中国沿海常见棘毒鱼类的毒性研究——日本鬼鱼由背鳍棘中Ⅰ型毒腺细胞形成的研究

用光、电镜方法研究了日本鬼鱼由背鳍棘中Ⅰ型毒腺细胞的形成过程。结果表明 :位于背鳍棘两侧纵沟内的毒腺组织周围有较致密的结缔组织的鞘膜包绕 ,该鞘膜钝性剥离后可见内面光滑 ,有Ⅰ型和Ⅱ型毒腺细胞的痕迹。而毒腺组织内下侧与毒棘的骨组织相连处结缔组织疏松 ,有许多小的梭形细胞 ;在梭形细胞之间及周围有新形成的幼稚腺细胞 ,其组织结构类似Ⅰ型毒腺细胞。透射电镜下可见该区域的结缔组织中除结缔组织的细胞及纤维成分以外 ,有许多大小不同的细胞 ,细胞单核 ,胞质内各种细胞器(粗面内质网、高尔基复合体、线粒体等 )发达。在不同的细胞内有形态和数量不同的类似溶酶体样物质 ,其内涵物类似Ⅰ型毒腺细胞胞质结构。推测毒腺组织内的毒腺细胞的发生与腺体下内侧的结缔组织内的梭形细胞有关 ,Ⅰ型细胞由幼稚细胞发育而来。

银环蛇心脏毒素类似物cDNA的克隆

采用SMART技术和RT PCR方法,从同一个银环蛇毒腺中克隆到了5种尚未报道过的心脏毒素类似物全长cDNA序列(MNCTL1 a、MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2)。5种序列中,MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2的长度均为505bp,包括5′非翻译区32bp,3′非翻译区212bp和其余261bp组成的一个完整开放阅读框;MNCTL1 a由于3′非翻译区24bp的缺失,全长cDNA仅为481bp。所得序列编码区部分与已报道的银环蛇心脏毒素类似物(cardiotoxin likeprotein)编码区cDNA序列的同源性达95.8%以上。我们克隆到的序列编码85个氨基酸组成的心脏毒素类似物前体,包括20个氨基酸的信号肽和65个氨基酸的成熟肽,与已知的心脏毒素类似物氨基酸组成有很高的同源性。运用AntheportV4.5软件分析,发现编码的蛋白质与眼镜蛇毒中心脏毒素有相似的结构和性质,推测它们可能有类似心脏毒素的功能。本研究首次报道了从同一个体的银环蛇毒腺中克隆到多个心脏毒素类似物全长cDNA序列,提示银环蛇心脏毒素类似物基因在该种蛇基因组中有多个拷贝,并在毒腺细胞中同时转录。