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原发性干燥综合征患者毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型3及其受体的变化及临床意义
被引量:
1
1
作者
黄翠平
周京国
+3 位作者
谢文光
青玉凤
殷玲
胡程飞
《中华临床免疫和变态反应杂志》
2013年第2期120-124,共5页
目的了解毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型3(muscarinic acetylcholine receptor M3,CHRM3)及毒蕈碱型乙酰胆碱受体3亚型抗体(M3 muscarinic acetylcholine receptor antibody,CHRM3-Ab)在原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,pSS)...
目的了解毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型3(muscarinic acetylcholine receptor M3,CHRM3)及毒蕈碱型乙酰胆碱受体3亚型抗体(M3 muscarinic acetylcholine receptor antibody,CHRM3-Ab)在原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,pSS)发病过程中的可能作用。方法川北医学院附属医院风湿科2010年4月至2011年12月门诊及住院pSS患者43例为pSS组,同期29名健康体检女性为正常对照组。收集两组临床资料及实验室指标。实时荧光定量聚合酶链式反应检测pSS患者及健康体检者外周血单个核细胞CHRM3转录水平,酶联免疫吸附试验检测血浆CHRM3-Ab浓度,进行CHRM3转录水平、CHRM3-Ab与临床指标的相关性分析。结果 pSS组CHRM3转录水平与CHRM3-Ab浓度显著高于正常对照组,差异均有统计学意义[(0.00014±0.00030)vs(0.00009±0.00004),P<0.05;(227.29±154.81)pmol/Lvs(141.44±71.04)pmol/L,P<0.01]。Spearman相关性分析发现,pSS患者CHRM3-Ab浓度与血细胞沉降率及IgG均呈负相关(r分别=-0.452、-0.470,均P<0.05)。结论 CHRM3转录水平和CHRM3-Ab在pSS患者的高表达可能在疾病发生发展中发挥重要作用;CHRM3-Ab可能通过与CHRM3非竞争性结合而抑制乙酰胆碱与其受体作用,导致腺体分泌减少。加强对CHRM3和CHRM3-Ab研究,有望为诊治pSS带来新契机。
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关键词
毒蕈碱
型乙酰胆碱
受体
亚型
3
毒蕈碱
型乙酰胆碱
受体
3
亚型
抗体
原发性干燥综合征
下载PDF
职称材料
激活M_3受体减轻CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤
2
作者
彭源
赵延礼
+4 位作者
苏晓灵
沈国平
龙启福
秦海兰
王嵘
《基础医学与临床》
CSCD
2018年第4期458-463,共6页
目的探讨卡巴胆碱(CCH,毒蕈碱受体亚型3特异性激动剂)激活毒蕈碱受体亚型3(M_3-mAChR)在氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤中的作用及机制。方法正常大鼠心肌细胞系H9c2作为对照组,利用CoCl_2建立低氧损伤模型,选用M_3受...
目的探讨卡巴胆碱(CCH,毒蕈碱受体亚型3特异性激动剂)激活毒蕈碱受体亚型3(M_3-mAChR)在氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤中的作用及机制。方法正常大鼠心肌细胞系H9c2作为对照组,利用CoCl_2建立低氧损伤模型,选用M_3受体特异性激动剂CCH及其特异性阻断剂4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(4-DAMP)对低氧损伤组进行干预。噻唑蓝比色法(MTT)检验细胞增殖活力;流式细胞计量术检测细胞凋亡;Western blot检测M_3受体、HIF-1α、HO-1和caspase-3蛋白表达水平。结果低氧模型组细胞凋亡率显著增高(P<0.01),细胞增殖显著降低(P<0.01);HIF-1α、caspase-3和HO-1蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。用CCH干预后细胞凋亡率明显下降(P<0.01),细胞增殖活力明显增加(P<0.01);M_3受体、HIF-1α和HO-1蛋白表达水平显著上升(P<0.01);caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。应用4-DAMP干预后,由CCH介导的上述相关作用被抑制。结论 CCH激活M_3受体抑制CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2的低氧损伤,机制可能与HIF-1α和HO-1的蛋白表达水平上调有关。
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关键词
毒蕈碱受体亚型3
低氧损伤
低氧诱导因子-1Α
血红素加氧酶-1
下载PDF
职称材料
限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠
被引量:
3
3
作者
高旭
马宁
+7 位作者
王大勇
张赫
张艳芬
徐亚
贺军
徐书会
霍亚丽
杜智敏
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期404-409,共6页
CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶...
CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。
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关键词
CRISPR/Cas9
毒蕈碱
型乙酰胆碱
受体
M
3
亚型
遗传改变小鼠
纯合子
下载PDF
职称材料
题名
原发性干燥综合征患者毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型3及其受体的变化及临床意义
被引量:
1
1
作者
黄翠平
周京国
谢文光
青玉凤
殷玲
胡程飞
机构
川北医学院附属医院风湿血液科
出处
《中华临床免疫和变态反应杂志》
2013年第2期120-124,共5页
文摘
目的了解毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型3(muscarinic acetylcholine receptor M3,CHRM3)及毒蕈碱型乙酰胆碱受体3亚型抗体(M3 muscarinic acetylcholine receptor antibody,CHRM3-Ab)在原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,pSS)发病过程中的可能作用。方法川北医学院附属医院风湿科2010年4月至2011年12月门诊及住院pSS患者43例为pSS组,同期29名健康体检女性为正常对照组。收集两组临床资料及实验室指标。实时荧光定量聚合酶链式反应检测pSS患者及健康体检者外周血单个核细胞CHRM3转录水平,酶联免疫吸附试验检测血浆CHRM3-Ab浓度,进行CHRM3转录水平、CHRM3-Ab与临床指标的相关性分析。结果 pSS组CHRM3转录水平与CHRM3-Ab浓度显著高于正常对照组,差异均有统计学意义[(0.00014±0.00030)vs(0.00009±0.00004),P<0.05;(227.29±154.81)pmol/Lvs(141.44±71.04)pmol/L,P<0.01]。Spearman相关性分析发现,pSS患者CHRM3-Ab浓度与血细胞沉降率及IgG均呈负相关(r分别=-0.452、-0.470,均P<0.05)。结论 CHRM3转录水平和CHRM3-Ab在pSS患者的高表达可能在疾病发生发展中发挥重要作用;CHRM3-Ab可能通过与CHRM3非竞争性结合而抑制乙酰胆碱与其受体作用,导致腺体分泌减少。加强对CHRM3和CHRM3-Ab研究,有望为诊治pSS带来新契机。
关键词
毒蕈碱
型乙酰胆碱
受体
亚型
3
毒蕈碱
型乙酰胆碱
受体
3
亚型
抗体
原发性干燥综合征
Keywords
holinergie receptor, muscarinic
3
M
3
muscarinic acetylcholine receptor antibody
primary Sjogren' s syndrome
分类号
R593.2 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
激活M_3受体减轻CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤
2
作者
彭源
赵延礼
苏晓灵
沈国平
龙启福
秦海兰
王嵘
机构
青海大学医学院
青海大学医学院基础医学研究中心
青海省人民医院
出处
《基础医学与临床》
CSCD
2018年第4期458-463,共6页
基金
国家自然科学基金(81460051)
青海省自然科学基金(2015-ZJ-744)
文摘
目的探讨卡巴胆碱(CCH,毒蕈碱受体亚型3特异性激动剂)激活毒蕈碱受体亚型3(M_3-mAChR)在氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤中的作用及机制。方法正常大鼠心肌细胞系H9c2作为对照组,利用CoCl_2建立低氧损伤模型,选用M_3受体特异性激动剂CCH及其特异性阻断剂4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(4-DAMP)对低氧损伤组进行干预。噻唑蓝比色法(MTT)检验细胞增殖活力;流式细胞计量术检测细胞凋亡;Western blot检测M_3受体、HIF-1α、HO-1和caspase-3蛋白表达水平。结果低氧模型组细胞凋亡率显著增高(P<0.01),细胞增殖显著降低(P<0.01);HIF-1α、caspase-3和HO-1蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。用CCH干预后细胞凋亡率明显下降(P<0.01),细胞增殖活力明显增加(P<0.01);M_3受体、HIF-1α和HO-1蛋白表达水平显著上升(P<0.01);caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。应用4-DAMP干预后,由CCH介导的上述相关作用被抑制。结论 CCH激活M_3受体抑制CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2的低氧损伤,机制可能与HIF-1α和HO-1的蛋白表达水平上调有关。
关键词
毒蕈碱受体亚型3
低氧损伤
低氧诱导因子-1Α
血红素加氧酶-1
Keywords
M
3
-mAChR
hypoxia injury
HIF-1α
HO-1
分类号
R541 [医药卫生—心血管疾病]
下载PDF
职称材料
题名
限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠
被引量:
3
3
作者
高旭
马宁
王大勇
张赫
张艳芬
徐亚
贺军
徐书会
霍亚丽
杜智敏
机构
哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
哈尔滨医科大学附属第二临床医学院实验诊断教研室
哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期404-409,共6页
基金
哈尔滨医科大学于维汉院士杰出青年培养基金(2014)
黑龙江省博士后科研启动金(No.LBH-Q15108)
+1 种基金
高等学校博士学科点专项科研基金项目(No.20122307110002)
国家自然科学基金项目(No.81570534)~~
文摘
CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。
关键词
CRISPR/Cas9
毒蕈碱
型乙酰胆碱
受体
M
3
亚型
遗传改变小鼠
纯合子
Keywords
CRISPR/Cas9
muscarinic acetylcholine receptor subtype M
3
genetically modified mice
homozygote
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
原发性干燥综合征患者毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型3及其受体的变化及临床意义
黄翠平
周京国
谢文光
青玉凤
殷玲
胡程飞
《中华临床免疫和变态反应杂志》
2013
1
下载PDF
职称材料
2
激活M_3受体减轻CoCl_2诱导的大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤
彭源
赵延礼
苏晓灵
沈国平
龙启福
秦海兰
王嵘
《基础医学与临床》
CSCD
2018
0
下载PDF
职称材料
3
限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠
高旭
马宁
王大勇
张赫
张艳芬
徐亚
贺军
徐书会
霍亚丽
杜智敏
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
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