毒蕈碱能受体在色素上皮细胞吞噬中的作用

目的探索毒蕈碱能受体在ＲＣＳ大鼠视网膜色素上皮细胞（ＲＰＥ）吞噬功能中的作用方法采用富含甘露醇的糖蛋白的辣根过氧化酶（ＨＲＰ）作为吞噬刺激物，加到ＲＣＳ大鼠ＲＰＥ组织培养块中，观察毒蕈碱能受体激动剂／拮抗剂对ＲＣＳ大鼠ＲＰＥ细胞吞噬ＨＲＰ的影响。结果加入卡巴胆碱的实验组ＲＰＥ细胞质内ＨＲＰ吞噬颗粒数量明显多于未加卡巴胆碱或阿托品的对照组（Ｐ＜０．０１）和加入卡巴胆碱和阿托品的抑制组（Ｐ＜０．０１）。结论毒蕈碱能受体存在于ＲＣＳ大鼠ＲＰＥ细胞膜上。

去甲肾上腺素再摄取抑制剂联合抗毒蕈碱剂治疗阻塞性睡眠呼吸暂停的研究进展

阻塞性睡眠呼吸暂停因睡眠中反复发生呼吸暂停和(或)低通气,导致慢性间歇性低氧伴高碳酸血症、睡眠结构紊乱,进而对全身器官造成损害。近年来研究发现,除了上气道结构异常,咽部扩张肌功能减退、上气道的不稳定也易造成上气道狭窄,且与睡眠中去甲肾上腺素的撤退和乙酰胆碱的增多有关,联合使用去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱剂可通过增加颏舌肌活动、改善气道稳定性等途径降低阻塞性睡眠呼吸暂停的严重程度,且安全性较好。

吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱受体亚型基因的表达

目的 观察吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱型乙酰胆碱受体m1～ 5的表达。方法 以 β actin为内标 ,用RT PCR方法检测m1～ 5的表达。结果 吗啡依赖大鼠脊髓m1～ 5受体和脑干中m1 和m2 表达较正常对照组明显升高 ,注射纳洛酮 1h后脊髓m1～ 4 和脑干m1 表达较依赖组减少。东莨菪碱 (0 5mg·kg- 1 ,ip)或呱伦西平 (10mg·kg- 1 ,ip)明显减少吗啡戒断症状 ,呱伦西平处理后脊髓m1 ,m2 ,m3和m5表达较戒断对照组增加 ,东莨菪碱处理后脊髓m2 ,m3和m4 表达增加。结论 脊髓M受体适应性改变是吗啡戒断症状表达的生物学基础。

盐酸小檗碱对毒蕈碱型受体的作用

目的：研究盐酸小檗碱对乙酰胆碱系统的影响。方法：采用离体血管环、离体支气管螺旋体及放射配基受体结合实验等方法。结果：较低浓度的盐酸小檗碱（Ｂｅｒ）对乙酰胆碱的舒张反应有浓度依赖性的增强作用；而较高浓度的Ｂｅｒ可浓度依赖性地直接舒张带内皮的动脉环，此作用在去内皮或阻断Ｍ受体后被完全抑制。在豚鼠离体气管条上，Ｂｅｒ可引起浓度依赖性的收缩反应，而阿托品可阻断这种作用。放射配基受体结合实验显示盐酸小檗碱可特异性与大鼠脑组织的毒蕈碱受体结合，Ｋｉ值为１６μｍｏｌ·Ｌ－１。结论：盐酸小檗碱可激动毒蕈碱受体，从而引起血管的内皮依赖性的舒张反应及支气管的收缩。

慢性反复给予烟碱对中枢毒蕈碱受体功能的调节作用

每天２次ｓｃ烟碱２．０ｍｇ·ｋｇ－１１０ｄ后，大鼠对烟碱诱发体温下降，转杆操作能力下降和行为惊厥的作用产生耐受，槟榔碱诱发大鼠脑电癫痫样放电的剂量下降．每天２次ｓｃ烟碱２．０和／或ｓｃ槟榔碱５．０ｍｇ·ｋｇ－１ｉｐ１４ｄ后，烟碱与槟榔碱联用可诱发大鼠大脑皮层毒蕈碱受体数目减少，并为美加明１．０ｍｇ·ｋｇ－１ｓｃ１４ｄ对抗．提示慢性反复给予烟碱可增强大鼠中枢毒蕈碱受体对其激动剂槟榔碱介导脑电癫痫样放电和受体下行性调节的敏感性．

