生蒲黄与炒蒲黄、蒲黄炭提取物对正常BALB/c小鼠非特异性免疫功能的影响

目的:比较生蒲黄与炒蒲黄、蒲黄炭提取物对正常BALB/c小鼠非特异性免疫功能的影响。方法:将正常BALB/c雄性小鼠,随机分为4组,即空白对照组、生蒲黄组、炒蒲黄组、蒲黄炭组。各药物组分别按0.15 m L/10g体重每天灌胃1次,连续15 d。空白对照组给予等体积蒸馏水。通过对正常BALB/c小鼠免疫器官指数、炭粒廓清实验、血清溶菌酶含量等非特异性免疫指标来检测上述药物对其影响。结果:生蒲黄对正常BALB/c小鼠无非特异性免疫作用;炒蒲黄、蒲黄炭组分别通过促进溶菌酶分泌、增加胸腺指数来增强免疫作用。结论:炒蒲黄、蒲黄炭对正常BALB/c小鼠具有增强非特异性免疫的作用。

电针对正常高值血压盐敏感大鼠肾脏GRP78、CHOP及肾细胞凋亡影响

目的观察电针对正常高值血压盐敏感大鼠肾脏内质网应激时GRP78、CHOP及肾细胞凋亡的影响,探讨电针调节内质网应激保护肾脏的作用机制。方法将24只7周龄雄性Dahl盐敏感大鼠(Dahl salt sensitive rat,DS)按随机数字表法随机分为模型组、针刺组、非经非穴组。另将8只同龄雄性盐抵抗大鼠(Dahl salt resistant rats,DR)设为空白组。采用8%高盐饲料喂养法制备正常高值血压模型。正常高值血压大鼠模型为BP130~139/85~89 mm Hg。造模成功后改为普通饲料喂养。空白组、模型组每天捆绑固定20 min,不作其他干预;针刺组予双侧足三里、曲池电针治疗20 min;非经非穴组在双侧髂脊上10~15 mm、后正中线旁开20 mm区段内选择1个固定对照点电针治疗20 min。每日1次,每周6天,休息1 d,连续治疗4周。取大鼠肾组织,采用荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测GRP78、CHOP的表达,采用TUNEL检测肾细胞凋亡水平。结果干预4周后,与模型组比较,针刺组血压显著降低(P<0.05),非经非穴组血压差异无统计学意义(P>0.05);针刺组GRP78、CHOP的mRNA和蛋白表达及肾细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。与针刺组比较,非经非穴组GRP78、CHOP的mRNA和蛋白表达及肾细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针足三里、曲池可能通过抑制内质网应激,抑制肾细胞凋亡,对正常高值血压DS大鼠肾脏起到保护作用。

3种SPF小鼠血液生理生化正常参考值的研究

由于SPF近交系小鼠Balb／c、C57BL／6和DBA／2遗传基因纯合，个体差异小，对试验反应均一，试验结果准确可靠，故广泛地应用于生物医学研究和药品、生物制品的检定中。近年来，有关小鼠的生理生化正常值国内已有些报道，但由于动物品种、品系、饲养条件、检测方法以及所用仪器和试剂等因素对其测定值有一定影响，因而文献报道值略有差异。

昆明种无毛小鼠及C57BL/6无毛小鼠皮肤组织学比较研究

对我单位发生脱毛突变的2月龄昆明种无毛小鼠及C57BL／6无毛小鼠皮肤进行组织学观察，结果发现两种动物表皮均有一层角化过度的角质层，毛干消失，毛根不规则，毛球结构不正常，毛囊内被一些角化物质充填，有的变为空囊腔。昆明种无毛小鼠真皮包囊取代皮下脂肪，而C57BL／6无毛小鼠含有大量黑色素细胞，并有树突状突起。

消渴汤方剂对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素和C肽分泌的影响

目的 研究消渴汤中药对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素和C肽水平分泌作用影响。方法 同随机方法将 4 4只Wistar大鼠分为正常和实验组 ,应用放射免疫方法对正常组和Ⅱ型糖悄病模型组大鼠 (尾静脉注射链尿佐菌素 2 5mg/kg加高脂 ,高热 ,高能量喂养 )。在给予消渴汤后其空腹及口服葡萄糖后血浆中胰岛素和C肽水平变化测定。结果 消渴汤可增强Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素和C肽分泌 ,对正常大鼠无影响。结论 消渴汤可以促进Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛素和C肽分泌。

