尿感方对尿道致病性大肠杆菌毒力特征的影响

目的探讨尿感方对尿道致病性大肠杆菌毒力特征的影响。方法以CFT073作为实验菌株,通过细菌生长培养,观察尿感方含药尿液对CFT073生长的影响。分别采用体外持留模型、微孔板法、平板法、ELISA法和RT-PCR法检测尿感方含药尿液对CFT073持留能力、生物膜形成、泳动能力、内毒素释放水平、侵袭力和毒力相关基因(fur、chuA、iha、fyuA、gltS、gltP、fimH和LexA)的影响。结果与未经干预的CFT073比较,经空白尿液干预后的CFT073生长能力、持留能力、生物膜形成、泳动能力、侵袭力、内毒素释放水平和毒力相关基因mRNA表达均无明显差异(P>0.05);与经90%空白尿液干预后的CFT073比较,经90%尿感方含药尿液干预后的CFT073生长受到抑制(P<0.05);与经60%空白尿液干预后的CFT073比较,经60%尿感方含药尿液干预后的CFT073持留能力、生物膜形成、泳动能力、侵袭力和内毒素释放水平降低(P<0.05,P<0.01),毒力相关基因fur、chuA、iha、fyuA、gltS、gltP、fimH、LexAmRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论尿感方可降低CFT073的持留能力、泳动能力和侵袭力,抑制生物膜的形成和内毒素的释放,下调毒力相关基因fur、chuA、iha、fyuA、gltS、gltP、fimH、LexAmRNA表达,影响CFT073的毒力特征。

栗疫菌弱毒力特征的传递及其影响因素

dsRNA in Cryphonectria parasitica could be transmitted to progeny through conidia with varying efficiency in culture.Both light and prolonging cultural time could reduce the transmission efficiency,but the effect of light was more efficient.No dsRNA segments were found to be loss after 30 generations subculture,indicating that dsRNA could transmitted stably through subculture.Vegetative incompatibility was a barrier for the transfer of dsRNA from one isolate to another,and hypovirulence conversion reduced as the number of different VC genes between donor and recipient isolates increased.

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的耐药性及毒力特征的分子生物学研究

目的了解宁夏医科大学总医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的分子流行病学及毒力特征。方法收集2015年1月—2019年12月分离的CRKP 103株,采用改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)联合EDTA改良碳青霉烯酶灭活试验(eCIM)检测产碳青霉烯酶表型,PCR分子生物学技术检测碳青霉烯酶等耐药基因以及荚膜血清型、毒力基因,多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)对碳青霉烯类耐药高毒力肺炎克雷伯菌(CR-hvKP)进行同源性分析。结果103株CRKP对临床常见抗菌药物表现为不同程度的耐药,mCIM联合eCIM试验结果显示94株CRKP产碳青霉烯酶,其中67.0%产金属酶,33.0%产丝氨酸碳青霉烯酶。耐药基因检出率依次为blaNDM 50.5%(52/103)、bla_(KPC)33.0%(34/103)、bla_(OXA-48)22.3%(23/103)、bla_(IMP)10.7%(11/103)。18种ST型中以ST11型35.3%(36/102)及ST76型22.5%(23/102)为主。CR-hvKP 10株,其中仅4株为荚膜血清K1型、10株均为菌毛黏附基因fim-H和铁载体相关基因ent-B携带者。10株CRhvKP菌株PFGE同源性分析显示以D族群居多,亲缘性接近;未发现同一病区同一时间段的暴发流行。结论该院CRKP菌株以产NDM-5型碳青霉烯酶为主,ST11型为优势流行株。已发现9.7%的CRKP为CR-hvKP菌株,应当引起临床和院感相关部门的重视,防止暴发流行。

引起无症状性菌尿的大肠埃希菌的毒力特征

大肠埃希菌(简称大肠杆菌)是引起无并发症尿路感染(UTI)最常见的细菌。具有尿路致病性的大肠杆菌可产生多种参与其致病过程的毒力因子，包括P-菌毛、溶血素、aembactin和细胞毒性坏死因子-1。然而尿液中细菌的繁殖通常在没有临床症状的情况下发生，即无症状性菌尿(ABU)。ABU不一定需要治疗。

