死亡诱骗受体3对乳腺癌预后及乳腺癌细胞的体外功能的影响

目的观察死亡诱骗受体3(DcR3)对乳腺癌预后的影响和在乳腺癌细胞侵袭功能中的作用。方法通过实时定量聚合酶链反应(PCR)(real-time Q-PCR)进行定量检测包含115例乳腺组织样本的DcR3表达,对应患者随访并分析,中位随访时间10年。通过免疫细胞化学法和RNA提取和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DcR3在乳腺癌MCF7、MDA-MB-231细胞系中的表达,建立DcR3敲除的细胞亚系并验证。通过侵袭和迁移模型观察减少DcR3表达后产生的影响。结果患者分为预后良好组(n=81)和预后不良组(n=26)。预后不良组(133 350±49 646)拷贝/50 ng RNA较预后良好组(5 393±1 428)拷贝/50 ng RNA,P=0.020)DcR3的表达显著增高;病理分级2级的肿瘤较病理分级1级的肿瘤DcR3表达显著升高[(82 844±34 068)拷贝/50 ng RNA(n=39)]与[(5 371±3 500)拷贝/50 ng RNA,n=20,P=0.029]。成功敲除MCF7细胞系和MDA-MB-231细胞系的DcR3基因,DcR3的敲除降低了MCF7细胞的侵袭和迁移能力(P=0.009,P=0.001),但MDA-MB-231细胞系在这两方面的差异无统计学意义(P=0.475,P=0.102)。结论DcR3促进了乳腺癌细胞的侵袭性,在乳腺癌的转移中起到了一定作用,DcR3检测有助于乳腺癌预后判断。

应用ROC曲线评价死亡诱骗受体3对类风湿性关节炎的诊断价值

目的应用受试者工作特征曲线（ Receiver operating characteristics, ROC）分析死亡诱骗受体3（Death decoy receptor3，DcR3）对类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）的诊断价值。方法用亲和素放大的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测33例RA患者、10例硬化征患者及16例正常对照组血清可溶性DcR3浓度，分析不同组间DcR3表达的差异，以及RA患者DcR3与各临床指标的相关性。采用ROC曲线，评价DcR3对RA的诊断效能。结果RA患者DcR3水平显著高于正常对照组（U=158．00，P〈0．05），与硬化征组比较差异无统计学意义（U=121．50，P〉0．05）。RA患者DcR3水平与不同疾病分期（X线分期）、性别、年龄及各临床指标相关性差异无统计学意义（P〉0．05）。通过ROC曲线分析，用DcR3诊断RA的曲线下面积（Area under the ROC CHIVe）为0．701，曲线下95％可信区间（Asymptotic 95％Confidence Interval）为0．553～0．849。最佳临界点为213μg／ml，敏感度为51．5％，特异性为81．2％；阳性似然比为2.75，阴性似然比为0．60。结论RA患者血清可溶性DcR3高表达，对RA具有良好的诊断价值。

Fas和DcR3在垂体腺瘤的表达及FasL与RGD-FasL诱导的细胞凋亡机制

目的研究RGD-FasL诱导垂体腺瘤细胞株GH3、MMQ、AtT20所产生的细胞毒性效应,并探讨其机制。方法应用RT-PCR法和流式细胞仪检测肿瘤细胞上Fas、DcR3的表达。应用MTT测定法检测FasL、RGD-FasL对肿瘤细胞所产生的细胞毒性效应,并经琼脂糖凝胶电泳证实是否为该配体所诱导的凋亡。通过流式细胞仪PI染色法评价细胞周期的变化和凋亡分析。通过Western蛋白印迹法检测Caspase 8、Caspase 9、Caspase 3、Bcl-2、RANKL和JNK2的表达。结果垂体腺瘤细胞株GH3、MMQ、AtT20均表达Fas和DcR3。FasL和RGD-FasL诱导肿瘤细胞所产生的细胞毒性效应均呈现剂量依赖关系。细胞周期分析表明RGD-FasL能诱导细胞周期的停滞。经RGD-FasL或FasL干预的肿瘤细胞的凋亡指数差异不明显。经RGD-FasL干预后,Caspase 8、Caspase 9、Caspase 3、RANKL和JNK2的表达均增加,而Bcl-2的表达减少。结论RGD-FasL能通过Caspase途径诱导垂体腺瘤细胞的凋亡。RGD-FasL的研制很可能为垂体腺瘤的生物靶向治疗提供一种新的途径。

系统性红斑狼疮血清可溶性DcR3水平表达及与临床用药关系探讨

目的:探讨系统性红斑狼疮血清可溶性DcR3(Decoy receptor3)水平表达及与治疗药物的关系。方法:收集SLE患者51例,健康对照组19例,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清可溶性DcR3浓度,采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评判SLE疾病活动性,分析SLE治疗方案中主要用药(泼尼松、环磷酰胺、硫唑嘌呤、羟氯喹、白芍总苷)与血清可溶性DcR3浓度及SLEDAI的关系。结果:SLE患者血清可溶性DcR3浓度显著高于正常对照组(t=2.42,P<0.05),而且与SLEDAI积分呈正相关(r=0.373,P<0.01),SLE治疗方案中使用泼尼松组DcR3浓度比未使用组显著升高(P<0.05),而使用羟氯喹组却显著降低,此外使用泼尼松、环磷酰胺组比不使用组有较高SLEDAI积分。结论:血清可溶性DcR3在SLE中高表达,与SLEDAI呈正相关,治疗药物对血清DCR3浓度影响不明显,可以作为SLE诊断和评判疾病活动度的指标。