单增李斯特菌毒力因子及调控机制研究进展

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰氏阳性食源性致病菌,能在低温、高温、高渗透压等多种不利条件下生长存活。在宿主体内,单增李斯特菌首先寄生于胃肠道,随后穿过肠道屏障,再通过血液传播到靶器官引发系列疾病,整个过程与单增李斯特菌独特的毒力因子及调控机制密切相关。该文首先回顾整理了单增李斯特菌在感染期间关键毒力因子的主要作用及目前新进展,介绍了毒力调控因子(Prf A)和转录调控因子(σ~B),着重讨论了调控因子在宿主外环境和内环境的相互作用,最后对目前新的毒力调控因子进行归纳总结,为全面理解单增李斯特菌的感染机制和进一步开展精准防控提供一定参考。

全基因组测序分析生畜肉中沙门氏菌血清型、耐药性与毒力因子

了解市售生畜肉中沙门氏菌(Salmonella)血清型、序列型(sequence typing,ST)分布、耐药性和毒力因子特征,探讨ST与耐药性和毒力的关系。收集2020—2023年从生畜肉中分离的68株沙门氏菌,用血清凝集法鉴定其血清型,微量肉汤稀释法进行药物敏感检测;全基因组测序分析多位点序列分型、耐药基因与毒力因子,并结合系统发育树分析其相关性。结果表明:68株沙门氏菌可分为14种血清型,以鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌为主,ST以ST19、ST34和ST11为主;多重耐药菌株占比69.12%(47/68),对氨苄西林(76.47%)、四环素(55.88%)和萘啶酸(52.94%)耐药率较高;68株沙门氏菌均携带菌毛吸附相关因子、镁离子转运相关因子、非菌毛类吸附相关因子、调控相关因子和分泌系统相关因子;生畜肉中污染的沙门氏菌血清型种类多样,耐药性严重且携带多种毒力因子,需要加强畜类养殖和生产销售的管理。

山羊肺源肠外致病型大肠杆菌和粘质沙雷氏菌混合感染的病原分离鉴定、毒力因子基因检测和耐药性分析

为了确定1例成年山羊突然急性死亡的原因,本试验采用病史调查、病理剖检、病原菌分离和鉴定明确细菌性病原,对分离菌进行致病性试验和药敏试验,并根据药敏试验结果对其余未发病山羊进行给药预防;对分离到的大肠杆菌进一步进行系统进化群分析和毒力因子基因检测。结果显示,死亡山羊剖检可见部分结肠肠段严重出血,心内膜有散在出血斑,瘤胃黏膜局部充血;从肺组织中分离获得大肠杆菌和粘质沙雷氏菌;致病性试验结果显示,大肠杆菌对小鼠的致死率为90%,粘质沙雷氏菌对小鼠无致病性;药敏试验结果显示,大肠杆菌对头孢曲松和丁胺卡那敏感,粘质沙雷氏菌对恩诺沙星、丁胺卡那、庆大霉素和磷霉素中度敏感;使用头孢噻呋钠和恩诺沙星注射液对其余未发病山羊进行预防性注射给药后,未再出现发病死亡。系统进化群分析显示,分离获得的大肠杆菌属于A群;毒力因子基因检测结果显示,该大肠杆菌携带2种毒力标记基因(afa和iutA),因此属于肠外致病型大肠杆菌,该菌还携带其他毒力因子基因(ompA、ompT、traT、iss、iroN、iucD、fimH和gafD);本试验结果可为山羊大肠杆菌和粘质沙雷氏菌混合感染的诊断和治疗提供参考。

牙龈卟啉单胞菌:从毒力因子到疫苗研发

牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是革兰氏阴性口腔致病菌之一,其定植于牙龈内厌氧菌生物膜中,引起局部牙周炎。Pg由定植的牙龈局部通过体液扩散到全身引起多种疾病,如:心脑血管疾病、自身免疫性疾病、阿尔兹海默症、癌症等。药物难以到达牙龈部位且持续给药易引起菌体的耐药,不能达到根除的效果。因此,选择合适的抗原位点刺激机体免疫系统产生中和抗体是疫苗研究的关键。本文对Pg的致病及其机制进行了概括,并全面综述了相关的毒力因子,为清除和预防Pg感染提供靶标,同时从疫苗学角度评价和分析这些毒力因子作为疫苗的潜力。

