兔病毒性出血症并发巴氏杆菌病防治

兔病毒性出血症又称兔瘟,其发病率和死亡率极高,是一种急性、败血性和高度接触性疾病,病兔以喉头、气管、肺出血,肝、脾、胃瘀血、肿大及有点状出血为特点。兔巴氏杆菌病亦称兔出血性败血症,病兔临床上有中耳炎、鼻炎、肺炎、生殖器官炎症以及全身性败血症等不同表现。兔瘟并发巴氏杆菌病会在兔群中急速传播,引发大量死亡。

兔病毒性出血症病毒的分离和鉴定

本试验对山东某兔场疑似感染兔瘟致死的病料进行中和试验、血凝和血凝抑制试验、PCR鉴定及测序比对。试验结果表明,4份分离的病毒上清液都能与1%人O型红细胞发生凝集,凝集效价均为1:1024;与兔病毒性出血症阳性血清中和反应后,对人O型红细胞没有凝集反应;PCR扩增结果显示4份送检样品均在286 bp位置出现了目的条带,经测序比对,该序列与中国的03/China/2016毒株VP60基因(登入号为MF669712.1)序列同源性最高,相似度为99.65%。试验结果充分说明该病毒为兔病毒性出血症病毒,该兔场流行疫病为兔瘟。

兔病毒性出血症研究概况及前景

兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,病死率高达100%。本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、体外培养、分子生物学、病毒的检测和疫苗等方面做了系统深入综述,并提出了存在的问题及展望。

兔病毒性出血症研究概况

本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、兔病毒性出血症病毒的分子生物学、兔病毒性出血症病毒的诊断、兔病毒性出血症病毒的疫苗等方面进行了简要综述。

兔病毒性出血症诊断方法研究概况

兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,致死率可达100%。本文对兔病毒性出血症的病原学、流行特点、检测方法等进行了综述,以期为其诊断和防治提供参考。

兔病毒性出血症研究进展

兔病毒性出血症俗称"兔瘟",是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性,致死性传染病,对易感兔致病率可达90％,病死率可高达100％。文章对兔病毒性出血症的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和防制研究进展作了系统深入综述,并提出了存在的问题和展望。

TaqMan MGB探针实时检测兔病毒性出血症病毒

应用荧光定量PCR技术,根据兔病毒性出血症病毒的保守基因VP60设计了1对引物和1段Taqman MGB探针,建立了用于检测兔病毒性出血症病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。试验中能够检出的RHDV VP60基因质粒拷贝数达103数量级,能够检测到RHDV病毒核酸最低量可以达到5 pg,未检出其他病原的RNA。试验结果表明,建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量RT-PCR方法的特异性、敏感性、重复性均达到试验设计要求,能快速检测临床样品中的兔病毒性出血症病毒,适合于兔各脏器及肌肉组织中兔病毒性出血症病毒的快速诊断和检测。

兔病毒性出血症基因工程疫苗的研究进展

兔病毒性出血症俗称兔瘟，它是由兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）引起的一种急性、烈性、高度接触性、致死性传染病。1984年中国首次报道了该病。RHDV曾是兔的一种毁灭性传染病，因给养兔业带来巨大的经济损失而备受养兔业的关注。1989年，世界动物卫生组织（OIE）将该病正式列为B类传染病，我国将其列为二类传染病。

兔病毒性出血症病毒基因组3′端非编码区的分子克隆及生物信息学分析

采用3′RACE方法对兔病毒性出血症病毒(RHDV)JX／CHA／97株基因组3′端全序列进行了扩增、克隆和测序,并利用ONAstar和DNAman软件分析了RHDV JX／CHA／97株与各参比毒株3′NCR的序列同源性,用RNA structure软件对3′NCR的二级结构进行了预测和分析。结果表明,所扩增的目的基因片段长1500 bp,包括部分VP60基因序列、ORF2基因、3′端非编码区(3′Non Coding Region,3′NCR)和poly(A)尾巴,其中 3′NCR位于ORF2终止密码子TAG之后,长59 bp,poly(A)至少含有27个A;3′NCR序列具有较高的同源性 (93．5％-100％);3′NCR二级结构可以形成2个潜在的茎-环结构(SL1和SL2),其中SL2具有一定的保守性,其形状和形成位置与poly(A)尾巴的长度关系不大,但是SL1的结构和形成位置与poly(A)尾巴的存在与否密切相关,提示poly(A)尾巴与3′NCR高级结构的稳定性以及基因组复制有一定关系。