全基因组测序分析山东省胶东地区禽源弯曲菌基因组特征和耐药性

为了解山东省胶东地区禽源弯曲菌的耐药特征、毒力特征及分型遗传进化关系,对2021-2022年来自胶东地区26个养禽场的31株弯曲菌,采用肉汤稀释法进行抗生素敏感性检测,然后基于全基因组测序结果分析其耐药基因、毒力基因、多位点序列分型,并进行全基因组单核苷酸多态性(wgSNPs)遗传进化分析。结果显示:31株弯曲菌对四环素的耐药率为96.77%,对环丙沙星、萘啶酸的耐药率均为93.55%;31株菌呈现出6种耐药谱,15株菌耐3类及以上药物。基于全基因组测序结果,31株弯曲菌分为20个序列型(ST),其中结肠弯曲菌优势克隆群为CC828,空肠弯曲菌呈现多样性分布;携带喹诺酮类、四环素类、氨基糖苷类、β-内酰胺类等多种类型耐药基因,携带已知功能的6类42种毒力基因。经wgSNPs遗传进化分析,结肠弯曲菌优势克隆群CC828分布在3个小分支中,空肠弯曲菌分布在7个小分支中,分布分散。结果表明:胶东地区禽源弯曲菌耐药严重,耐药谱较广,携带的耐药基因与耐药表型有一定关系;携带毒力基因数量较多,结肠弯曲菌有优势克隆群,空肠弯曲菌ST型呈多样性,分离菌株具有较高的遗传多样性。本研究为降低禽源弯曲菌向人类传播的概率,实现“同一健康”提供了技术支撑。

牙龈卟啉单胞菌临床菌株的毒力分析

目的:利用啮齿动物模型,比较分析中国人群口腔中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)临床菌株的毒力。方法:采用小鼠脓肿形成实验,将6株从牙周炎患者牙周袋中分离获得的P.gingivalis临床菌株L2、L3、L4、L5、L11和L12分别注射至小鼠后背中央,观察其临床症状,并与国际标准菌株ATCC33277和W83进行比较,分析临床菌株的毒力特性。采用SPSS11.5软件包对数据进行统计学分析。结果:L3、ATCC33277和W83诱发小鼠产生原发性脓肿和轻微的全身反应,L2、L5、L11、L12则诱发小鼠产生远处转移性病变和严重的全身反应。结论:中国牙周炎患者口腔中的P.gingivalis临床菌株与国际标准菌株相比,在诱发实验鼠发生局部脓肿方面,具有一定程度的相似性,但临床菌株间的毒力特征具有较大差异。

全基因组测序分析北京地区人源结肠弯曲菌基因组特征和耐药性

目的 了解北京地区人源结肠弯曲菌的耐药特征、毒力特征及多位点序列分型等遗传进化关系。方法 对2019-2021年北京市肠道门诊腹泻病例中分离到的36株结肠弯曲菌,采用琼脂稀释法进行抗生素敏感性检测;基于全基因组测序结果分析其耐药基因、毒力基因、多位点序列分型及全基因组单核苷酸多态性(whole genome single nucleotide polymorphisms, wgSNPs)遗传进化分析。结果 36株结肠弯曲菌对萘啶酸和四环素的耐药率为100.0%,对环丙沙星的耐药率为97.2%,对红霉素和阿奇霉素的耐药率为38.9%;36株菌均为多重耐药株,有10种耐药模式。基于全基因组测序结果,36株结肠弯曲菌分为21种ST型,优势克隆群为CC828;携带大环内脂类、喹诺酮类、氨基糖苷类、酰胺醇类、四环素类等多种类型耐药基因;携带6类38种毒力基因。wgSNPs遗传进化分析显示克隆群CC1150与优势克隆群CC828相距较远,处于独立的分枝,CC828克隆群内菌株聚集成3簇,呈现多样性分布。结论 北京市人源结肠弯曲菌分离株耐药严重,多重耐药谱广泛;耐药基因与耐药表型有一定的关联;克隆复合体以CC828为主,具有较高的遗传多样性。