幽门螺杆菌毒力因子及其诱发胃癌作用机制研究进展

幽门螺杆菌(Hp)属于革兰阴性菌,可以在人胃内存活并定植。Hp能够利用其毒力因子调节宿主炎症反应,破坏胃黏膜,其感染的长期结局包括胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等恶性肿瘤,是与胃癌相关的Ⅰ类致癌物。与Hp生存相关的毒力因子主要是脲酶,在脲酶的帮助下,Hp可以在pH值极低的胃内生存,形成持久感染;与Hp定植相关的毒力因子包括外部炎症蛋白A、Hp外膜蛋白Q、血型抗原结合黏附素,这些毒力因子与宿主胃上皮细胞相互作用,帮助Hp在胃黏膜定植,增加癌前病变及胃癌发生风险;与Hp致病相关的毒力因子包括细胞毒素相关基因A、空泡细胞毒素、外膜囊泡、γ-谷氨酰转肽酶、高温需求蛋白A等,Hp在胃上皮细胞存活、黏附并成功定植后,上述毒力因子进一步诱导炎症反应,促进细胞增殖、侵袭和转移,促使胃部炎症向胃癌转化。深入研究Hp毒力因子诱导胃癌发生的机制,有助于为胃癌的诊断和治疗提供新思路和方法。

一株群体感应抑制活性链霉菌的筛选鉴定及其毒力因子代谢能力分析

【目的】挖掘干旱区放线菌天然产物代谢潜力,筛选群体感应抑制活性的产物,研究其对梨火疫病原菌毒力因子代谢能力的影响。【方法】利用紫色杆菌(Chromobacterium violaceum 026,CV026)群体感应抑制活性筛选模型,对新疆库木塔格沙漠周边干旱地区土壤中分离的放线菌进行发酵,采用牛津杯法对其发酵液进行活性筛选;鉴定群体感应抑制活性菌株及验证其发酵液提取和活性,分析粗提液对欧文氏菌毒力因子代谢影响,并采用液质联用(liquid chromatography and mass spectrometry,LC-MS)方法检测菌株代谢产物活性物质,挑选相似结构化合物验证群体感应抑制活性。【结果】获得一株具有明显群体感应抑制活性菌株K-9,其与Streptomyces rubradiris strain NBRC 14000 T相似性达到99.72%。该菌发酵粗提液具有明显的群体感应抑制活性,可有效降低紫色杆菌CV026产紫色素和梨火疫病原菌的游动能力,并对梨火疫病原菌生物膜、胞外多糖和胞外酶等毒力因子产生具有显著抑制活性,呈明显的浓度依赖性;从链霉菌K-9粗提液中得到635种化合物,苯基丙烯酸、4-羟基-3甲氧基苯甲酸等5种明显群体感应抑制化合物。【结论】干旱区放线菌K-9为Streptomyces rubradiris,其发酵代谢产物具有明显群体感应抑制活性,能显著抑制欧文氏菌毒力因子的产生,并发现了多种新型的群体感应抑制活性化合物。

宁夏部分地区犊牛腹泻样本大肠杆菌分离菌株的毒力因子检测与分析

旨在调查宁夏地区犊牛腹泻性大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)流行情况及毒力因子流行特点。对宁夏地区共采集332份腹泻犊牛直肠粪便进行病原分离,利用PCR方法对156株大肠杆菌分离株进行13种相关毒力基因检测。结果共分离出156株大肠杆菌(46.99%),共检出136株含有毒力因子的大肠杆菌,表明目前宁夏地区腹泻犊牛大肠杆菌阳性率较高,毒力因子组合复杂,优势毒力因子为irp2。

近平滑念珠菌临床分离菌株毒力因子差异表达研究

目的比较近平滑念珠菌临床分离株毒力相关因子天冬氨酸蛋白酶和生物膜形成及其基因表达的差异。方法采用基因测序及微卫星分型方法,对临床真菌感染患者分离的近平滑念珠菌进行鉴定,检测各菌株产生分泌型天冬氨酸蛋白酶及生物膜形成的能力,比较各菌株生物膜形成相关基因BCR1、EFG1、HWP1及天冬氨酸蛋白酶毒力基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达的差异。结果共收集8株临床分离的近平滑念珠菌,经基因鉴定均为基因Ⅰ型。微卫星分型结果显示,8株临床菌株分为4个微卫星型别,G1、G2、G3菌株为不同型别,分别分离自甲患者的尿、经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)和血;J1、J2、J3、J4、J5菌株为同一型别,分离自乙患者不同时期血标本。8株临床菌株均能形成生物膜,生物膜形成能力均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,其中G1、G3和J5菌株生物膜形成能力强,J1、J2、J3、J4菌株生物膜形成能力中等,G2菌株生物膜形成能力弱。8株临床分离菌株均分泌天冬氨酸蛋白酶,酶体外表达水平均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,G3、G1、G2菌株分别为低表达、中表达、高表达,酶体外表达水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);J1、J5菌株为中表达,J2、J3、J4菌株为高表达,中表达菌株与高表达菌株比较,差异有统计学意义(P<0.05)。甲、乙患者分离的各菌株生物膜形成基因BCR1、EFG1、HWP1表达水平均增加,其中甲患者G1菌株EFG1基因表达水平高于G2菌株(P<0.05),乙患者分离的菌株BCR1、EFG1、HWP1基因表达水平差异无统计学意义。甲、乙患者分离的各菌株天冬氨酸蛋白基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达水平均增加,其中G1菌株的SAPP1和SAPP2表达水平高于G2、G3(均P<0.05),乙患者SAPP1、SAPP2、SAPP3基因表达水平差异无统计学意义。结论近平滑念珠菌临床分离株生物膜形成和天冬氨酸蛋白酶产生能力均高于标准菌株,分离自不同标本的菌株毒力因子表达具有差异性,不同时期分离的菌株毒力因子表达差异不明显。患者可能存在同一时期多部位感染不同MT型别近平滑念珠菌的情况。

