对象实验组。Western blot检测DEP处理后实验组及空白对照组HBE细胞内EGFR、PI3K、AKT及p-AKT的变化。DEP对细胞毒性的检测,通过Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡变化。结果加入浓度为100μg/mL的DEP处理后,HBE细胞中EGFR表达量明显高于其他浓度组(P均<0.05);Western blot表明,实验组HBE细胞PI3K、AKT及p-AKT的表达量较空白对照组显著上升(P均<0.05),细胞毒性结果显示,与空白对照组比较,实验组HBE细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.01),凋亡率增加(P<0.01),侵袭能力下降。结论 DEP存在确切的细胞毒性,EGFR表达增加可能在DEP导致肺癌变的过程中起到重要作用,其作用机制可能与激活下游PI3K/AKT通路有关。

肺不张的诊断

肺不张是肺部疾病中常见的征象,通常意味着支气管内有阻塞性病变存在,及时明确诊断,可以早期针对病因治疗。目前诊断肺不张的主要手段是,X线检查、CT扫描和纤支镜检查。现分别介绍如下: 一、X线检查 X线胸片(包括正、侧位及断层摄片等)依然是目前首先发现和诊断肺不张的最常用方法。在X线诊断中临床或放射科医师必须掌握或注意下列有关问题。

肺神经内分泌性肿瘤的临床、X线及CT表现

肺神经内分泌性肿瘤指起源于存在于正常支气管粘膜上皮的神经内分泌细胞(Kulchitsky cell)的一组肿瘤,约占所有肺肿瘤的25%,其中包括肺类癌(典型类癌)、肺小细胞癌及非典型类癌三种。这三种肿瘤有许多共同的形态学及生物化学特征,其临床、X线及病理表现也有许多相同之处,但又不完全相同,而且其预后。

小细胞肺癌的影像学诊断

小细胞肺癌的影像学表现缺乏特征性,病理检查前难以确诊。小细胞肺癌的相对影像学特征为男性多见,年龄较轻(多【50岁),中央型肺块。

经支气管纤维内镜治疗老年人急性胆囊炎手术后肺炎

老年人急性胆囊炎手术后常并发肺炎。作者分析了60岁以上急性胆囊炎手术1672例,术后并发肺炎108例(6.5%),因此死亡7例(6.5%);中青年手术2486例,术后肺炎47例(1.9%),无1例死亡。

PM_(2.5)诱导BEAS2B细胞Dnmt1下调激活Foxp3表达分子机制

目的探讨PM_(2.5)激活人正常支气管上皮细胞(BEAS2B)Foxp3表达的分子机制。方法实验设对照组(磷酸盐缓冲液)、PM_(2.5)组(300μg/mL)、5-AzaC组(DNA甲基化转移酶抑制剂,5.0μmol/L)、TSA组(组蛋白去乙酰化酶抑制剂,0.2μmol/L)、PM_(2.5)对照组;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测BEAS2B细胞中Foxp3、HOXA1和HOXA2基因表达,蛋白印迹法(Westerm blot)检测Dnmts相关蛋白表达,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP-PCR)检测DNA甲基化水平。结果与对照组比较,PM_(2.5)处理的BEAS2B细胞Foxp3表达量上升1.15倍,差异有统计学意义(P<0.05);Dnmt1和Dnmt3b表达量分别下降0.51和0.38倍,Dnmt3a上升1.51倍,差异均有统计学意义(P<0.05);5-AzaC或TSA处理后,Foxp3表达量分别上升1.61和1.20倍,差异均有统计学意义(P<0.05),并伴随Foxp3启动子区DNA低甲基化及Dnmt1蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PM_(2.5)可能通过抑制Dnmt1表达激活Foxp3表达。