犬源性奇异变形杆菌的毒力试验

奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,P.mirabilis)是一种重要的条件致病菌,可引起人和动物的尿道感染及腹泻。本试验旨在通过对犬腹泻源性奇异变形杆菌的溶血性、产尿素酶和蛋白酶活性、"雾蔓"迁徙能力和其相关毒力基因的测定,以期更好地系统了解其毒力特征。在本试验中,用微生物学方法包括不同的平板培养和革兰染色等检测了所有菌株的毒力表型,用PCR方法检测了相关毒力基因的存在情况。结果显示,32株奇异变形杆菌中,所有菌株均不具备溶血性,所有菌株均能产生尿素酶,有29株细菌能产生金属蛋白酶,所有菌株均具备"雾蔓"迁徙能力但不同菌株的迁徙能力差异明显;除了部分菌株不含有rsbA和ucaA基因外(分别为5株和7株),所有菌株均含有atfA、atfC、mrpA、pmfA、ureC和zapA等毒力基因。由以上几部分结果,清晰地得出了犬腹泻源性奇异变形杆菌的毒力具有自身的特异性,为以后的致腹泻能力研究提供了良好的基础。

成都市人源沙门菌基因组特征分析

目的基于全基因组测序技术,探究成都市人源沙门菌的基因组特征,为监测与预防沙门菌感染提供资料。方法收集35株成都市人源沙门菌(分离自腹泻患者粪便)进行全基因组测序。根据测序数据,进行血清型预测、耐药基因及可移动遗传元件预测、毒力因子注释及分布分析。结果35株沙门菌分离株经全基因组测序,共预测到5种血清型,包括15株I 4,[5],12:i:-沙门菌(13株为ST34、2株为新ST型)、12株鼠伤寒沙门菌(ST19)、5株肠炎沙门菌(ST11)、2株德比沙门菌(ST40)与1株火鸡沙门菌(ST463)。35株沙门菌分离株共预测到10类42种不同的耐药基因,其中氨基糖苷类aac(6′)-Iaa携带率为100%(35/35)。I 4,[5],12:i:-沙门菌的耐药基因、质粒及插入序列数目及种类多于其他血清型菌株。I 4,[5],12:i:-、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌的毒力因子数目大于其他血清型菌株。部分鼠伤寒沙门菌有更高的毒力质粒、质粒编码菌毛和血清抗性毒力因子分布。结论成都市人源沙门菌不同血清型菌株之间耐药基因、可移动遗传元件、毒力因子分布差异明显,值得在转录组、蛋白组进一步探究其耐药与毒力机制。

传染性喉气管炎病毒的研究进展

本文概述了传染性喉气管炎病毒的分子生物学结构,以及该病毒的培养特性、毒力特征、抵抗力、发病机理与传播方式、免疫生物学和疫苗研究的进展。

食品检测用4种病原菌基因组试剂盒提取方法的比较与优化

目的:采用国产的天根细菌基因组提取试剂盒,制备具有自主知识产权的、达到国家核酸标准物质要求的食源性病原菌的基因组样品。方法:以4种食源性病原菌大肠埃希氏菌O157:H7、单增李斯特氏菌、肠炎沙门氏菌和金黄色葡萄球菌为研究对象,首先使用进口OMEGA细菌基因组提取试剂盒和国产天根细菌基因组提取试剂盒提取4种病原菌的基因组,然后对国产试剂盒提取的基因组浓度和纯度较低的大肠埃希氏菌O157:H7、肠炎沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的基因组提取方法进行优化。最后对4种病原菌基因组的完整性和纯度进行琼脂糖凝胶电泳检测,并分别对4种病原菌的特征毒力基因进行PCR扩增验证。结果:通过方法优化,使用国产天根细菌基因组提取试剂盒提取的4种病原菌的基因组质量浓度均在50 ng/μL以上,A260/A280和A260/A230的值在1.7~2.0之间,基因组DNA条带完整,无RNA和蛋白污染,各菌株的特征毒力基因均为阳性。结论:通过基因组提取方法的优化,得到符合国家核酸标准样品要求的4种病原菌基因组样品,为后续大量制备核酸标准样品奠定了基础。

