胚胎着床期间母-胎对话研究进展

哺乳动物胚胎着床时,母体和胚胎之间进行精密的分子对话和信号交换,以使两者达到协调。母体和胚胎来源的类固醇激素、生长因子、细胞因子、整合素等在胚胎着床及母体妊娠识别过程中发挥着重要的作用,使母体-胎儿间形成一个紧密联系的对话体系。综述了胚胎着床过程中母-胎对话的研究进展。

母-胎界面滋养细胞自噬诱发胎盘植入的研究进展

自噬是一种维持真核细胞体内稳态的催化过程,主要将受损大分子和细胞质成分降解,为细胞合成提供新的构建物质。越来越多的研究表明,自噬在平衡免疫和炎症方面发挥关键作用,特别是源自胚胎的绒毛外滋养细胞,在与胚胎母体接触的过程中与其他细胞进行交互对话,影响胚胎的发生、植入和妊娠维持。在母-胎界面中,自噬表达与滋养细胞的存活、侵袭以及抗病毒等生物学功能密切相关,异常表达将导致一系列病理状态,其中滋养细胞作为胎盘的主要成分,过度侵袭是发生胎盘植入的主要因素。本文对近年来母-胎界面滋养细胞自噬诱发胎盘植入的研究进行综述。

母-胎免疫调节机制在妊娠高血压综合征病理过程中的作用

目的:分析妊娠高血压综合征(PIH)患者外周血中免疫细胞因子水平变化及滋养层细胞中免疫相关转录因子的基因、蛋白表达情况,探讨母-胎免疫调节机制在妊娠高血压综合征病理过程中的作用。方法:纳入PIH患者50例作为观察组,选择同期分娩的正常妊娠妇女40例作为对照组。ELISA法检测两组孕妇外周血中IFN-γ、IL-4、IL-17及TGF-β水平;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法和蛋白质印迹法(Western blot)分别测定两组孕妇胎盘滋养层细胞中转录因子T-bet、GATA-3、RORC、Foxp3的mRNA及蛋白表达情况。结果:(1)观察组外周血中IFN-γ和IL-17水平明显高于对照组,TGF-β水平明显低于对照组(P<0.05);两组间IL-4水平无明显差异(P>0.05);观察组IFN-γ/IL-4、IL-17/TGF-β比值均明显大于对照组(P<0.05)。(2)与对照组比,观察组T-bet、RORC的mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而GATA-3、Foxp3的mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),T-bet/GATA-3及RORC/Foxp3比值均显著增大(P<0.05)。结论:PIH具有明显的Th1/Th2及Th17/Treg比例失衡现象,其病理机制可能与Th细胞介导的母-胎免疫耐受机制功能紊乱有关。

CD86协同刺激信号在孕早期母-胎界面Th1/Th2型细胞因子表达调控中的作用

目的 :探讨CD86协同刺激信号在孕早期母 胎界面Th1 Th2型细胞因子表达调控中的作用。方法 :建立正常妊娠模型CBA×Balb c和自然流产模型CBA×DBA 2。于孕第 4、6、8、10天给CBA孕鼠腹腔注射大鼠IgG作为对照组 ;仅于孕第 4天或于孕第 4、6、8、10天给CBA孕鼠腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb。孕第 14天计算两种模型各实验组胚胎吸收率R。ELISA法测定孕第 9和第 14天各实验组母 胎界面组织体外培养上清中Th1 Th2型及相关细胞因子 (IL 2、IFN γ、TNF α、IL 4、IL 10、TGF β2 )表达水平。 结果 :孕早期干预CD86协同刺激信号 ,对正常妊娠模型母 胎界面孕第 9和第 14天IL 4、IL 10、TGF β2以及IFN γ、TNF α表达均无显著影响 ,其胚胎吸收率亦无显著变化。自然流产模型中 ,孕早期干预CD86协同刺激信号后 ,孕第 9、第 14天母 胎界面IL 4、IL 10、TGF β2表达均显著增加 (P <0 0 5 ) ;而IFN γ、TNF α表达显著下降 (P <0 0 5 )。胚胎吸收率亦显著下降 (P <0 0 5 )。结论 :孕早期母 胎界面CD86协同刺激信号的调节紊乱可能是触发母体对胚胎产生免疫排斥的重要病理因素 ,于孕早期干预CD86协同刺激信号能够恢复母 胎界面Th1型 Th2型免疫调节的生理平衡 ,从而诱导母 胎免疫耐受。