小鼠尾静脉注射^(125)I标记的抗CEA人鼠嵌合抗体rch24的药代动力学研究

目的探讨125I-rch24在小鼠体内的药代动力学过程。方法7只BABL/c小鼠,溴代琥珀酰亚胺(NBS)法标记的抗体125I-rch24尾静脉注射,于注射后不同时间尾根部取血,测定放射性计数,绘制血清除曲线,计算药代动力学参数。结果①125I与CEA人鼠嵌合抗体rch24结合,采用纸层析法测定的标记率为95.5%±02%;②标记抗体的放射化学纯度至14天后为92.6%,35天后为89.3%;③经计算机模拟,为双指数曲线,标记抗体的血液分布、清除符合二房室模型。结论正常小鼠尾静脉注射标记抗体125I-rch24后的药代动力学过程符合二房室模型,静脉注射适宜用于结肠癌放射免疫导向手术。

正常妊娠：061481 Toll样受体参与双链RNA对小鼠妊娠结局的影响

为探讨Toll样受体3（TLR3）与双链RNA（dsRNA）相互作用对BALB／C和NOD／SCID小鼠妊娠结局的影响。比较经过和未经预先TLR3阻断条件下同基因妊娠的BALB／C和NOD／SCID小鼠在dsRNA刺激后的胚胎吸收率（RR），并采用流式细胞术检测CD45^＋TLR3^＋细胞和CD45^＋CD80^＋细胞在CD45^＋细胞群中、以及CD82^＋CD80^＋细胞在CD82^＋细胞群中的百分率。结果：在dsRNA刺激下BALB／C小鼠RR显著升高，而对NOD／SCID^＋小鼠无显著影响。BALB／C小鼠胎盘CD45^＋细胞群中TLR3表达升高，并伴有CD45^＋CD80^＋细胞和CD82^＋CD80^＋细胞百分率的升高。

病毒性心脏病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化

目的探讨急、慢性病毒性心肌炎和感染性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化。方法以柯萨奇病毒B3感染Balb/c小鼠建立急、慢性心肌炎和扩张型心肌病的系列动物模型,同期设正常对照;经组织病理学方法和超声心动图验证模型后,以缺口末端标记法(TUNEL)检测各组小鼠心肌细胞凋亡。结果各期感染小鼠心肌细胞凋亡率较同期对照组明显增高,心肌细胞凋亡率依次分别为(8.2±1.4)%vs(1.3±0.5)%,(15.3±1.1)%vs(2.7±0.7)%,(13.9±2.1)%vs(3.1±0.6)%,(均P<0.01)。结论心肌细胞凋亡贯穿病毒性心脏病全程,可能对其病程和预后产生深远影响。

L-[1-^(13)C]苯丙氨酸呼气试验与肝脏苯丙氨酸羟化酶活性

目的:研究L-[1-13C]苯丙氨酸呼气试验(PheBT)结果与大鼠肝脏苯丙氨酸羟化酶(PAH)活性的关系. 方法:CCl4诱导急性肝损伤SD大鼠10只,正常对照组10 只;尾静脉给予13C标记L-苯丙氨酸(13C-phe)20 mg/kg, 收集给药前和给药后60 min内间断时间点的气样:采用气体同位素比值质谱仪测量气样中13CO2丰度;计算呼气气中13C清除速率常数;采用酶偶联法测量肝脏组织中PAH活度. 结果:绝大部分正常(9/10)和CCl4急性肝损伤(8/10)大鼠尾静脉给予13C—phe以后,呼出气中13C排除在2 min 达到峰值;呼出气中13C排除分为快、慢两个时相;CCl4 肝损伤大鼠PheBT参数13C排除速率常数PheBT—k显著小于正常对照组(P=0.00,P<0.01),其值分别为(2.45±0.25)×10-2/min和(2.98±0.19)×10-2/min而快时相13C 处置常数在肝损伤和正常组大鼠之间没有差异(P>0.05), 其值分别为(9.46±3.27)×10-2/min和(10.17±2.10)×10-2/min; CCl4急性肝损伤大鼠呼出气中13C丰度峰值(204.33±35.80)‰却显著高于正常对照组(170.65±22.85)‰(P= 0.04,P<0.05);急性肝损伤大鼠全肝脏苯丙氨酸羟化酶活度显著低于正常对照组(P=0.00,P<0.01);大鼠呼气试验参数PheBT—k与大鼠全肝苯丙氨酸羟化酶总活度高度相关(r=0.92,P=0.00,P<0.001). 结论:PheBT时全肝PAH总活度降低是急性肝损伤大鼠呼出气中13C排除速率下降的最直接原因:呼气试验参数PheBT—k可以定量评价肝脏损伤程度.