毒蕈碱型胆碱能受体M3调控肝癌细胞侵袭转移的研究

目的探讨毒蕈碱型胆碱能受体M3(muscarinic cholinergic receptors 3,ChRM3)活化对人肝癌细胞侵袭、转移能力的影响及其分子机制。方法 Western blot检测两种人肝癌细胞株Hep G2和SMMC-7721中ChRM3受体的表达;采用氯贝胆碱(Beth)及达菲那新(UK88525)处理肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞,分为空白对照组、Beth组、Beth+UK88525组、UK88525组,经处理48 h后,Transwell实验检测两种肝癌细胞经不同分组处理后侵袭、迁移能力的变化,Western blot检测各组细胞中上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白的表达及下游信号通路PI3K/Akt的变化;采用shRNA干扰质粒经Lipofectamine 2000TM转染肝癌细胞Hep G2以沉默ChRM3,分为空白对照组、Beth组、Beth+sh ChRM3组、sh ChRM3组,分别检测细胞的侵袭、转移能力及EMT、下游PI3K/Akt的改变。结果 Hep G2和SMMC-7721两种肝癌细胞中均有ChRM3受体的表达;Transwell实验显示:Beth单独处理组对肝癌细胞的迁移和侵袭有明显的促进作用,而UK88525能够抑制Beth对肝癌细胞迁移侵袭能力的促进作用(P<0.05);Western blot结果显示:Beth单独处理组能够上调EMT标志蛋白N-Cadherin和Vimentin,下调E-Cadherin的表达,UK88525处理后能够明显抑制Beth促进Hep G2细胞EMT的过程(解除Beth对Hep G2细胞EMT的促进过程),同时也能够抑制PI3K/Akt的活化(P<0.05);干扰质粒沉默ChRM3受体同样能够抑制Beth促肝癌细胞迁移、侵袭的作用,并且抑制Beth诱导的EMT和下游PI3K/Akt的活化(P<0.05)。结论 ChRM3活化能够通过PI3K/Akt信号通路促进肝癌细胞的侵袭和转移。

微丝在低渗牵张诱导毒蕈碱电流增加中的作用(英文)

在急性分离的豚鼠胃窦平滑肌细胞上 ,利用膜片钳技术的传统全细胞模式记录离子电流的方法 ,探讨微丝在低渗牵张诱导毒蕈碱电流增加中的作用。当豚鼠胃窦平滑肌细胞的膜电位钳制在 - 2 0mV时 ,灌流液中 5 0μmol/L 卡巴胆碱 (carbachol,CCh)或电极内液中 0 5mmol/LGTPγS均可引导毒蕈碱电流 (muscariniccurrentICCh) ,低渗牵张 ( 2 0 2mOsmol/L)分别使其增加 145± 2 7%和 183± 3 0 % ;当电极内液中加入 2 0 μmol/L的细胞松弛B (一种微丝骨架的解聚剂 )时 ,低渗牵张使ICCh只增加 70± 6% ;而电极内液中加入 2 0 μmol/L的鬼笔环肽 (一种微丝骨架的稳定剂 )则使ICCh增加了 5 45± 81%。结果表明 ,低渗牵张可增加由卡巴胆碱或GTPγS诱导的毒蕈碱电流 。

大鼠不稳定膀胱与毒蕈碱受体亚型密度关系的实验研究

为了探讨毒蕈碱受体 (MR)亚型密度变化与不稳定膀胱发生之间的关系 ,建立不稳定膀胱大鼠模型 ,采用RT PCR方法测定不稳定膀胱及对照组逼尿肌MR亚型密度。结果显示 ,对照组和不稳定膀胱组逼尿肌组织均含有m2 RNA和m3 RNA ,没有检测到m1、m2 和m3 亚型的mRNA。正常对照组膀胱逼尿肌m2 RNA含量 (1 6 7± 0 4 2 )明显高于m3 RNA(0 6 4± 0 19) ,两者之比约 2 5 9∶1;不稳定膀胱逼尿肌中m2 和m3 受体密度均增加 ,分别为 (2 0 3± 0 6 5 )和(1 5 3± 0 4 6 ) ,m3 增加更明显(P <0 0 1) ,两者比值显著缩小 ,约 1 4∶1。提示不稳定膀胱的产生与MR亚型上调及M2 R、M3

毒蕈碱样胆碱能受体在慢性阻塞性肺疾病中的作用

慢性阻塞性肺疾病（COPD）以中央气道黏液分泌增加,小气道壁损伤和修复反复发生导致气道重塑,引起固定性气道阻塞及不可逆性肺泡结构丧失为主要的病理特征。毒蕈碱样胆碱能受体（m AchR,简称M受体）是气道中主要的副交感神经递质,通过胆碱能神经释放的乙酰胆碱（Ach）调节气道平滑肌张力和黏液的分泌,是COPD患者气道最主要的可逆性成分。