中药联合淋巴细胞主动免疫治疗母-胎免疫识别低下型复发性流产的meta分析

目的:评价中药联合主动免疫对母-胎免疫识别低下型复发性流产的治疗效果。方法:全面检索中国知网全文期刊数据库、万方数据库、重庆维普中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库,收集中药联合主动免疫与单纯主动免疫比较对母-胎免疫识别低下型复发性流产治疗效果的随机对照试验,对资料进行评价并用Revman 5.2进行meta分析。结果:符合纳入标准的研究有10例共763个患者。Meta分析结果显示中药联合主动免疫的妊娠成功率高于单纯主动免疫组(OR 3.31,95%[2.29,4.78],P<0.00001),差异有统计学意义。结论:中药联合主动免疫治疗母-胎免疫识别低下型复发性流产与单纯主动免疫相比妊娠成功率提高。

复发性自然流产育龄期妇女母-胎界面中细胞因子表达分析

目的:分析复发性自然流产(RSA)育龄期妇女母-胎界面中相关细胞因子表达水平变化。方法:连续选择近期就诊的RSA育龄期妇女21例,收集流产蜕膜组织,采用酶联免疫吸附法进行蜕膜组织液中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ浓度等指标检测,并与同期早孕并行人工流产终止妊娠妇女(对照组,20例)相同测试结果比较。结果:RSA组蜕膜组织液IL-2和IFN-γ浓度均明显高于对照组,而IL-4和IL-10浓度则显著低于后者(P均<0.01)。结论:RSA育龄期妇女母-胎界面上存在着明确的Th1优势状态表达。

干预CD86协同刺激信号诱导母-胎界面Th2型免疫偏离及其对妊娠预后的影响

目的 :探讨干预CD86协同刺激信号在母 胎界面Th1 Th2型细胞因子表达调控及诱导母 胎免疫耐受中的作用。方法 :将正常妊娠模型CBA×BALB C和自然流产模型CBA×DBA 2的CBA孕鼠均分为 3组 :对照组于孕第 4、6、8、10天腹腔注射大鼠IgG ;A组于孕第 4、6、8、10天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb ;B组仅于孕第 4天 (着床期 )腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb。孕第 9天 ,竞争性半定量RT PCR测定各组母 胎界面Th1 Th2型细胞因子转录水平 ;孕第 9、14天ELISA测定母 胎界面组织培养上清IL 4 IFN γ比值 ;孕第 14天比较两种模型各组的胚胎吸收率R。结果 :正常妊娠模型中 ,干预CD86协同刺激信号对母胎界面原有Th2型免疫偏离及妊娠预后均无显著影响。自然流产模型中 ,干预CD86协同刺激信号能够诱导母胎界面局部形成Th2型免疫偏离并显著改善其妊娠预后。结论 :于孕早期干预CD86协同刺激信号能够恢复母 胎界面局部Th1型 Th2型细胞因子表达的生理平衡 ,形成维持正常妊娠所需的Th2型免疫偏离 ,诱导母 胎免疫耐受。

色氨酸对哺乳动物母-胎界面的免疫调节作用及其机制

近年来,一些研究发现氨基酸对提高母猪繁殖能力具有重要的作用。少量的体内和体外试验研究表明,色氨酸及其代谢物能够提高母猪繁殖能力,降低流产率。本文综述了色氨酸及其犬尿氨酸代谢对哺乳动物(主要是猪和鼠)母-胎界面免疫调节(或免疫耐受)的影响,以及色氨酸及其代谢物(如犬尿氨酸和3-羟基犬尿氨酸)对哺乳动物母-胎界面蜕膜自然杀伤(dNK)细胞、调节性T细胞(Treg)和17型辅助性T细胞(Th17)的调控作用以及可能的作用机制。

母-胎界面免疫耐受微环境的分子信息传导机制

成功妊娠意味着母体免疫系统对胚胎抗原的免疫耐受；作为同种移植物的胎儿能够在母体内存活，直至分娩而未被母体排斥，是免疫学原理的唯一例外。母-胎界面是这一免疫耐受过程的核心部位，在母胎免疫调节中的作用已受到生殖免疫学乃至免疫学领域的广泛重视。母-胎界面Th2型免疫优势，及凋节性T细胞扩增是母-胎免疫耐受及成功妊娠的标志。

母-胎界面交互对话介导母-胎免疫耐受

生理妊娠类似于胚胎作为移植物的同种异体移植。母-胎界面介导胚胎移植物与母体的交互作用,而这种细胞间交互作用在形成母-胎免疫耐受方面起着重要作用。胚胎通过滋养层细胞直接与母体交互对话,同时也诱导并调节蜕膜免疫细胞对于胚源性抗原的耐受,以此来维持妊娠的顺利进行。