载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积与血清抗氧化低密度脂蛋白的抗体水平(英文)

背景:低密度脂蛋白的氧化是动脉粥样硬化发生和发展过程中关键的影响因素,血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法对动脉粥样硬化斑块的评估价值如何?目的:探讨载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法,并分析血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积的评估价值。设计:单因素方差分析(分组对照实验)。单位:一所大学的营养与代谢性疾病实验室。对象:apoE基因缺陷小鼠作为阳性组(品系C57BL/6J,n=15),正常小鼠作为对照组(品系C57BL/6J,n=15)。干预:两组实验小鼠在层流架中分笼喂养,自由饮水摄食,16周后自小鼠眼眶静脉采血,分离小鼠血清。分离载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠血清,用酶联免疫吸附法检测血清氧化低密度脂蛋白抗体水平;用油红O染色法和图像分析法测量小鼠动脉粥样硬化斑块面积。主要观察指标:载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠小鼠氧化低密度脂蛋白的水平和动脉粥样斑块面积。结果:apoE基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白的水平显著高于正常小鼠的水平(0.079±0.028)%,(0.012±0.001)%,F=10.666,P<0.01;载脂蛋白E基因缺陷小鼠的动脉粥样硬化斑块面积(26.25±9.20)%也显著高于正常小鼠(0%),且二者之间呈显著性相关,r=0.638,P<0.01。

健脾愈消汤对STZ大鼠肝糖原等指标的影响

目的观察健脾益气养阴法(健脾愈消汤,以下简称J汤)对STZ大鼠肝糖原等指标的影响,探讨从脾胃论治消渴病的机理。方法健脾愈消汤治疗组(DM J组)STZ大鼠用J汤,正常对照组(C组)及模型对照组(DM组)用生理盐水灌胃,剂量均为18mL/(kg·d),处理4周后,观察各组大鼠的肝糖原、血糖、血浆胰岛素等指标的变化情况。结果第4周末各组大鼠的肝糖原、血糖、血浆胰岛素水平相比,DM组显著低于DM J组和C组(P<0.01)。结论J汤具有降低血糖、升高血浆胰岛素、促进肝糖原合成等功能;健脾益气养阴可以增强脾胃的主运、主化、主升、降甘等功能,能调节机体的“甘质”代谢、维持机体的“甘质”稳态;脾胃气阴两虚是消渴病发生发展的主要病机。

IL-2 preS DNA疫苗免疫正常小鼠和HBV转基因鼠的免疫应答研究

目的 探讨IL 2preSDNA疫苗作为预防和治疗性疫苗的可行性及作用机理。方法应用基因重组技术 ,构建人白细胞介素 2 (hIL 2 )和前表面抗原 (preS)的真核表达载体 ,将此重组载体用基因枪分别注射正常的BALB c小鼠和HBV转基因小鼠 ,通过ELISA方法检测BALB c小鼠和HBV转基因鼠的抗 preS2、HBsAg及抗 HBs抗体水平 ;荧光定量PCR方法检测HBV转基因鼠血清中HBVDNA拷贝数 ,并用免疫病理HE染色观察小鼠肝组织炎症活动度 ,同时检测肝功能指标。结果 ①基因枪注射真核表达质粒免疫正常小鼠后 ,10 0 %小鼠能在第 4、6周检测到抗preS1抗体 ,持续时间长达10周。②用IL 2preS真核表达质粒基因枪肌肉注射方式优于正常肌肉注射和皮下注射的方式 ,且所需质粒量 (10 μg 只 )仅为后者 (10 0 μg 只 )的 1 10。③在第 4周高峰期检测IgG亚类 ,是诱导以TH1(IgG2a)细胞免疫为主的反应。④基因枪注射真核表达质粒 (1μg 只 )免疫转基因小鼠后 ,80 %的小鼠产生了抗体 ,HBVDNA量下降 ,其中 2 0 %的小鼠HBsAg转阴。⑤HE肝组织染色显示 :肝组织有明显的炎细胞浸润、肝细胞肿大、颗粒样变性、转氨酶升高。结论 IL 2preSDNA疫苗能刺激小鼠机体产生体液和细胞免疫 ,可部分打破小鼠机体的免疫耐受 。

