金属离子和氨基酸对Eupenicillium sp.E-UN41生物合成咪唑立宾的影响

为考察金属离子和氨基酸对Eupenicillium sp.E-UN41菌体生长及其产生的次级代谢产物咪唑立宾(MZ)的生物合成影响,在培养基中添加了无机盐和氨基酸。结果表明在发酵培养基中添加适量的镁、钠、锰、钾、钙等金属离子可提高咪唑立宾产量5%～15%,添加1.0%L-组氨酸,MZ产量提高94%。添加适宜的L-天门冬氨酸和L-甘氨酸对产MZ亦有促进作用,而L-精氨酸明显抑制Eupenicillium sp.E-UN41生物合成MZ。本研究为咪唑立宾发酵的产业化奠定了基础。

UV与NTG复合诱变选育咪唑立宾高产菌

为选育咪唑立宾的高产菌株,对咪唑立宾产生菌Eupenicillum sp.E-0509-2的孢子分别进行了紫外线照射(UV)、亚硝基胍(NTG)和UV+NTG复合诱变处理筛选突变株。结果表明试验所确定的咪唑立宾产生菌的孢子诱变适宜条件为:将孢子悬液在电磁搅拌下,经紫外线照射处理60s后,以3.0g/L NTG处理20min。经发酵筛选试验,获得了一株遗传性状稳定、高产咪唑立宾的诱变菌株Eupenicillum sp.E-UN41,其咪唑立宾产量较出发菌株提高13倍。

Eupenicillium sp.E-UN41胞外产咪唑立宾的发酵条件优化

对前期筛选得到的咪唑立宾产生菌Eupenicillium sp.E-UN41,通过单因素筛选结合正交试验进行发酵培养基优化,得到最佳配方:可溶性淀粉3.0%,黄豆粉3.5%,K2HPO40.005%,MgSO40.05%,CaCO30.2%.对摇瓶条件下液体发酵的主要影响因子温度、转速、初始pH值等进行实验探讨,确定最佳培养参数:初始pH值7.0,种子菌龄48 h,装液量50 mL/500 mL,接种量2%,摇床转速250 r.min-1,发酵温度28℃;最佳发酵时间为7 d,其发酵效价相比对照提高38%.