微流控芯片技术用于精子与上皮细胞分离的研究

为研究建立使用微流控芯片技术分离精子与阴道上皮细胞的方法,选用制作工艺简单的玻璃-PDMS芯片,对混合样本进行分离。加样前分别在进、出口池中加入7μL和10μL缓冲液,然后在进样口加入2μL混合样本。至少静置8min后,从出口池中取出3μL形成重力驱动的微流体后开始分离,每隔5 min在进样口补加1μL缓冲液。达到理想分离效果时,用移液器从出口池取出分离出的精子,核酸酶去除游离DNA,经过提取、扩增和电泳分离/检测等步骤得到精子的分型结果。结果显示,使用基于重力驱动微流体原理的微流控芯片可在30 min内分离出精子,不会有上皮细胞进入分离通道;通过核酸酶对分离出的精子液的去游离DNA处理,可得到单一、完整的精子分型。与传统的差异裂解法相比,这种方法在很大程度上节省了检验时间,在性侵案件中具有一定的法医物证分析价值。

单管多重QF-PCR体系的构建以及在快速诊断唐氏综合征中的应用

目的唐氏综合征是一种常见的先天性染色体畸变,大部分患者可存活至成年,对患者家庭及社会造成沉重的负担。核型分析法是广泛采用的鉴别唐氏综合征的方法,然而核型分析法需要对所采集的细胞进行培养和处理,所需时间多在2-4w,耗时较长。本文的目的为开发出一种结合STR分型的单管多重QF-PCR体系,用于对唐氏综合征的快速诊断。方法选择多态性较好的STR基因座为构建本体系的基础,通过合成通用引物序列完成体系的构建。结果在使用经染色体核型分析结果确认的检材提取DNA样本验证实验证明,本体系可成功区分出正常个体与唐氏综合征患者个体。结论本体系可用于常规胎儿产前诊断中初步对胎儿染色体核型进行判断,以防止细胞培养失败造成的染色体核型分析失败。