流式细胞术产前非侵入性定量检测胎-母出血的研究

目的 建立产前非侵入性定量检测RhD阴性孕妇胎 母出血的流式细胞术实验方法。方法 RhD阴性红细胞与RhD阳性红细胞按一定比例混合 ,用抗 D作为一抗结合D+ 红细胞 ,以羊抗人IgGF(ab′) 2 FITC作为二抗 ,连接抗 D ,应用流式细胞术检测D+ 红细胞占D-红细胞的比例 ,建立抗 D及抗人IgGF(ab′) 2 FITC的量效关系 ,确定两者最佳使用剂量。在此实验条件下 ,进行流式细胞术检测值与实际值的相关性分析 ,判定可以检测出的D-红细胞中混有D+ 红细胞的准确出血量范围 ,应用建立的流式细胞术方法测定 9例RhD阴性孕妇外周血中的胎 母出血量。结果 抗 D的有效使用剂量为 1∶4 0 0稀释 ,10 0 μl/5× 10 6细胞 ;羊抗人IgGF(ab′) 2 FITC的有效使用剂量为 2 5 μg/5× 10 6细胞 ;流式细胞术测定比例与已知实际比例的相关系数r =0 998;准确检测的胎 母出血量为 (0 .6～ 30 )ml。 9例RhD阴性孕妇外周血中除 2例未检出D+ 细胞而无法判断外 ,其余 7例均检测出胎 母出血 ,胎 母出血量为 (1.2～ 6 .4 8)ml。结论 针对孕期发生胎 母出血反应的RhD阴性孕妇 ,可以应用流式细胞术方法在产前准确无损伤地定量检测胎 母出血量 ,指导临床预防。

IL-22在人早孕期母胎免疫界面中表达的研究

目的通过检测白细胞介素-22(IL-22)在人早孕期母胎界面的表达,探讨其可能的作用。方法采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)检测正常早孕妇女及正常非孕育龄期妇女外周血、正常早孕妇女蜕膜组织及正常非孕育龄期妇女子宫内膜组织中IL-22的表达情况。结果早孕妇女外周血IL-22表达(105.33±6.61)pg/ml,显著高于正常非孕育龄期妇女外周血(84.71±6.73)pg/ml。与正常非孕育龄期妇女子宫内膜组织IL-22表达水平(86.02±7.79)pg/ml相比,早孕妇女蜕膜组织IL-22表达(109.98±6.87)pg/ml,显著增加。结论IL-22可能参与了正常妊娠母胎免疫耐受的建立和维持。

四分子交联蛋白-5在母-胎界面表达与不明原因妊娠丢失相关性

目的检测四分子交联体蛋白5(Tspan-5)在母-胎界面中的表达情况,探讨该蛋白在胚胎种植中的作用,分析其与自然流产的相关性。方法观察组选择2018年1月至2020年1月就诊于广东省第二人民医院的稽留流产患者37例。对照组选取年龄和孕周相匹配的正常早孕患者及未妊娠育龄期女性。应用免疫组化法检测Tspan-5在绒毛、蜕膜及子宫内膜中的表达情况。结果Tspan-5在自然流产绒毛中表达水平显著低于正常早孕组,在自然流产蜕膜中表达水平却高于正常早孕组。Tspan-5在未妊娠月经期子宫内膜未见表达,而增生期、分泌期子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞可见表达;正常早孕蜕膜中Tspan-5表达水平略高于增殖期、分泌期子宫内膜,但差异无统计学意义(F=1.26,P=0.296)。结论Tspan-5在自然流产绒毛中表达水平下降,滋养细胞侵袭不足可能与自然流产的发生有关。母胎界面中Tspan-5表达异常与胚胎种植失败或妊娠丢失相关。

中药干预母-胎免疫耐受异常机制研究进展

不明原因复发性流产由于其病因、发病机制不明,故现无明确诊疗方法,目前已成为世界性疑难病症。然而近年来由于生殖免疫学的发展,国内、外多项研究结果发现本病可能与母-胎免疫耐受异常密切相关。中药在防治复发性流产方面具有确切疗效;而本文将近五年来中药通过干预母-胎免疫耐受的相关机制作简要综述,以期为不明原因复发性流产的中药防治提供理论依据。

