沿海海区副溶血弧菌致病能力的研究

目的研究从海水中分离出的副溶血弧菌的致病性。方法毒力实验组:35只清洁级昆白小鼠随机分为腹腔注射副溶血弧菌为实验组,阳性对照组为腹腔注射金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌,阴性对照组为腹腔注射无菌生理盐水;伤口感染组:35只SPF小鼠,腿部致伤后随机分为实验组(浸泡含有细菌的人工海水)和阳性对照组(含有金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌),阴性对照组(浸泡无菌人工海水);观察小鼠一般状况,进行血常规检查、血培养、脏器培养,4d后活杀小鼠,取脏器进行病理检查。结果毒力实验组:1只小鼠腹腔注射细菌悬液12h后血培养阳性,解剖脏器压印细菌培养阳性;伤口感染组:伤口浸泡菌液后,感染率为100%,血液及脏器细菌培养阳性率为10%;病理学检查伤肢横纹肌组织有大量中性粒细胞浸润,蜂窝织炎性反应,感染的严重程度相当于阳性对照组,阴性对照组无炎性反应。结论自海水中分离出的副溶血弧菌在106CFU/ml时,具有感染能力,可致鼠伤口感染和败血症。

东南沿海解藻酸弧菌伤口感染能力研究

目的 研究从沿海某地海水中分离出的解藻酸弧菌的致病性。方法 采用毒力实验组 :35只二级昆明小鼠随机分为 4组 :实验组腹腔注射解藻酸弧菌 ,阳性对照组腹腔注射标准金黄色葡萄球菌、标准大肠埃希菌 ,阴性对照组腹腔注射无菌生理盐水 ;伤口感染实验组 :35只SPF小鼠 ,腿部致伤后随机分为 4组 :实验组 (浸泡含有细菌的人工海水 )和阳性对照组 (含有标准金黄色葡萄球菌、标准大肠埃希菌 ) ,阴性对照组 (浸泡无菌人工海水 ) ;观察小鼠一般状况、血常规、血培养、脏器培养 ,96h后活杀取脏器和伤肢病理检查。结果 毒力实验 :实验组 2 0只鼠中 4只 (2 0 % )的肝、肺有细菌生长 ;伤口感染实验 :伤口感染阳性率为 10 0 % ,活杀后脏器细菌培养阳性率为30 % ;病理学检查伤肢皮下组织大量中性粒细胞浸润、肌纤维破坏、脓肿形成。结论 自沿海某海域分离出的解藻酸弧菌在 10 6CFU/ml时 ,具有较强的感染能力 ,可致实验鼠伤口感染。

首次发现恶臭假单胞菌引起的食物中毒

在一次大面积食物中毒中，检出１ 株革兰氏阴性非发酵菌。用ＮＦＣ鉴定卡，经Ｖｉｔｅｋ３２ 型全自动微生物分析系统鉴定，确认该菌为恶臭假单胞菌。经流行病学调查、细菌分离、小白鼠毒力实验及患者血清凝集反应，证实该菌为本次食物中毒的致病菌。国内外文献查新检索证明：迄今为止，国内外尚未见恶臭假单胞菌引起食物中毒的报道。本次由恶臭假单胞菌引起的食物中毒在国内外尚属首次发现。