深圳地区2002-2008年副溶血弧菌分子特征研究

目的 了解深圳地区副溶血弧菌主要血清型和分子分型以及毒力因子分布,分析新O3：K6型克隆群与国际流行株的进化关系.方法 对2002-2008年深圳地区1005株副溶血弧菌临床分离株进行血清型分型；采用荧光PCR方法对68种不同血清型的28 1株副溶血弧菌进行tlh、toxR、tdh和trh毒力基因检测；对281株菌株进行orf8检测；采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对不同分离时间的5种主要血清型菌株进行分子分型,根据有代表性的分子分型图谱选取82株副溶血弧菌菌株进行GS-PCR检测,并选取60株副溶血弧菌菌株进行toxRS基因测序；进而对41株O3∶K6和O1∶K25副溶血弧菌菌株进行多位点序列分型（MLST）分析,采用eBURST软件分析进化关系.结果 1005株菌共得到79种不同的血清型,主要血清型为O3∶K6、O4∶K8、O1∶K25、O1∶KUT、O4∶K68、O1∶K56和O9∶K44,所占比例分别为57.9％、8.16％、5.27％、5.87％、1.39％、1.39％和0.99％.243株为tlh＋、toxR＋、tdh＋、trh-,37株为tlh＋、toxR＋、tdh-和trh-,1株tlh＋、toxR＋、tdh＋和trh＋.35株O3∶K6型菌株的MLST序列类型为ST3,是同源复合体CC3,O4∶K8型副溶血弧菌的序列类型为ST189,无同源复合体.结论 深圳地区主要流行的副溶血弧菌为tdh＋、trh-的O3∶K6、O4∶K8和O1∶K25菌株,2006年后出现O1∶K56、O9∶K44、O3∶K29、O4∶K9新的血清型；其中O3∶K6血清型属于新的O3∶K6克隆群,与其他国家流行的副溶血弧菌属于同一克隆群,同时也存在新、旧克隆群.血清的多样性和新旧克隆群的存在是造成深圳地区副溶血弧菌腹泻病高发态势的主要原因之一.

脊髓损伤并发泌尿系感染患者致病性大肠埃希菌分子流行病学特征

目的调查脊髓损伤患者致病性大肠埃希菌分子分型、流行病学和毒力特征。方法选取2017年1月-2019年12月入院治疗的脊髓损伤合并泌尿系感染患者86例,共分离、鉴定出致病性大肠埃希菌56株,进行多位点序列分型和药敏试验,采用多重聚合酶链反应(PCR)方法检测毒力因子基因和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况。结果86例脊髓损伤合并泌尿系感染患者共检出病原菌105株,前3位分别为大肠埃希菌53.33%、肺炎克雷伯菌16.19%、铜绿假单胞菌8.57%。大肠埃希菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、亚胺培南及美罗培南耐药性较低,均<15%,但对头孢他啶、头孢呋辛、头孢唑林、哌拉西林、环丙沙星、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦及磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药性较高,均>50%。56株致病性大肠埃希菌共鉴定出24个ST分子分型,其中前5位ST型分别为ST131、ST1193、ST405、ST38、ST648;毒力因子基因dsdA、tonB、fimH、degP、ompR检出率较高,均>80%,而ireA、neuC、fliC在致病性大肠埃希菌中检出率较低,均<25%;大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出44株,检出率为78.57%,其中仅携带有1种基因型有40株(90.91%),以blaCTX-M-14检出率最高(54.55%)。结论脊髓损伤患者致病性大肠埃希菌以ST131分子分型流行,具有较强的耐药性,且携带有多种毒力因子基因,临床应加强医院感染监测与隔离防护措施,阻碍耐药性大肠埃希菌的传播。

产碳青霉烯酶K20型肺炎克雷伯菌的分离及分子背景研究

根据荚膜血清学分型，可以将肺炎克雷伯菌分为78个血清型。近年来研究非常关注的荚膜血清型K1、K2、K20、K54、K57型肺炎克雷伯菌在动物实验中表现出较强的毒力特征，并发现与人类肝脓肿、眼内炎、腹膜炎等多种侵袭性疾病密切相关。这些高毒力肺炎克雷伯菌多携带rmpA、magA、wcaG、Arobactin等毒力基因，在毒性、侵袭性、血清抵抗性等方面都显著高于其他荚膜血清型肺炎克雷伯菌。

兔源性肺炎克雷伯氏菌的研究现状及进展

肺炎克雷伯氏菌是一种能引起人和多种动物患病的条件致病菌,在自然界中广泛分布,主要存在于人和动物的肠道、呼吸道以及泌尿生殖道中。该菌会引起宿主感染肺炎、败血症、肝脓肿等。近年来,随着养兔业的快速发展,各种抗生素在养殖业的广泛应用甚至滥用,肺炎克雷伯氏菌在兔中的发病率呈现上升趋势,对兔的危害日益严重,给兔养殖业带来了较大的经济损失。本文从肺炎克雷伯氏菌的流行病学特征、毒力特征、耐药性、分离鉴定、以及防治手段等方面进行探讨,为实际生产和科学研究提供参考依据。