大鼠C6脑胶质瘤MR扩散加权成像及灌注成像与组织学对照研究

目的对大鼠脑胶质瘤MR扩散加权成像(DWI)及灌注成像(PWI)的实验研究,探讨两者在肿瘤生长及血管生成中的诊断价值。方法对36只颅内种植C6胶质瘤细胞的雌性Wistar大鼠分别于种植后1～4周行MRT1WI、T2WI、DWI、PWI及增强T1WI检查。处死后行脑组织HE及CD34免疫组织化学(简称免疫组化)染色。结果种植后3～4周,肿瘤实质区及肿瘤周围区表观扩散系数(ADC)值与种植后1～2周及对侧脑白质相比,差异均具有统计学意义(P<0.01)。胶质瘤实质区的ADC值随镜下肿瘤组织细胞构成比增加而降低,呈明显的负相关(r=-0.682,P<0.01)。种植后2～4周,肿瘤实质部分最大局部脑血容量(rCBVmax)与种植后1周及对侧脑白质相比,差异均具有统计学意义(P<0.01)。种植后1～2周,肿瘤周围区出现宿主血管rCBVmax值的增高,以种植后1周最为显著(t=3.88,P<0.01)。肿瘤实质区的rCBVmax值与CD34免疫组化微血管密度(MVD)计数值间具有显著的正相关(r=0.716,P<0.01)。结论DWIC6胶质瘤肿瘤实质区ADC值的减低与肿瘤恶性程度有关;C6胶质瘤的PWI肿瘤实质区rCBVmax值与组织学MVD值间具有显著的相关性,可作为1种活体评价肿瘤微血管的指标。肿瘤周围区rCBVmax值可对肿瘤的新生血管与正常脑组织原有血管扩张的鉴别有帮助。

IL-18抗体对急性免疫性肝坏死动物模型的影响

目的探讨白细胞介素(IL) 18 抗体干预,了解IL 18 抗体对急性免疫性肝坏死动物模型的影响。方法取BALB/c 小鼠18 只,随机平分为三组A组(正常对照组);采用结核菌苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱导法建立急性免疫性肝损伤模型B组(单纯病理组);抗体治疗组(C组)在模型形成前用IL 18抗体干预。实验结束取所有BALB/c小鼠肝组织,行病理学肝组织炎症活动度计分(HAI),血清IL 18由ELISA法检测,肝组织IL 18、肿瘤坏死因子α(INF α)、干扰素γ(IFN γ)由RT PCR检测。结果C组HAI 3 333±1 633,明显低于B组19 000±0 548(P<0 05);B组血清IL 18明显较C组增高(P<0 05);B组肝组织IL 18、IFN γ、INF αmRNA表达水平明显较C组增高(P<0 05)。结论IL 18、IFN γ、TNF α在急性免疫性肝坏死动物模型的形成中发挥重要作用,IL 18抗体可干预其形成。

以人IgG作免疫原同时获取抗人γ重链及κ、λ轻链单克隆抗体的研究

本文报道用纯化的IgG免疫BALB/c小鼠,同时获得抗人γ重链及抗κ、λ轻链三种单克隆抗体。经鉴定,抗人γ重链McAb只与IgG反应,不与其它Ig及轻链反应。抗κ及λ链McAb除分别与游离的κ、λ轻链反应外,也与和Ig分子中重链结合的κ、λ反应。免疫电转印法测定,抗γ链McAb识别分子量为50KD的重链抗κ、λMcAb识别分子量为22KD的轻链。将所得抗κ、λ单克隆抗体分别与正常人周血单个核细胞进行反应,染色结果表明κ链表达与λ链表达细胞之比为2∶1;两种抗体配对混合后的反应结果与多克隆抗体Sm Ig一致。实验结果表明所获抗体符合抗γ、κ、λ单克隆抗体的特点。

分泌肾综合征出血病热毒单克隆抗独特型抗体的杂交瘤细胞系的建立

将HFRS病人Ab_1免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞融合,制备了HFRSV的McAb_2。初期融合试验中用ELISA间接法检测阳性克隆,阳性率为3.2～7.4％。其中5株杂交瘤经克隆化后阳性率达到100％。特异性鉴定表明,5种McAb_2只与HFRS病人Ab_1结合,不与正常人Ig结合。McAb_2所识别的独特型是人Ab_1与部分小鼠抗HFRSV的McAb上的交叉反应独特型。本文还应用McAb_2作为探针,对抗HFRSV的单克隆抗体的独特型进行了分析。