免疫日龄对兔病毒性出血症抗体水平和保护率的影响

通过攻毒试验比较了新西兰家兔免疫前后0、1、2、3和4 log25种抗体水平对病毒性出血症(RHD)的保护效果,同时测定了30、35、40、45、50、55和60日龄非免疫兔的母源抗体效价和用RHD组织灭活苗免疫后8周内血清抗体效价的动态变化。结果表明,抗体效价高于3 log2时可产生100%的保护,2 log2的保护率仅为50%;母源抗体与日龄呈负相关,在30日龄时最高,可以产生有效的保护,在40日龄后已无保护作用;免疫日龄与抗体峰值和有效保护时间呈正相关,30日龄免疫,抗体效价不但不升,反而显著下降,无保护作用;35日龄免疫,抗体峰值较低,有效保护时间仅为2周;大于40日龄免疫,抗体峰值较高,有效保护时间延长。因此建议35日龄首免、2周后二免为最佳免疫程序。

兔病毒性出血症发病机理的初步研究

兔病毒性出血症是兔的一种败血性传染病,通过电镜观察和免疫胶体金-银法的监测,病毒最先侵害的靶器官是肝、脾和肺,然后到达全身血流,最后分布到其它器官。发现动物在感染后18～24小时,在肝、脾、肺、肾和肠上皮细胞、血管壁内皮细胞、循环的中性白细胞、淋巴细胞及肥大细胞的核内有病毒颗粒,其直径为32～34nm,无囊膜。感染后24小时直到死亡前,大部分病毒颗粒被释放到细胞浆和间质中去。初步认为本病是由于病毒血症对各器官的直接损伤,尤其对血管壁的损伤,导致全身弥散性血管内凝血(DIC)及全身性出血。由于血液的丧失,继而使全身各器官发生缺氧,最终引起生命重要器官的功能衰竭而死亡。

病毒性出血症疫苗免疫剂量对幼兔血清抗体效价的影响

选择35、40和45日龄的新西兰家兔各30只，每种日龄兔随机均分为5组，其中对照组注射生理盐水，4个试验组分别注射4种剂量（1ml、2ml、3ml、4ml）的兔病毒性出血症疫苗，分别于免疫前及免疫后1。7周内每周采血测定血清抗体效价的动态变化。结果表明：各日龄兔的2ml、3ml、4ml剂量组的抗体上升速度和有效抗体维持时间均显著大于同日龄的1ml剂量组；35日龄兔的2ml、3ml、4ml剂量组的抗体峰值显著高于1ml剂量组。提示35日龄兔注射剂量2ml为最佳免疫程序。

兔病毒性出血症基因工程苗研究概况

由于兔病毒性出血症 (RHD)组织灭活苗涉及的成本、生物安全及动物福利等问题 ,国内外学者正致力于 RHD新型疫苗的研制和开发。以 VP60表达为基础的亚单位疫苗经历了最初的原核、真核表达 ,目前正寻求在转基因植物中进行表达 ,以期获得大量、低成本的口服疫苗 ;而以牛痘、金丝雀痘病毒、黏液瘤病毒等作载体的重组活载体苗 ,无疑使 RHD疫苗正在向更安全、实用及对家兔、野兔均有保护作用方向发展 ,具有很大的发展潜力和前景。国外学者在RHD基因工程苗方面研究较为广泛和深入 。

兔病毒性出血症与多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗的试制和效果

兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗于江苏省农业科学院兽医研究所畜禽生物制品研究开发中心试制 5批 ,计 10 0余万头份。疫苗效力试验对兔病毒性出血症总保护率为 10 0 %;对兔多杀性巴氏杆菌病总保护率为 95 %。疫苗于苏、鲁、皖、浙、沪、晋、闽、津等省、市养兔单位应用 ,据反馈信息表明 ,疫苗安全、有效。确认本疫苗的生产工艺成熟、可行 ,可进行工厂化生产。所生产的二联苗能有效预防该两病的发生。

西藏兔病毒性出血症的研究——病原鉴定及疫苗免疫效力试验

1994年 6～ 7月 ,西藏林芝地区家兔大批急性死亡 ,经过流行病学调查 ,临诊症状观察 ,病理剖检等结果与兔病毒性出血症特征相符。进一步作病毒学检查表明 ,病变组织超薄切片经电子显微镜观察发现有大量直径约 30nm的球状裸露的病毒粒子 ;自然病死兔肝组织匀浆上清能凝集人O型红细胞 ,而且血凝性能被兔出血症病毒阳性抗血清所抑制 ,致病性试验结果表明 ,该病毒对兔有很强的致病性 ;用西藏自然病死兔肝组织匀浆试制的灭活疫苗免疫家兔后 ,分别用西藏自然病死兔肝组织匀浆和江苏兔出血症病毒攻毒 ,均 1 0 0 %保护 ,而未接种灭活疫苗的对照兔 1 0 0 %死亡。上述结果表明 ,西藏林芝地区八一新村家兔急性死亡是由兔病毒性出血症病毒所致死。自制的西藏兔病毒性出血症灭活疫苗经安全、免疫效力等试验 ,推广应用效果好。