母源性表达基因8在糖尿病视网膜病变中的作用

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)母源性表达基因8(MEG8)在糖尿病(DM)视网膜病变(DR)中的表达情况,并进一步评估MEG8对DR的诊断价值及对DR的调控机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测全部受试者血清中MEG8的表达水平;受试者工作特征(ROC)曲线评估MEG8对DR的诊断价值;CCK-8法和Transwell实验评估MEG8对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)增殖和迁移的影响;荧光素酶报告基因实验验证MEG8与miR-15a-5p的3’-非翻译区(3’-UTR)的相互作用。结果 与对照组比较,DM组的MEG8水平显著增高,DR组的MEG8水平较DM组更高;miR-15a-5p的表达趋势与MEG8相反;MEG8的表达水平与DM病程等指标呈正相关;ROC曲线显示,血清MEG8具有区分DM和DR的能力。高糖诱导后HRMECs的MEG8水平显著增高,且高糖诱导促进HRMECs的增殖和迁移能力。通过细胞转染MEG8小干扰RNA下调胞内MEG8水平后,HRMECs的增殖和迁移均受到不同程度的抑制作用;荧光素酶报告基因实验证实,MEG8直接靶向miR-15a-5p, miR-15a-5p的水平与MEG8的水平呈显著负相关。结论 MEG8在DR患者中失调,ROC曲线显示MEG8对DM和DR有区分价值。体外DR细胞模型可见,过表达的MEG8通过靶向调控miR-15a-5p,对高糖诱导的HRMECs的增殖和迁移产生促进作用。初步证实MEG8可能参与对DR的调控。

结肠癌组织中MEG8、TGM2 mRNA的表达变化及其意义

目的观察结肠癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)母源性表达基因8(MEG8)、转谷氨酰胺酶2(TGM2)mRNA的表达变化,并探讨其意义。方法采用实时荧光定量PCR法检测85例份结肠癌组织及其癌旁正常组织MEG8、TGM2 mRNA,分析两者间及其与结肠癌临床病理参数、患者预后的关系。结果结肠癌及其癌旁正常组织MEG8 mRNA相对表达量分别为0.62±0.23、1.87±0.55,TGM2 mRNA相对表达量分别为2.03±0.95、0.98±0.36,两者比较,P均<0.05。MEG8、TGM2 mRNA表达均与结肠癌TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。结肠癌组织中MEG8 mRNA和TGM2 mRNA表达呈显著负相关(r=-0.798,P<0.05)。MEG8 mRNA高表达者5年总生存率为77.78%(35/45)、生存时间为(43.62±8.31)个月,低表达者分别为52.50%(21/40)、(31.07±7.25)个月,两者比较,P均<0.05;TGM2 mRNA高表达者5年总生存率为54.55%(24/44)、生存时间为(37.21±9.68)个月,低表达者分别为78.49%(32/41)、(49.18±8.76)个月,两者比较,P均<0.05。结肠癌患者预后Cox回归模型分析显示,高级别TNM分期、有淋巴结转移、MEG8 mRNA低表达、TGM2 mRNA高表达是影响结肠癌患者预后的危险因素(P均<0.05)。结论结肠癌组织中MEG8 mRNA呈低表达,TGM2 mRNA呈高表达,两者表达均与TNM分期、淋巴结转移有关,检测两指标有助于评估疾病病情及患者预后。

牙鲆FEL1基因的表达及功能分析

凝集素(Lectin)是一类能与糖进行非共价可逆结合的蛋白质,具有凝集细胞和聚糖的作用。在牙鲆的集约化养殖过程中,会面临许多病原微生物的入侵,造成大量的经济损失,研究表明鱼卵凝集素(Fish egg lectin)是凝集素超家族中的一员,在硬骨鱼的抗菌免疫反应中发挥作用。在本研究中,克隆验证了牙鲆FEL1基因(Fish egg lectin 1,PoFEL 1),其中开放阅读框(Open reading frame,ORF)为675 bp,编码224个氨基酸,蛋白分子量为24.8 kDa。PoFEL 1组织表达分析显示,PoFEL 1在卵巢、肠以及肝脏中的表达量比较高;胚胎发育过程中PoFEL 1表达分析显示,在胚胎发育的早期PoFEL 1的表达量比较高,随着胚胎的逐渐成熟,其表达量逐渐降低,呈母源性表达。体外细胞刺激实验表明LPS、PGN、Poly(I∶C)和E.tarda刺激牙鲆卵巢细胞系后,PoFEL 1的表达上调。利用牙鲆卵巢细胞研究了PoFEL 1蛋白的亚细胞定位,证实其分布在细胞质中。用LPS刺激过表达PoFEL 1的牙鲆卵巢细胞系,发现细胞因子p38、IL-6和TNF-α的表达显著上调。通过双荧光素酶检测系统发现,过表达PoFEL 1能显著上调NF-κB报告基因的表达,从而引起机体的免疫应答,说明PoFEL 1对NF-κB通路可能具有调节作用。以上研究结果说明PoFEL 1在牙鲆先天性免疫过程中发挥作用。

MEG8、TGM2在胃癌组织中的表达及临床意义

背景胃癌(gastric cancer, GC)是常见恶性肿瘤之一,发病率、死亡率均排在全国、乃至全世界前列,是影响人类健康的重要问题.目前仍缺乏GC早期诊断、治疗及GC预后相关的基因靶点.目的探讨母源性表达基因8(maternally expressed gene 8,MEG8)及转谷氨酰胺酶2(transglutaminase2,TGM2)在GC组织中的表达及临床意义.方法通过荧光定量聚合酶链式反应检测30对GC及癌旁组织中MEG8、TGM2表达情况,分析表达情况与GC患者临床病理特征相关性,通过摘录Oncomine数据库中相关研究数据,分析TGM2表达差异性及与GC患者的生存状态的相关性.结果MEG8在GC组织中的表达量低于癌旁组织(0.462±0.082 vs 1.048±0.149), TGM2在GC组织中的表达量高于癌旁组织(1.202±0.143 vs 0.742±0.083),差异具有统计学意义(P <0.05);MEG8表达与年龄、临床分期有关(P<0.05), TGM2表达与临床分期有关(P <0.05);T G M2表达高低与G C患者生存状态无关(P>0.05).结论MEG8、TGM2参与GC的发生发展过程,可作为GC诊断及预后的潜在靶点.