沿海某地海鱼弧菌伤口感染能力研究

目的 研究从某沿海海水中分离出的海鱼弧菌的致病性。方法 ①毒力实验组 :35只二级昆白小鼠随机分为 4组 ,实验组腹腔注射海鱼弧菌 ,阳性对照组腹腔注射标准金黄色葡葡球菌、标准大肠杆菌 ,阴性对照组腹腔注射无菌生理盐水。②伤口感染实验组 :35只无特定病原体小鼠 ,腿部致伤后随机分为 4组 ,实验组 (浸泡含有细菌的人工海水 )和阳性对照组 (含有标准金黄色葡萄球菌、标准大肠杆菌 ) ,阴性对照组 (浸泡无菌人工海水 )。观察小鼠一般状况、血常规、血培养、脏器细菌培养、伤口分泌物培养、脏器和伤肢病理光镜检查 ,并将鼠体内分离的菌株和实验前菌株进行核酸指纹图比较分析 ,确认细菌来源。结果 ①毒力实验 :海鱼弧菌组 (海鱼组 )腹腔注射细菌悬液后一般情况差 ,持续 2 4h ,病理学检查见多脏器水肿、变性。②伤口感染实验 :实验组和阳性对照组伤口感染阳性率为 10 0 % ,病理学检查海鱼组及阳性对照组伤肢皮下及横纹肌可见大量嗜中性粒细胞浸润 ,有蜂窝织炎形成。结论 自某沿海海域分离出的海鱼弧菌在 10 6CFU/ml时 ,具有感染能力 。

广东省罗非鱼无乳链球菌耐药性及毒力研究

目的无乳链球菌感染已成为广东地区罗非鱼养殖业严重的威胁。本文以广东省罗非鱼主要养殖区内分离的121株无乳链球菌为研究对象,对菌株进行药物敏感性实验和毒力实验,为罗非鱼链球菌病的有效防治提供实验依据。方法采用纸片扩散法(Kirby-Bauer),检测121株无乳链球菌对12种抗生素的耐药率;用皮下注射和灌胃方式感染Bal b/c小鼠,绘制生存曲线反映菌株毒性情况。结果药敏实验结果显示无乳链球菌对氨基糖苷类抗生素链霉素、庆大霉素和卡那霉素的耐药率分别高达100%、100%、99.17%;对头孢噻肟耐药率大于50%,为52.89%,环丙沙星、氧氟沙星、四环素、红霉素、克拉霉素、氯霉素、氨苄青霉素、强力霉素耐药率依次降低,分别为47.93%、38.02%、34.71%、26.45%、25.62%、20.66%、19.01%、17.36%。所有实验菌株均为多重耐药株。脉冲场凝胶电泳分型结果显示C型菌株数量最多,占71.9%。小鼠实验结果显示在皮下注射感染方式中,1×10~5CFU无乳链球菌感染可区分各型别间的致病力差异,致病力由强到弱依次为C、A、D、B、F,差异有统计学意义(P<0.05);灌胃感染方式中高剂量1×10~7CFU无乳链球菌感染时可区分各组间致病力差异,C型致病力最强,其次为F、A、B、D,差异有统计学意义(P<0.05)。结论广东地区罗非鱼无乳链球菌已经产生了较高的耐药性且耐药谱广,该地区罗非鱼感染的无乳链球菌主要以致病力较强的C型为主。

猪源大肠杆菌O157:H7广西分离株的鉴定

为了解大肠杆菌O157:H7是否在猪场存在,采集有拉稀症状猪的粪便,接种到新生霉素mEC增菌肉汤,增菌培养后转接到O157:H7显色培养基上,对可疑菌株用因子血清和PCR方法做进一步鉴定,实验结果证实得到5株大肠杆菌为O157:H7血清型。动物试验发现,5个分离菌株对小白鼠的致死率为33.3%—100%之间。调查结果证实广西猪群中存在强致病性的O157:H7血清型大肠杆菌。