反复发作性眩晕豚鼠前庭内侧核毒蕈碱受体M2、M3表达的研究

目的制造豚鼠迷路瘘管导致的反复发作的眩晕模型,观察不同时程豚鼠前庭内侧核(MVN)毒蕈碱受体M2、M3亚型的表达变化。以探讨前庭代偿的可能机制。方法选择成年实验用豚鼠88只,并随机分配为A组(假手术组,8只)、B组(单侧迷路损毁组,40只)、C组(迷路瘘管+耳镜鼓气组,40只)。B、C组手术后,依据豚鼠所需不同存活时间(术后1天、3天、1周、2周、3周)随机选取8只,A组作为对照组存活3周。所有豚鼠灌流后取脑干,用免疫组织化学染色,观察前庭内侧核毒蕈碱受体M2、M3亚型的表达变化,并与假手术组比较。结果 B、C组术后均可导致双侧MVN区毒蕈碱受体M2、M3亚型表达减少,术后1天表达最少,术后3天至术后7天表达有逐渐增加趋势,术后7天时B组和假手术组比较表达无差异,而C组和假手术组比较表达差异具有统计学意义(P<0.05)。直到术后2周,C组和假手术组比较表达无差异。B、C组术后各时期(术后2周前)相比,C组的表达弱于B组。各组对侧的变化趋势和术侧相同。结论1.豚鼠MVN存在毒蕈碱受体M2、M3亚型,且M3受体的表达可能不及M2受体的丰富。它们可能在前庭代偿的早期促进了前庭代偿的正常进行。2.前庭代偿除胆碱能系统参与外,可能还涉及到其他神经递质或化学物质的参与。3.进一步证明迷路瘘管导致的反复发作性眩晕模型的造模是成功的。

毒蕈碱样乙酰胆碱受体及其信号转导

毒蕈碱样乙酰胆碱受体 (MAChRs)是G蛋白偶联受体 (GPCRs)超家族中的一员 ,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白 (G proteins)是一类具有GTP酶活性的蛋白质 ,由α、β、γ三个亚基构成。其中α亚基结合GDP或GTP ,分别代表G蛋白的非活化和活化状态。M受体与Gi/Go或Gq/ 11间的作用机制仍在探讨中 ,但基本过程与Gs介导的信号转导模式相似。激动剂持续作用后 。

毒蕈碱型M5受体亚型及生物学特性

M5是最后一个被克隆出的乙酰胆碱毒蕈碱型受体亚型,具有G蛋白偶联受体家族的基本结构特征, 其信号转导方式既可以与G蛋白偶联,激活多种效应酶 (腺苷酸环化酶、磷脂酶C、磷脂酶A2 )产生相应的生物学效应,又可作用于离子通道来调节细胞间的信号传递。M5生理作用主要与调节中枢NO的生成和DA的释放有关,可能为药物滥用成瘾、DA系统功能障碍性疾病、阿尔采末病、脑缺血等的药物治疗提供一个新靶标。

七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M2表达和认知功能的影响

目的探讨不同剂量七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M2受体亚型(mAChRM2)表达的影响及与认知功能的关系。方法40只SD大鼠随机分为空白对照组、1.5%sevⅠ组、1.5%sevⅡ组、3.0%sevⅠ组和3.0%sevⅡ组,每组8只。采用Y型迷宫进行学习记忆能力测试,通过RT-PCR法和免疫组织化学法测定大鼠海马mAChRM2表达。结果与对照组相比,3.0%sevⅠ组学习记忆能力下降(P<0.05),而且海马mAChRM2表达显著减少(P<0.05)。其余各组差异无显著性。结论给予大鼠七氟烷麻醉时,大鼠学习记忆能力随七氟烷剂量加大,在麻醉后1d学习记忆能力减弱,可能引起了短时POCD,这些可能与大鼠海马mAChRM2减少有关。

毒蕈碱M2受体在脑震荡大鼠脑内的表达变化

为了探讨脑震荡(brain concussion,BC)后认知功能障碍的大鼠中枢毒蕈碱M2受体的表达变化,本实验应用金属单摆式机械打击装置复制单纯性脑震荡大鼠模型,采用免疫组织化学结合图像分析的方法,观察BC后大脑前额叶皮质(PFC)、海马CA1-CA4区、丘脑、尾壳核(CPU)、Broca斜角带垂直支(VDB)和内侧隔核(MSN)区M2受体蛋白的表达情况。结果显示:在损伤后M2受体蛋白的表达在海马CA1-CA4区出现轻微下降(P>0.05),在PFC、VDB、CPU和MSN区即刻呈轻度上升,随后又下降,但与正常组相比无显著性差异(P>0.05);在伤后1、8、24d组大鼠丘脑M2受体的表达呈明显下降,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。以上结果提示M2受体的表达在丘脑出现明显下调的改变可能与BC认知功能的改变有关。

