霍山石斛类原球茎二步法培养细胞生长和多糖合成的动力学研究

磷是调控类原球茎细胞生长和多糖积累的有效因素。为了获得较高的多糖产量,根据霍山石斛类原球茎生长和多糖积累的动力学特性,提出了二步培养方式,采用了补料策略,研究了其培养过程的动力学特性,并建立了相关模型。结果表明,采用二步法培养,生物量从28·7gDW/L提高到44·2gDW/L,多糖产量从1·86g/L提高到5·22g/L,多糖含量从6·4%提高到11·9%。建立的模型基本反映了类原球茎生长和多糖积累的动力学机制。

牛体外受精卵的二步法培养体系的研究

以CR1aa为基础培养液,采用二步法对牛体外受精卵进行体外培养,完善牛体外受精卵的培养体系。实验一:对照组连续7 d均为CR1aa+50 mL/L FBS培养,处理组前3 d为CR1aa+3 mg/mLBSA培养,后4 d换为CR1aa+50 mL/L FBS。处理组的囊胚率显著高于对照组,但卵裂率和囊胚孵化率无显著差异。实验二:对照组连续7 d均为CR1aa+50 mL/L FBS培养,处理组前3 d为CR1aa培养,后4 d换为CR1aa+50 mL/L FBS。处理组的卵裂率显著高于对照组,但囊胚率和囊胚孵化率差异不显著。实验三:对照组连续7 d均为CR1aa+50 mL/L FBS+0.1mmol/L GSH培养,处理组前3 d为CR1aa+0.1 mmol/LGSH培养,后4 d换为CR1aa+50 mL/L FBS+0.1 mmol/L GSH。处理组的卵裂率显著高于对照组,囊胚率极显著高于对照组,但囊胚孵化率差异不显著。结果表明,GSH与二步法培养系统结合相对于传统的一步法培养系统更适于牛体外受精卵的体外培养。

两步法培养对丰富栅藻脂肪酸和氨基酸的影响

为了提高丰富栅藻的油脂产量和评估培养条件对其营养成分的影响,对丰富栅藻的培养基正交优化后,对其进行两步法培养并分析培养前后的脂肪酸和氨基酸的变化。结果表明:两步法培养后丰富栅藻的生物量、油脂含量和油脂产量分别达到23.57 g/L、33.49%和7.58 g/L;丰富栅藻的单不饱和脂肪酸(MUFAs)特别是C18∶1(n-9)的相对含量有所上升,但是饱和脂肪酸(SFAs)和多不饱和脂肪酸(PUFAs)的相对含量有所下降;氨基酸特别是必需氨基酸的总量降低;但丝氨酸和蛋氨酸的含量却略有增加。

双相一步法支原体培养基的商品开架试验研究

为探索双相一步法支原体培养基在不同保存温度、保存时间、运输方式等条件下培养基质量稳定性 ,将 45 0 0人份的培养基以铁路、航空、轮船运输运送至三个不同的实验室 ,每一实验室将培养基各 80支在冷冻 (-2 0℃ )、冷藏 (4～ 8℃ )、室温 (2 5℃ )和高温 (3 7℃ )分别保存 1个月、6个月、12个月及 18个月 ,并以解脲脲原体标准菌株接种上述培养基 ,观察并比较培养基的生长阳性率及保存过程的污染率 ,以确定最佳运输方式、最佳保存温度和最佳保存期限。

儿童羽毛球初学者步法的培养与训练方法研究

羽毛球运动是步法与手法的结合体,步法与手法相互联系相互制约。步法是羽毛球技术的基础,儿童羽毛球初学者正处于打基础的阶段,特别是其优劣直接影响到对以后羽毛球技术的发展。抓好儿童羽毛球初学者的运动训练,是每个基层的首要任务。因此在儿童羽毛球初学者的学习中,要尤其重视步法的培养。

