母源性印记基因在牛早期胚胎中的表达

为研究母源性印记基因Magel2、Sgce、SNRPN在牛早期胚胎中的表达规律,初步判定其印记发生的阶段。利用Real-time PCR技术,检测了这3个基因在牛孤雌激活（Parthenogenetic Activation,PA）胚胎和体外受精（In vitro Fertilization,IVF）胚胎中的表达水平。结果表明：在牛IVF和PA 2种胚胎间,3个母源性印记基因的印记表达模式明显不同,Magel2在牛IVF胚胎各阶段都有表达,而在PA胚胎中没有检测到表达信号;Sgce在牛IVF胚胎各阶段都有表达,而只在PA胚胎的2~4细胞阶段检测到表达,在其他发育阶段均没有表达;SNRPN在牛IVF胚胎各阶段都有表达,而只在PA胚胎的2细胞和囊胚阶段检测到很微弱的表达。实验结果表明,母源性印记基因Magel2、Sgce、SNRPN的正常表达对牛早期胚胎发育具有重要作用。

NLRP7基因在母源印记中的研究进展

NOD样受体(nucleotide binding oligomerization domain-like receptors,NLRs)家族在先天性免疫系统中行使着重要功能,与Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)家族相类似,该家族十分保守,不仅在植物中存在,也在哺乳动物体内表达。NLRs家族中有许多亚家族,其中,NLRP7(NACHT,LRR and PYD domains-containing protein7)是NLRP亚家族中的一员,其在多种免疫细胞及免疫器官中表达,可参与细胞生长、增殖和分化过程,在细胞凋亡、炎症反应等生理过程中发挥作用。NLRP7除了在免疫系统中表达外,还在哺乳动物的睾丸、卵巢等生殖系统及早期胚胎中表达,NLRP7的突变通常会导致人类家族复发性葡萄胎疾病的发生,最终导致妊娠失败。近期研究发现,NLRP7是一种母源印记基因,NLRP7异常的印记状态导致了异常的胚胎发育。在猪、牛、羊等大动物中虽然尚未发现葡萄胎疾病,但许多不明原因的流产、死胎等均可能与NLRP7的突变有关。由于进化过程中NLRP7在小鼠等啮齿动物中发生了退化,因此目前有关NLRP7的研究以灵长类为主。作者就近年来NLRP7基因与动物生殖相关的研究进展进行了综述,以期为哺乳动物繁殖障碍等疾病的研究提供参考。

母源性印记基因3抑癌作用机制的研究进展

随着长链非编码RNA的研究热潮，母源性印记基因3（MEG3）作为长链非编码RNA家庭的一员也被广泛关注。MEG3不仅在良性疾病中有所研究，而且在恶性疾病中研究的更多且更为深入。MEG3因其抑癌的独特性在肿瘤研究中备受关注，但其抑癌的具体作用机制及相关途径还未完全明确，仍有待深入的研究与阐明。现本文将MEG3的抑癌作用及相关作用通路归纳总结。

长链非编码RNA MEG3对老年乙型肝炎并发肝硬化和肝纤维化的诊断价值

目的探讨长链非编码RNA母源性印记基因3(lncRNA MEG3)对老年乙型肝炎并发肝硬化和肝纤维化的诊断价值。方法选择2017年9月至2019年11月在沧州市中心医院就诊的60例老年乙型肝炎并发肝硬化和肝纤维化患者作为研究对象,分别设为肝硬化组(n=30)和肝纤维化组(n=30);另选择同期在本院进行手术治疗的30例老年肝血管瘤患者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(real-time qPCR)法检测肝组织中lncRNA MEG3表达水平。采用蛋白质印迹法检测β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)的表达水平。采用Pearson相关系数法进行相关性分析。采用ROC曲线分析肝组织中lncRNA MEG3表达水平对乙型肝炎患者肝硬化和肝纤维化的诊断价值。结果肝纤维化组Ishak评分明显低于肝硬化组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,肝纤维化组、肝硬化组lncRNA MEG3表达水平均降低,β-catenin、Cyclin D1、Cleaved Caspase-3表达水平均升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与肝纤维化组比较,肝硬化组lncRNA MEG3表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。老年乙型肝炎患者肝组织中lncRNA MEG3表达水平与Ishak评分呈负相关(r=-0.365,P=0.004)。lncRNA MEG3诊断肝纤维化的ROC曲线下面积(AUC)为0.930,最佳截断值为13.12,敏感度为86.7%,特异度为93.3%。lncRNA MEG3诊断肝硬化的ROC AUC为0.926,最佳截断值为7.32,敏感度为96.3%、特异度为76.8%。结论lncRNA MEG3在老年乙型肝炎并发肝硬化和肝纤维化患者中的表达水平较高,可作为早期诊断该疾病的生物标志物,并可用于评估患者的疾病严重程度,值得在临床推广应用。

长链非编码RNA在肝癌中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是指长度超过200个核苷酸的非编码RNA,不具有编码蛋白质功能。近年来研究发现,与肝癌有关的lncRNA包括H19、HOC转录反义RNA、肝癌过表达转录本、肺腺癌转移相关转录本1、人母系表达基因3等,其与肝癌的发生、发展关系密切,有望成为新型的肝癌标志物及治疗靶点,在肝癌诊断、预后和治疗方面应用前景良好。

人 MEG3基因质粒载体的构建及其对人胰腺癌SW1990细胞增殖的影响

目的：构建人类母源性印记基因3（MEG3）的真核表达载体，转染得到过表达的人胰腺癌SW1990细胞株，分析 MEG3过表达对 SW1990细胞增殖的影响。方法根据 GenBank 中 MEG3的基因序列，通过化学合成的方法进行全基因合成得到人 MEG3基因全长，将其构建入 pcDNA3.0真核表达载体中，得到 pcDNA3.0-MEG3表达载体，转染胰腺癌细胞 SW1990。采用 RT-PCR 及荧光定量 PCR 技术检测转染细胞中 MEG3基因的表达量。采用 MTT 试剂盒对转染后 SW1990细胞增殖能力的变化进行检测。实验中设转染 pcDNA3.0的 SW1990细胞为阴性对照组，普通 SW1990细胞为空白对照组。结果成功构建了 MEG3真核表达质粒pcDNA3.0-MEG3，并成功转染 SW1990细胞。与两对照组相比，转染后细胞的 MEG3基因表达量显著提高，提高约895倍（F ＝73.592，P ﹤0.01）。MTT 检测结果显示，MEG3基因明显抑制 SW1990细胞的增殖，实验组72 h 时吸光度值为0.81±0.06，与阴性对照组（1.17±0.07）和空白对照组（1.08±0.03）相比，3组差异有统计学意义（ F ＝33.489，P ﹤0.01）。结论本研究成功构建了MEG3真核表达质粒 pcDNA3.0-MEG3，并证实 MEG3基因及其产物对胰腺癌 SW1990细胞增殖有明显的抑制作用。

长链非编码RNA MEG3在肿瘤中的研究

母源性印记基因3（MEG3）是一种肿瘤抑制基因，其转录产物不编码蛋白，属长链非编码RNA。在人类多种肿瘤组织及细胞株中存在MEG3基因表达缺失，DNA甲基化程度升高等机制与之密切相关。研究表明,MEG3基因及其转录产物能够抑制肿瘤细胞增殖，并促进肿瘤细胞凋亡，其抑癌机制与肿瘤抑制基因p53的作用密不可分。