TGF-β超家族信号在复发性流产中的研究进展

复发性流产(recurrent spontaneous abortion, RSA)是一种复杂的妊娠并发症,在育龄夫妇中发生率逐年升高,严重危害全世界女性的生殖健康。RSA的病因复杂,目前研究认为与基因表达异常、免疫失调、内分泌改变等因素密切相关,而临床上尚缺乏RSA早期诊断标志物和个体化的精准治疗策略。因此,探索RSA发病的分子机制并寻找早期、高效的诊断和干预靶点具有重要的临床意义。研究认为TGF-β超家族参与妊娠早期母体-胚胎界面多种细胞生物学活动,如细胞分化、增殖、黏附、侵袭和凋亡,与RSA密切相关。本文对TGF-β超家族相关分子和信号通路在RSA中影响滋养细胞侵袭和子宫内膜蜕膜化进行综述。

大豆异黄酮对先兆流产模型大鼠的保胎作用及机制研究

目的 研究大豆异黄酮对先兆流产大鼠的保胎作用及可能机制。方法 取雌鼠促情,与雄鼠交配、妊娠后随机分为正常组(纯化水灌胃,n=10)、模型组(纯化水灌胃,n=9)、阳性对照药组(黄体酮4 mg/kg,肌内注射,n=9)和大豆异黄酮低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg灌胃,n=10)。除正常组外,其余各组大鼠均于孕8 d以米非司酮+米索前列醇灌胃建立先兆流产模型。各组大鼠分别于孕1~7 d、孕9~12 d给药/纯化水,每天1次。孕14 d时,计算各组大鼠的保胎率,检测大鼠血清中β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮(P)水平,观察大鼠胎盘与蜕膜组织病理形态学变化并检测其细胞凋亡指数,检测胎盘组织中凋亡相关因子(Fas)、凋亡相关因子配体(FasL)、增殖细胞核抗原(PCNA)和肝素结合表皮生长因子(HB-EGF) mRNA及其蛋白表达,检测蜕膜组织中Fas、PCNA和HB-EGF mRNA及其蛋白表达。结果 模型组大鼠胎盘组织充血扩张明显,血管较少且形态不规则,可见大量严重基质水肿、炎症细胞浸润和铁胆黄素沉积。与模型组比较,大豆异黄酮各剂量组大鼠的保胎率,血清β-HCG、P水平,胎盘与蜕膜组织中PCNA、HB-EGF mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),病理学变化显著改善;胎盘与蜕膜组织细胞凋亡指数,胎盘组织中Fas、FasL mRNA及其蛋白表达水平,蜕膜组织中Fas mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),且大豆异黄酮的上述作用呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 大豆异黄酮对先兆流产模型大鼠有保胎作用;其作用机制可能与下调母-胎界面Fas、FasL mRNA及其蛋白表达,上调PCNA、HB-EGF mRNA及其蛋白表达有关。

过继转输的胚胎抗原耐受T、B细胞在受体孕鼠体内的归巢和分析

目的 :观察过继转输的胚胎抗原耐受T、B细胞在受体孕鼠体内的归巢和分布 ,以探讨免疫耐受T细胞在诱导受体母 胎免疫耐受中的作用机制。方法 :于孕 4天 (着床期 )给小鼠自然流产模型CBA J×DBA 2孕鼠腹腔注射抗CD80和CD86mAb ,以诱导母 胎免疫耐受。孕 9天应用免疫磁珠分选孕鼠脾脏T、B细胞 ,并用CFSE体外荧光标记。将标记的T、B细胞分别转输至孕 4天的CBA J×DBA 2孕鼠 ,36小时后在双光子共聚焦显微镜下观察T、B细胞在受体体内脾脏、子宫引流淋巴结及母 胎界面组织中的分布。结果 :过继转输的T、B细胞分布在孕鼠体内脾脏和子宫引流淋巴结 ,但并不留驻在母 胎界面。结论 :过继转输的胚胎抗原耐受T细胞定居于外周免疫器官 ,从而介导受体孕鼠对相应父系抗原的免疫耐受。

人早孕期蜕膜基质细胞对蜕膜NK细胞分泌IL-22的调节作用

目的:探讨蜕膜基质细胞(Decidual stromal cells,DSCs)与蜕膜NK细胞(dNK)共培养后IL-22的分泌水平。方法:收集早孕蜕膜组织,分离蜕膜基质细胞(DSCs)及蜕膜免疫活性细胞(Decidual immunocytes,DICs),磁珠分选蜕膜CD56brightCD3-NK细胞,再与DSC按不同比例直接接触共培养(dNK∶DSC为1∶1、1∶2、1∶3)24小时,收集上清。ELISA检测上清中IL-22的表达。结果:与对照组相比,DSC能上调dNK分泌IL-22。结论:蜕膜基质细胞可以促进蜕膜NK细胞分泌IL-22。