糖尿病模型小鼠胰腺组织中死亡受体凋亡通路相关因子的表达

目的研究糖尿病模型小鼠胰腺组织中死亡受体凋亡通路中相关凋亡因子表达的变化。方法将小鼠分为对照组(control)和模型组(model),2次腹腔注射四氧嘧啶(120 mg/kg,80 mg/kg),在造模后第3和7天,检测血糖;取胰腺组织,苏木精-伊红染色(HE)观察,原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡率,RT-qPCR检测肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、Fas相关死亡域(FADD)、半胱氨酸蛋白酶-8(caspase-8)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的mRNA表达量。结果与对照组比较,模型组小鼠胰腺腺泡细胞出现颗粒变性,毛细血管充血,胰岛体积减小,胰岛内细胞数量减少。与对照组比较,模型组小鼠胰腺内细胞凋亡率明显增多(P<0.01)。另外,与对照组比较,在3和7天,模型组小鼠胰腺组织内Tnfr1、Fadd、caspase-8和caspase-3 mRNA表达均显著或极显著的增加(P<0.05或P<0.01)。结论四氧嘧啶能够促进糖尿病模型小鼠胰腺组织中Tnfr1、Fadd、caspase-8和caspase-3 mRNA的高表达,进而诱导了胰腺细胞的凋亡。

纳秒脉冲诱导SKOV3细胞凋亡的死亡受体途径分析

ns脉冲电场独特的诱导肿瘤细胞凋亡的生物电效应,引起了相关学者广泛的关注。为此,结合最新研究成果,侧重于ns脉冲对细胞膜结构和功能的影响,重点研究ns脉冲电场诱导肿瘤细胞凋亡的死亡受体途径。将优化的脉冲电场参数组合(电压幅值为9kV,脉宽为100ns,脉冲为30个,频率为1Hz)作用于人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3。利用流式细胞术和凝胶电泳法检测细胞凋亡、坏死情况;逆转录聚合酶链式扩增反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测Fas、FasL、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(cysteine aspartic acid specific protease-8,Caspase-8)和Bid的信使核糖核酸(messager ribonucleic acid,mRNA)释放水平;蛋白质印迹(western blot)法检测Fas、FasL、Caspase-8和Bid蛋白释放水平。实验结果表明:ns脉冲诱导SKOV3凋亡时引起了Fas、FasL、Caspase-8和Bid等释放水平的升高,从而诱导死亡受体凋亡信号通路。该研究结果大大拓展了ns脉冲诱导凋亡的机制研究,从而为临床肿瘤治疗提供理论支撑。

亚硒酸钠对黄曲霉毒素B_1致雏鸡胸腺细胞死亡受体通路活化的缓解作用研究

【目的】探究硒对AFB1致胸腺过度凋亡的缓解机制。【方法】180只1日龄科宝肉鸡随机分为4组,分别饲以对照日粮、AFB1日粮(0.6 mg/kg AFB1)、+Se日粮(0.4 mg/kg Se)和AFB1+Se日粮(0.6 mg/kg AFB1+0.4 mg/kg Se)21 d。【结果】添加硒可缓解AFB1所致的胸腺形态学损伤,适当缓解AFB1导致的T淋巴细胞亚群比例下降和凋亡率升高的现象;与AFB1组相比,AFB1+Se组胸腺TNF-α、caspase-8、caspase-3、caspase-9和JNK1的表达量降低,Bcl-2和t Bid的表达量升高。【结论】添加硒可缓解AFB1致雏鸡胸腺细胞凋亡率升高的机理与死亡受体通路中Fas-Fas L-FADD-caspase8-caspase3途径和Fas-ASK1-JNK-Bcl-2途径受到干预有关。