肺炎克雷伯菌耐药机制和毒力因子研究进展

肺炎克雷伯菌是寄生于人和动物的皮肤、呼吸道、肠道等处的机会致病菌,具有较高的致病性,常引起呼吸系统、泌尿系统等感染,甚至出现败血症、脑炎等。肺炎克雷伯菌可分为经典肺炎克雷伯菌(cKP)与高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP),hvKP能导致更严重、散播性更强的感染。目前,肺炎克雷伯菌的耐药性增强,耐药菌株的流行呈全球性和多样化的趋势,已引发关注。除了外排泵,肺炎克雷伯菌对抗菌药产生耐药性的机制有很多种,并且可以随着可移动遗传元件快速传播。本文详细阐述了肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、替加环素、多黏菌素等抗菌药物的耐药机制。肺炎克雷伯菌的毒力因子多样,包括荚膜、脂多糖、黏附素、PEG-344、铁载体(肠杆菌素、沙门菌素、耶尔森菌素、气杆菌素)、外膜蛋白等。目前,对肺炎克雷伯菌的致病性和耐药性的研究越来越深入,在治疗方面也不断推进,主要的策略包括老药新用、纳米化抗菌药、新型抗菌药研发、噬菌体疗法、抗体疗法等。对肺炎克雷伯菌耐药机制、毒力因子进行详细、全面的综述,可为肺炎克雷伯菌的防控和临床用药提供参考。肺炎克雷伯菌的生物学特性、精准诊断、与宿主不同组织细胞的互作机制、宿主免疫应答机制等方面仍需深入研究。

杀鱼爱德华氏菌新型毒力因子研究进展

杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida,又称迟缓爱德华氏菌),可感染多种重要水产养殖动物,对全球水产养殖业造成巨大经济损失。杀鱼爱德华氏菌具有很强的环境适应性与抗逆性,通过典型的胞内寄生引发严重感染,为研究水产致病菌毒力机制的模型菌株。除T3SS/T6SS系统等典型毒力因子外,近年来又在杀鱼爱德华氏菌中鉴定出众多新型毒力因子。本文主要综述了杀鱼爱德华氏菌一些新型毒力因子(如逃逸宿主免疫杀伤因子、毒素-抗毒素、硫氧还蛋白和蛋白酶类等)以及新型毒力调控因子的研究进展,可为研究该菌致病性提供参考。

水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜及其毒力因子的影响

目的:探究水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜及其毒力因子的影响。方法:采用结晶紫染色法检测水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜形成的抑制及清除作用,MTT染色法探究水飞蓟素对其生物膜代谢的影响,冻干血浆和无菌脱纤维羊血探究水飞蓟素对其凝固酶表达和溶血活性的影响,同时用光学显微镜观察不同浓度水飞蓟素对其生物膜影响及傅里叶红外分析细菌成分变化。结果:水飞蓟素对S.aureus ATCC25923的最小抑菌质量浓度(MIC)为0.5 mg/mL,MIC浓度下的水飞蓟素对S.aureus ATCC25923生物膜的抑制率达到90%,清除率达到89.2%,且低剂量的水飞蓟素能够显著抑制其溶血活性和凝固酶的表达。结论:水飞蓟素对金黄色葡萄球菌的生物膜形成具有很好的抑制以及清除作用,同时能够显著抑制其毒力因子的表达。

