毒蕈碱胆碱受体3在肺癌的研究进展

毒蕈碱胆碱受体3（M3受体）在多种肿瘤组织均有表达，并与多种细胞重要信号通路相关联，在肿瘤的增殖、侵袭、转移等方面起到重要作用；同时，M3受体参与多种肺部疾病如COPD的病理生理过程。近年来，M3受体在肺癌中的研究受到较大的重视，M3受体有可能成为肺癌预防治疗的新靶点。

小细胞肺癌中M3R的表达及意义

目的观察毒蕈碱胆碱受体3(muscarinic cholinergic receptor 3,M3R)在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的表达,探讨M3R表达与SCLC分期及临床病理特征的相关性。方法采用免疫组化SP两步法检测60例SCLC(局限期和广泛期各30例)癌组织中M3R的表达,与正常肺组织对比观察M3R表达的差异;回顾性分析所有SCLC病例的病史、体征、支气管镜、胸部CT、颅脑CT、骨扫描、腹部CT等检查,电话随访患者的生存时间。结果 M3R在SCLC中的表达明显高于正常肺组织;M3R在局限期和广泛期SCLC中的表达差异无统计学意义;M3R表达与患者年龄、性别、淋巴结转移无关,与是否吸烟有关;Kaplan-Meier生存曲线显示:M3R阴性者的生存期较阳性者长,差异有统计学意义。结论 SCLC癌组织中M3R的表达水平明显高于正常肺组织,M3R表达与SCLC预后有相关性。

M3R激动剂通过激活PI3K/AKT信号途径促进肺癌细胞A549的上皮间质转化

目的:探讨毒蕈碱胆碱受体3(muscarinic receptor 3,M3R)激动剂卡巴胆碱促进人肺癌A549细胞上皮间质转化的可能信号通路。方法:用400μmol/L卡巴胆碱刺激人肺癌A549细胞,在倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化,应用划痕愈合实验和Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力;应用q PCR技术检测上皮间质转化相关蛋白波形蛋白(vimentin)和E钙黏蛋白(E-cadherin)m RNA水平的变化;应用Western blot技术检测p-AKT、vimentin和E-cadherin蛋白水平的变化。结果:卡巴胆碱刺激人肺癌A549细胞后,细胞形态发生明显改变,由不规则多边形逐渐向梭形转化、细胞间紧密结合逐渐变得松散,细胞迁移和侵袭能力增强;vimentin的m RNA和蛋白表达量明显增加,E-cadherin的m RNA和蛋白水平降低,磷酸化的AKT蛋白水平增加,且这些变化均可被M3R特异性抑制剂4-DAMP所抑制(P<0.05)。结论:卡巴胆碱可通过激活PI3K/AKT信号途径促进人肺癌A549细胞发生上皮间质转化。

M3R拮抗剂对人小细胞肺癌增殖、凋亡及粘附的影响

背景与目的研究表明毒蕈碱胆碱受体3(muscarinic receptor 3,M3R)在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要的作用。本研究旨在探讨M3R在人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株SBC3的表达,M3R拮抗剂对细胞增殖、凋亡及粘附的影响。方法体外培养SBC3细胞,RT-PCR和Western blot检测M3R的表达。MTT法及流式细胞法检测M3R拮抗剂(4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide,4-DAMP)对细胞增殖和凋亡的影响。流式细胞法检测细胞整合素的表达及碘化乙酰胆碱(acetylcholine iodide,Ach)和4-DAMP对整合素表达的影响。纤维结合蛋白(Fn)包被的96孔板用以研究Ach、4-DAMP及整合素抗体对细胞粘附的作用。结果 SBC3细胞表达M3R,4-DAMP浓度依懒性抑制细胞增殖。与对照组比较,10-4 M 4-DAMP能够明显地增加SBC3细胞凋亡。SBC3细胞表达αvβ1和α5β1整合素,10-4 M Ach刺激细胞粘附(P<0.01)的作用几乎被10-5M 4-DAMP、5μg/m L抗-β1抗体或抗-αv和α5抗体完全阻断(P<0.01),但Ach及4-DAMP不影响αv、α5和β1的表达水平。结论 SBC3细胞表达M3R,M3R拮抗剂能抑制细胞的增殖并促进凋亡。其抑制粘附的作用是通过抑制细胞含β1的整合素(αvβ1和α5β1)的功能实现的。