SDS-PAGE法检测产气荚膜梭菌毒素型研究

为了探索一种快速、准确检测产气荚膜梭菌毒素型的方法，以便有效预防控制该病的流行和发生，利用SDS-PAGE方法，对通过EusA鉴定的20株（A型16株、C型3株和D型1株）德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株，以及通过Multiplex-PCR鉴定的57株山东省疫区产气荚膜梭菌分离株外毒素蛋白的相对分子质量进行测定，以确定毒素的种类，进而确定菌株的毒素型。结果表明，产气荚膜梭菌标准株、德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株、山东省疫区产气荚膜梭菌分离株粗提外毒素的质量浓度分别为3．261，2．238～3．333，1．451～3．109mg／mL，精提外毒素的质量浓度分别为0．803，0．521～O．999，0．530～0．812mg／mL。SDS-PAGE法检测的20株德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株中A型17株、C型2株、D型1株，与EuSA检测结果的符合率为95．0％；SDS-PAGE检测的57株山东省疫区产气荚膜梭菌分离株全部是A型，与Multiplex-PCR检测结果的符合率为100％。说明应用SDS-PAGE方法对产气荚膜梭菌的检测结果与ELISA方法的检测结果有一定的差异性，与Multi-plex-PCR方法的检测结果一致。