毒力因子在复发性外阴阴道假丝酵母菌病中的研究进展

复发性外阴阴道假丝酵母菌病是育龄期女性常见病,由于其反复发作、治疗困难,严重影响女性的身心健康。目前发病机制尚不明确,治疗方案各异。本文针对毒力因子在复发性外阴阴道假丝酵母菌病相关的发病机制及治疗进行综述,以期为其发病机制、治疗提供一定借鉴意义。

胆汁酸激活副溶血弧菌毒力因子的研究进展

副溶血弧菌(V.p)是海洋生态系统中的常见细菌,也是我国发生感染性腹泻的主要病原菌。其致病性与毒力因子密切相关,特别是热稳定性直接溶血素(TDH)、TDH相关溶血素(TRH)和Ⅲ型分泌系统-2(T3SS-2)。携带毒力基因的菌株可导致患者呕吐、腹泻、伤口感染及败血症等情况的发生。胆汁酸是激活V.p毒力因子并感知宿主肠道微环境的关键因素,在消化食物和抗菌性方面起到重要作用,致病性副溶血性弧菌可感知胆汁酸并激活毒力因子引起感染。本文旨在分析胆汁酸-细菌相互作用,讨论副溶血弧菌如何感知胆汁酸,以及胆汁酸调节V.p毒力因子中的作用机制,为开发潜在的新型抗菌疗法提供思路。

海南省类鼻疽伯克霍尔德菌临床分离株的基因岛特征和毒力因子分析

目的分析类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)临床分离株的基因岛(genomic island,GI)特征和毒力因子差异,为类鼻疽病的诊疗研究提供依据。方法收集B.pseudomallei临床分离株,PCR检测和测序分析毒力相关GI,在Islandviewr 4平台上提交全基因组序列注释格式文件,整合SIGI-HMM与IslandPath-DIMOB两种算法预测GI,通过序列比对分析GI独特性和毒力因子差异。结果共收集到52株B.pseudomallei临床分离株,结果显示,52个基因组按进化距离分为3个分枝,其中82.69%(43/52)菌株集中在分枝1。52个B.pseudomallei基因组共识别出828个GI,按序列相似性聚类为157个GI cluster。GI在基因组中占比达2.05%~6.38%。GI cluster1和2存在全部菌株中,但84个(53.50%)GI cluster只聚类到单个基因组。10个GI cluster很可能是特有的,其中5个来源同属细菌,2个来源其他属,3个来源不确定。25个GI cluster与毒力相关,B.pseudomallei BP76和BP169含有其中8个,是所有菌株中毒力相关GI最多的。52株B.pseudomallei的毒力基因除了fhaB1、fhaB2、BPSL1661、cheY1、wzM、tssH-5/clpV、tssA-5、boaA和boaB存在差异,其余都表现一致。与泰国和澳大利亚B.pseudomallei临床菌株比较,boaA、boaB、cheY1和chbp在两个国家的菌株中都表现出差异,同时fhaB1、fhaB3和bimA在澳大利亚菌株中表现出差异。结论海南地区B.pseudomallei GI具有保守性和独特性,通过特有GI和毒力因子研究,可以发现菌株水平基因转移(Horizontal gene transfer,HGT)的来源和分子水平的毒力差异。

幽门螺杆菌致病机制的多角度分析:毒力因子及外泌体

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是一种革兰氏阴性的微需氧菌,已被世界卫生组织(WHO)认定为I型致癌物,主要通过粪-口途径传播。幽门螺杆菌可通过黏附定植于胃黏膜上皮细胞引起慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡以及胃癌等胃肠道疾病。幽门螺杆菌可通过多种复杂的机制逃避宿主的免疫防御从而长期定植于胃黏膜上皮细胞表面以及内部。目前关于幽门螺杆菌致病的详细机制尚未完全明了,本文从其毒力因子及外泌体对幽门螺杆菌作为始动因素诱导胃肠道疾病发生发展的机制进行综述,为幽门螺杆菌相关疾病的病因和防治提供了参考。

致犊牛腹泻大肠杆菌毒力因子多重PCR检测方法的建立

以大肠杆菌4种毒力因子EAST1、FimH、F17、STX1为模板设计特异性引物并优化各项反应条件,建立犊牛腹泻的多重PCR检测方法,利用所建立的多重PCR方法对湖北省某牛场采集的15个样本进行检测。结果表明,在该牛场中携带FimH毒力基因的阳性菌株引起的大肠杆菌广泛存在,携带F17毒力基因的阳性菌株次之,并存在2种毒力基因混合感染的现象。综上所述,该方法的建立为大肠杆菌中常见毒力因子的快速检测及分子流行病学调查提供了新手段。