两步培养法提高栅藻的生物量及油脂含量

采用两步法培养栅藻，即在低光强一含氮条件下，培养栅藻至稳定期积累生物量，然后将栅藻转移至高光强-缺氮培养基中积累油脂。结果表明：在低光强-含氮培养基BG11（＋N）条件下，适宜栅藻生长的低光强为2000—2400lx，培养期为10d；转高光强-缺氮培养基BG11（-N）条件下培养，适宜栅藻积累油脂的高光强为6000—6500lx，培养期为6d。利用两步法培养栅藻，其生物量可达（0．957±0．126）g／L，油脂含量可达（23．35±0．2）％。两步法培养栅藻的生物量和油脂含量分别比常规单步法培养（10d）的提高了35．74％和近1倍。

两步法扩增诱导脐血及动员外周血CD34^+细胞来源树突状细胞的比较

为了比较先扩增、后诱导的两步法从脐血(CB)CD34+细胞和动员外周血(MPB)CD34+细胞诱导所得DC的产量及功能,将免疫磁珠分选获得的CB-CD34+细胞和MPB-CD34+细胞用FL、TPO、SCF、GM-CSF等细胞因子先扩增10天,然后加入GM-CSF、IL-4及TNF-α、CD40Ab、PGE2等细胞因子组合诱导获得DC。采用流式细胞仪检测DC表型,混合淋巴细胞培养检测DC刺激异基因T细胞增殖能力,ELISA法检测DC分泌IL-12能力,Transwell板检测DC在次级淋巴组织趋化因子(SLC)介导下的趋化功能。结果表明①扩增10天时CB组、MPB组细胞中CD14+CD1a-细胞含量无显著差异[(40.48±16.85)%vs(28.07±23.19)%,P>0.05]。但由于CB组细胞扩增倍数显著高于MPB组(388.88±84.63倍vs79.67±10.32倍,P<0.01),CB组CD14+CD1a-细胞扩增倍数显著高于MPB组(189.42±25.02倍vs28.74±23.27倍,P<0.01);②TNF-α/CD40Ab/PGE2条件下与TNF-α条件下相比,CB组和MPB组所得DC均表达更高的CD83[分别为(34.52±11.22)%vs(3.70±2.27)%、(36.69±13.36)%vs(7.34±3.364)%,P均<0.01];③CB组与MPB组在TNF-α/CD40Ab/PGE2诱导条件下所得DC均高水平表达CD83、CD86、HLA-DR、CD11c、CD54、CD40,CB组所得CD83+细胞的扩增倍数显著高于MPB组(198.72±117.53倍vs33.95±6.19倍,P<0.01);④CD40Ab/PGE2/TNF-α条件下CB与MPB来源的DC在刺激异基因T细胞增殖、IL-12的分泌[(16.2±4.31)pg/mlvs(13.5±4.1)pg/ml]以及SLC介导的迁移率[(28.09±7.76)%vs(18.5±3·47)%]上均无显著差别(P均>0.05)。结论在两步法培养体系下,CB-CD34+细胞与MPB-CD34+细胞来源的DC具有相同的功能,而前者产量显著高于后者。

红豆杉细胞聚集体悬浮培养生产紫杉醇

建立了中国红豆杉 (Taxuschinensis)细胞聚集体两步法悬浮培养生产紫杉醇的培养体系 .红豆杉细胞于含LH 1g/L ,NAA 0 .1mg/L ,2 ,4 D 0 .5mg/L及 6 BA 0 .8mg/L的细胞聚集体形成的培养基中生长并形成聚集体 ,10d后转入生产培养 ,较大细胞聚集体的生物量比和紫杉醇产量分别较对照组提高了 5 3 .7%和82 .1% ;提高细胞聚集体的生物量比能显著增加紫杉醇产量 .四种基本培养基中B5最适合诱导细胞聚集体的形成 .生长培养 12d后细胞悬浮培养物按 1∶1(体积比 )直接转入生产培养对细胞生长、细胞聚集体和紫杉醇形成最有利 .在 10 0