幽门螺杆菌毒性噬菌体分离纯化及模拟治疗研究

目的分离纯化幽门螺杆菌(Hp)的野生型毒性噬菌体,并采用体外模拟试验,探讨借口腔Hp保护噬菌体突破胃液屏障、释放子代噬菌体、侵染并治疗胃肠Hp感染的方法。方法以烛缸法培养Hp,用单层平板和双层平板实验分离纯化噬菌体,采用体外模拟胃液环境处理对照组噬菌体和Hp保护的实验组噬菌体,以双层平板实验检测处理后噬菌体的杀菌效果。结果经过模拟胃液处理后,噬菌体溶菌活性随处理时间延长而降低,处理1.5h的实验组依然可形成噬斑,对照组不形成噬斑。结论口腔Hp可以帮助噬菌体抵抗胃液。

链球菌毒性噬菌体的分离与生物学特性研究

本研究以牛源链球菌48株为宿主,经双层琼脂平板反复纯化从污水中分离到毒性噬菌体SP48。透射电镜观察发现,SP48属于长尾噬菌体科;酶切分析表明,SP48的基因组大于60 kb,可被限制性核酸内切酶Eco R I、Xho l I和Bln I切开。对乙醚、氯仿不敏感,对40~45℃或pH 5~10的环境有很好的耐受性;最佳感染复数为10,潜伏期约30 min,爆发期约80 min,平均爆发量为45 PFU/cell。

牛源大肠埃希氏菌肌尾噬菌体的鉴定与特性研究

为了使大肠埃希氏菌噬菌体能在治疗大肠埃希氏菌所致疾病等方面发挥更好的作用,以牛源子宫内膜炎型大肠埃希氏菌为宿主,经双层琼脂纯化法从污水中分离到毒性噬菌体EP-CE。电镜下见EP-CE属肌尾病毒科,可被限制性内切酶DraⅠ切开,估算其双链DNA基因组大于50 kb;生物学特性研究表明EP-CE对40℃~55℃或pH 7~10的环境有一定耐受力;最佳MOI为0.01,潜伏期约30 min,爆发期约90 min,平均爆发量为26 PFU/cell;在与宿主菌共培养初始5 h内抗菌活性较强。