光滑念珠菌毒力因子Epa黏附素的研究进展

光滑念珠菌为一种常见的念珠菌病病原体,其感染率呈现不断上升的趋势。相较于其他非白念珠菌,光滑念珠菌凭借其较强的适应性黏附能力和生物膜生成能力,其引发的感染往往呈现出更高的致病性。其中,位于菌株细胞壁表面的上皮黏附素(epithelial adhesin,Epa)家族发挥了关键作用,其能够介导菌株与宿主细胞及非生物表面的黏附和生物膜的形成,从而影响菌株的毒力表现。该文从光滑念珠菌毒力因子Epa黏附素的结构、其在菌株致病中的作用以及EPA基因相关分子调控机制等方面,对光滑念珠菌Epa黏附素的相关研究进行综述。

耐甲氧西林金葡菌的分子分型、毒力因子及生物膜研究

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的标本分布、耐药情况、SCCmec、spa分型、相关毒力因子及生物膜形成情况。方法采用多重PCR扩增SCCmec、spa基因及毒力因子(tst、lukE、pvl、fnbA、fnbB、cna、clfA、clfB);采用Sanger双脱氧链终止法对扩增产物测序;采用微孔结晶紫染色法研究菌株生物膜形成。结果标本来源以分泌物最多,其次是痰;标本分布以儿童病区最多,其次为创伤病区及重症监护病区;SCCmec分型显示I型最多,占56%;spa分型以t437最多,占43%;多数菌株同时携带3种及以上毒力因子,以cna、fnbB和clfA黏附分子为主;60%的MRSA菌株具有较强生物膜形成能力。结论MRSA在儿童病房的流行需要引起注意;ICU病区呼吸机引起的相关感染仍是一大难题。本医疗机构内MRSA(2018—2019年)菌株以t437-SCCmec I型为主要流行克隆株。MRSA携带黏附毒素比率高,容易形成生物被膜,成为治疗的一大难题。

高毒力肺炎克雷伯菌的微生物学特征与毒力因子研究进展

高毒力肺炎克雷伯菌(hvKp)能够引起健康个体的社区获得性感染,比经典的肺炎克雷伯菌更具毒性。hvKp在亚洲首次被发现,是化脓性肝脓肿的主要原因。除肝脓肿外,hvKp与肺炎克雷伯菌的不同之处在于其具有很强的转移能力,包括肺、眼和中枢神经系统。由于导致高毒力的遗传决定因素通常在毒力质粒及染色体移动遗传元件上,该文对其与毒力相关的微生物学特征与毒力因子的研究进展进行综述,以期为高毒力肺炎克雷伯菌的早期识别、感染控制和新型治疗药物的研发提供线索。

浙江省温州地区老年住院患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌药敏、耐药表型及毒力因子研究

目的 探讨浙江省温州地区老年住院患者临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR KP)药敏、耐药表型及毒力因子特点。方法 选取2018年3月至2022年3月在浙江省温州市地区各医院的老年住院患者中分离的CR KP菌株112株,进行药敏试验,拉丝试验测试高黏表型菌株,荧光定量(PCR)检测耐药基因、血清荚膜分型及毒力因子基因。结果 112株CR KP分别来源于6种不同的标本类型,其中以尿液(47.32%)和痰液(42.86%)为主;112株CR KP对亚胺培南、厄他培南耐药率均达98.21%。共检出18株高黏表型CR KP菌株,检出率为16.07%,来自3种不同的标本类型,以痰液为主(61.11%)。CR-HvKP对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素具有较好的药物敏感性,分别为72.22%、61.11%、55.56%、55.56%。18株高黏表型CR KP菌株均携带KPC,其中有3株共同携带GES(16.67%),1株共同携带NDM(5.56%);血清荚膜型以K1型(11.11%)、K2型(2株,11.11%)为主,有13株未分型,未见K20、K54、K57型;共有12株高黏表型CR KP菌株携带毒力基因,其中有1株携带Iron基因(5.56%),2株共同携带rmp A、Iron、aerobactin、magA 4种基因(11.11%),1株共同携带rmpA、Iron、aerobactin 3种基因(5.56%),7株共同携带rmpA、Iron 2种基因(38.89%),1株共同携带rmp A、aerobactin 2种基因(5.56%);rmpA携带率为61.11%,Iron携带率为61.11%,携带aerobactin携带率为22.22%,magA携带率为11.11%。结论 高黏表型CRKP菌株在温州地区老年住院患者的检出率较高,标本主要来源于痰液,耐药基因机制可能为产KPC型碳青霉烯酶,血清荚膜型以K1和K2为主,毒力基因以rmpA、Iron基因携带率最高。