重复序列致agrC突变对金黄色葡萄球菌致病性的影响

目的探讨金黄色葡萄球菌XQ株毒力变异的机制。方法以金黄色葡萄球菌ATCC25923为对照,采用动物实验观察临床分离的金葡菌XQ株在体外传代后的毒力改变;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析菌体及培养上清的蛋白谱变化,应用PCR进行金葡菌附属调节基因agr扩增并测序,分析菌株毒力变异的机制,并进一步通过qRT-PCR检测XQ株agr调控的毒力因子变化情况。结果动物毒力实验证实XQ株的毒力较对照菌ATCC25923强,体外传代培养后,XQ株第180代菌株（XQ180）的毒力明显下降,SDS-PAGE分析发现毒力下降的XQ株（XQM株）培养上清的蛋白表达谱较XQ株有明显改变,对金葡菌agr基因进行测序分析发现XQM株的agr C基因第443位有一段188 bp的序列插入,而该插入序列就是agr C基因255~442间序列,正是该188 bp重复序列导致Agr C蛋白的截短型突变,引起新桥株的致病性降低,qRT-PCR检测结果证实XQM株中受agr调控的毒力基因表达水平显著下降。结论临床分离的金葡菌XQ株毒力强,在体外传代中易发生毒力变异,这种变异与重复序列导致的agr C突变有关。

耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株的筛选

本研究通过小鼠体内实验检测我国部分地区结核分枝杆菌耐药菌株的毒力,以筛选耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株。收集从我国部分省份98例结核病患者痰培养液中分离出的结核分枝杆菌,用比例法药敏试验进行结核分枝杆菌一线和二线药物的药敏试验,筛选出对二线药物敏感而对一线药物利福平或异烟肼耐药或敏感的菌株,然后进行小鼠体内毒力实验,对异烟肼耐药相关基因katG和利福平耐药相关基因rpoB测序并进行基因突变分析。从98株菌中筛选出药物敏感谱清晰的40株,进行小鼠体内毒力实验。结果显示,共35株半数死亡时间≤H37Rv的半数死亡时间,其中18株耐利福平合并耐异烟肼、5株单耐利福平,7株单耐异烟肼、5株对利福平和异烟肼均敏感。通过小鼠毒力研究,分别筛选出基因背景清晰,半数死亡时间≤7d的耐利福平合并耐异烟肼的菌株1株、半数死亡时间≤7d单耐利福平和异烟肼的菌株各1株,作为耐药结核分枝杆菌感染小鼠模型所用菌株及进一步进行豚鼠等其他动物模型感染用候选菌株。

浅黄色奈瑟氏菌致病性探讨

浅黄色奈瑟氏菌是奈瑟氏菌属11个菌种中的一种,通常寄生于人体咽喉部,是正常菌。我院今年收治一例病人,通过痰培养,只单纯地检出了乙型溶血环的浅黄色奈瑟氏菌一种,且作小白鼠毒力实验具有一定的致病性。 患者,男,30岁,半月前受凉发热,咳嗽、自服感冒通、止咳糖浆无明显好转、自觉午后潮热、伴夜间盗汗来我院就诊,胸透报告“右上肺可见片状模糊影”,考虑“

海洋中分离的河流弧菌致病能力的研究

目的研究从海水中分离出的河流弧菌的致病性。方法毒力实验组:22只二级昆明小鼠随机分为4组:实验组腹腔注射河流弧菌,2个阳性对照组分别腹腔注射标准金黄色葡萄球菌和标准大肠埃希菌,阴性对照组腹腔注射无菌生理盐水;伤口感染实验:22只SPF小鼠,腿部致伤后随机分为4组:实验组(浸泡含有河流弧菌的人工海水)和2个阳性对照组(分别含有标准金黄色葡萄球菌、标准大肠埃希菌),阴性对照组(浸泡无菌人工海水);观察小鼠一般状况,血常规、血培养、脏器细菌培养,伤口分泌物培养,3 d后活杀小鼠,取脏器和伤肢进行病理检查。结果毒力实验:实验组7只鼠中5只鼠腹腔注射细菌悬液12 h血培养阳性,2只鼠24 h血培养持续阳性;伤口感染实验:伤口感染阳性率为100.0%,病理学检查伤肢横纹肌组织有大量中性粒细胞浸润,蜂窝织炎形成。结论自海水中分离出的河流弧菌在106CFU/ml时,具有感染能力,可致鼠伤口感染和败血症。