白细胞介素12基因治疗小鼠变应性鼻炎的实验研究

目的探讨鼻腔局部应用EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)质粒载体介导的白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)基因治疗对变应性鼻炎炎症反应的调节作用。方法将36只6～8周雄BALB/C实验小鼠随机分为变应性鼻炎组、IL-12基因治疗组和正常对照组,每组12只。以BALB/c小鼠经卵清蛋白(ovalbumin,OVA)免疫建立变应性鼻炎模型,用阳离子脂质体包裹EBV质粒载体介导的IL-12表达质粒(pGEG.mI-L12)形成混合物EBV/lipoplex,于激发前鼻腔局部滴入后,观察小鼠变应性症状的改善情况,并检测该基因在3组实验鼠鼻黏膜局部的表达情况以及对鼻黏膜炎性细胞和Th2细胞因子的影响。结果基因治疗组小鼠鼻黏膜中IL-12mRNA阳性细胞数量明显高于变应性鼻炎组,差异有统计学意义(P<0.01);基因治疗组小鼠鼻黏膜中IL12阳性细胞数量明显高于变应性鼻炎组(P<0.05);变应性鼻炎组鼻黏膜中嗜酸粒细胞、肥大细胞和IL5阳性细胞比例显著高于基因治疗组和正常对照组(P<0.01);变应性鼻炎组外周血中总IgE含量显著高于正常对照组和基因治疗组(F=1216.21,P<0.01)。结论鼻腔局部应用EBV/lipoplex后,pGEG.mIL-12能够在鼻黏膜中高效地表达,能明显抑制鼻腔的变应性反应。EBV/lipoplex有望成为变应性鼻炎免疫治疗一种新的方法。

大蒜新素治疗小鼠巨细胞病毒性心肌炎作用研究

目的探讨大蒜新素对小鼠巨细胞病毒(MCMV)性心肌炎治疗作用及其抗CMV机制。方法60只BALB/c小鼠随机分成大蒜新素治疗组(20只)、安慰剂组(20只)和正常对照组(20只)。大蒜新素治疗组接种MCMVK181后24h开始用大蒜新素一般剂量(25mg/kg)腹腔注射,每天1次,共14d;安慰剂组和正常对照组仅用等量生理盐水。各组分别于治疗后第3、5、7、14天各处死5只小鼠,观察小鼠心肌组织病理损害;用双抗体夹心ELISA法检测小鼠心肌组织细胞因子IFNγ表达水平;用RTPCR方法检测小鼠脾核转录因子TbetmRNA表达强度。结果MCMV感染下调小鼠TbetmRNA和TH1类细胞因子IFNγ的表达(P<0.01);大蒜新素能诱导MCMV性心肌炎模型小鼠转录因子TbetmRNA和细胞因子IFNγ的表达显著增加(P<0.01),并显著改善MCMV感染小鼠心肌组织病理损害(P<0.05)。结论大蒜新素通过上调转录因子TbetmRNA表达进而促进TH1类细胞因子IFNγ分泌,诱导和促进TH1优势应答反应,增强机体特异性细胞免疫功能而发挥抗MCMV作用。

肺表面活性物质对大鼠肺内源性急性肺损伤的作用

目的观察外源性肺表面活性物质对大肠杆菌(E.coli)导致的大鼠急性肺损伤(ALI)的作用。方法设立正常大鼠组(N组)和3个实验组[E.coli导致的ALI大鼠PaO2FiO2<200mmHg(1mmHg=0.133kPa)]:对照组(C组,不用药)、表面活性物质组(PS组,经气管插管滴入CurosurfR2ml kg,160mg kg)、生理盐水组(NS组,经气管插管滴入NS,2ml kg)。每30min检测血气、胸肺有效动态顺应性,180min结束实验,进行肺病理检查,测肺指数、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量和TNFα浓度。结果①PS组各时点PaO2较给药前升高约70%,与C组、NS组比较明显升高(P<0.05);②PS组PaCO2、pH以及胸肺有效动态顺应性各时点好于NS组(P<0.05);③PS组肺指数明显低于C组[(0.38±0.05)%对(0.43±0.05)%,P<0.05]和NS组[(0.47±0.06)%,P<0.01];④PS组肺透明膜形成较NS组减少(P<0.05),较C组有减少趋势(P=0.055);⑤PS组BALF蛋白含量明显低于C组[(0.63±0.30)mg ml对(0.96±0.25)mg ml,P<0.05]和NS组[(1.03±0.27)mg ml,P<0.01];TNFα浓度明显低于NS组[(0.35±0.23)ng ml对(2.14±1.02)ng ml,P<0.01],较C组(0.61±0.28)ng ml有减低趋势(P>0.05)。结论肺表面活性物质对E.coli所致的大鼠肺内源性ALI有治疗作用,可改善氧合,减轻肺水肿,并有减少肺透明膜形成和TNFα释放趋势。