毒蕈碱样乙酰胆碱受体功能的分子基础

毒蕈碱样乙酰胆碱受体功能的分子基础高占国刘传缋（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）中国图书分类号Ｒ９６６毒蕈碱样乙酰胆碱受体（Ｍ受体）属于与Ｇ蛋白相偶联的受体超大家族，它参与呼吸、循环、运动、体温调节和学习记忆等重要生理功能。受体药理学...

激活毒蕈碱乙酰胆碱受体调控下颌下腺分泌的机制研究

下颌下腺作为三大唾液腺之一,其所分泌的唾液占静止性唾液的60%~65%,对维持摄食、味觉、抑制或杀灭病菌、保护口腔软组织及牙齿等起重要作用。全身性疾病如舍格伦综合征[又称干燥综合征(Sj gren’s syndrome, SS)]、IgG4相关性疾病等,以及局部疾病如慢性下颌下腺炎、下颌下腺放射性损伤等,可引起腺体的分泌功能低下,严重者不仅有明显的口腔黏膜干燥,还可继发猖獗龋和念珠菌感染等。2018年一项流行病学研究显示,唾液低分泌与日本社区老年男性10年死亡率呈正相关,可作为一个潜在的健康预测指标[1]。全面、深入地认识下颌下腺分泌的调控机制对探索有效的干预措施和防治唾液腺分泌功能低下具有重要的意义。

毒蕈碱受体亚型对人食管下括约肌的调节作用

目的探讨毒蕈碱受体亚型对人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维胆碱能收缩的调节作用。方法选取高位食管中段癌行食管大部切除术患者32例，取食管、胃接合部标本分离套索纤维和钩状纤维，做M1～M4受体选择性拮抗剂哌仑西平、美索曲明、4-DAMP、托品酰胺的Schild曲线，并由此计算pA2。结果①M1～M4受体选择性拮抗剂均使ACh诱导套索纤维和钩状纤维的浓度—效应曲线发生右移，每条拮抗曲线形状类似。②4-DAMP在两肌纤维的pA2分别是8．18±0．76和8．05±1. 11，较其它3种拮抗剂大（F=47，4，P=0．00），而同一拮抗剂在两肌纤维的pA2无差异（F=1．36，P=0．24）。结论ACh诱导两种肌纤维的收缩主要由M3受体介导；2种肌纤维间没有毒蕈碱受体亚型功能的差异。

氨甲酰胆碱通过M_2毒蕈碱受体增加豚鼠心肌细胞钠钙交换电流(英文)

本文旨在研究氨甲酰胆碱(carbachol, CCh)对豚鼠心肌的正性变力性机制。用Axon200A膜片钳放大器观察CCh 对电压钳制下的豚鼠心肌细胞L-型钙电流(ICa)和钠钙交换电流(INa/Ca)的效应。结果表明, CCh(100 μmol/L)分别使正向INa/Ca从对照组的(1.2 ± 0.1) pA/pF 增加到(2.0 ± 0.3) pA/pF,使反向 INa/Ca 从对照组的(1.3 ± 0.5) pA/pF 增加到(2.1 ± 0.8) pA/pF (P<0.01)。CCh对ICa无影响。CCh 对INa/Ca的激动作用可被阿托品和methoctramine所阻断。以上结果提示, CCh 对豚鼠心脏的正性变力作用是通过激动了钠钙交换,而且是 M2 毒蕈碱受体所介导的。

NOS抑制剂和MK-801对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱型受体表达的影响

目的 观察NMDA受体拮抗剂和NOS抑制剂对吗啡依赖大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型表达的影响。方法 RT PCR方法检测m1 5mRNA水平。结果 吗啡依赖大鼠脊髓注射纳洛酮 1h后脊髓m1 、m2 、m3和m4 及脑干m1 表达较依赖组减少 ,MK80 1 (0 .1 2 5mg·kg- 1 )处理后脊髓m2 、m3和m5以及脑干m2 和m5表达增加 ,脊髓和脑干m1 和m4 表达减少 ;NOS抑制剂L NAME(1 0mg·kg- 1 )处理后脊髓和脑干m1 、m3、m5受体表达减少。结论 NMDA受体拮抗剂以及NOS抑制剂对M受体亚型基因调控是控制戒断症状的机制之一。