应用毒力基因DNA微阵列技术快速鉴定大肠埃希菌的致病型

大肠埃希菌(简称大肠杆菌)是寄居在人和动物肠道的常见菌,其中少数具有致病性,主要引起肠道感染、泌尿系统感染、败血症以及脑膜炎3类疾病,依其毒力特性和所致疾病症状不同。

乙型肝炎病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立及临床应用

目的建立 SYBR Green I实时荧光定量 PCR检测乙型肝炎病毒 DNA的快速方法，并探讨其临床应用价值。方法根据GenBank公布的Hepatitis B virus gp1基因序列设计引物，建立SYBR Green I实时荧光定量PCR，并对反应体系和扩增程序进行优化。定量标准品通过基因克隆方法获得，同时以浙江省夸克公司 HBV DNA定量检测试剂盒作对照，应用于随机选取的100份乙型肝炎患者血清检测。结果 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR 检出限范围为5＆#215;102 copies／ml～5＆#215;108 copies／ml，HBV DNA浓度与CT值有良好线性关系，无交叉反应，整个过程仅需2.5 h。在随机抽取的100份临床标本应用中，与浙江省夸克公司的 HBV荧光定量 PCR检测试剂相比，建立的 SYBR Green I实时荧光定量PCR体系灵敏度100％，特异度92.5％。结论 SYBR Green实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强，可用于乙型肝炎患者病情监测，有效指导临床用药，准确评价 HBV感染者的病情。

解毒胶囊诱导放疗耐受性乳腺肿瘤的再致敏机制研究

目的体内体外评估解毒胶囊含药血清对放疗耐受性乳腺肿瘤细胞的杀伤效果,探讨其潜在作用机制。方法将解毒胶囊制备成溶液给予大鼠连读灌胃1周制备含药血清,在细胞水平,利用MTT法测试该含药血清对正常及放疗耐受性乳腺肿瘤细胞的杀伤效果,获得其半数抑制剂量(IC50)。利用Western Blot方法检测DNA损伤通路因子MDM2、p53及Chk1的磷酸化水平。最后,利用裸鼠成瘤实验,观察不同浓度含药血清对放疗耐受肿瘤细胞成瘤的抑制效果。结果10%含药血清能够明显抑制正常细胞生长(P<0.01),但对放疗耐受乳腺肿瘤细胞无明显效果(P=0.06)。当浓度提升到20%左右时,能够显著影响此类细胞增殖(P<0.05)。与正常细胞相比,放疗耐受细胞的DNA损伤修复通路显著活化,MDM2、p53及Chk1的磷酸化水平均明显升高。含药血清处理后能够反转该通路的活化。相应地,给予放疗耐受肿瘤细胞诱导的体内肿瘤不同浓度的含药血清处理,能够剂量依赖的抑制肿瘤生长。结论含药血清可逆转放疗耐受细胞的DNA损伤修复能力,在一定水平可杀伤肿瘤。提示该血清可与临床乳腺肿瘤放疗相结合达到更好治疗乳腺癌的目的。

单用或联合应用泛昔洛韦和肝炎灵对乙型肝炎血清标志物的影响

目的观察单用或联合应用泛昔洛韦和肝炎灵对乙型肝炎血清标志物的影响,探讨泛昔洛韦及泛昔洛韦和肝炎灵联合应用抗HBV的疗效。方法112例初治的慢性乙肝患者,采用分层随机化法分为3组。泛昔洛韦组39例,泛昔洛韦500mg,tid;肝炎灵组33例,肝炎灵4ml,肌注,qod;联合用药组40例,泛昔洛韦+肝炎灵。每组治疗24周,随访24周。治疗前与治疗后1、3、6、12个月时复查肝功能、乙肝血清标志物和HBVDNA,并观察药物不良反应。结果治疗结束后3组HBVDNA阴转率分别为43.6%、18.2%、72.5%,ALT复常率分别为69.2%、48.5%、90.0%,联合用药但与肝炎灵组、泛昔洛韦组比较有统计学差异(P<0.05);HBeAg阴转率分别为17.9%、9.1%、25.0%;HBeAg抗HBe血清转换率分别为10.3%、9.1%、17.5%,3组之间比较均无统计学差异。随访24周3组HBVDNA阴转率分别为28.2%、15.2%、50.0%;HBeAg阴转率分别为12.8%、9.1%、27.5%。治疗中未发现明显的不良反应。结论泛昔洛韦抑制HBVDNA优于肝炎灵,联合用药能提高HBVDNA阴转率,泛昔洛韦对促进HBeAg阴转、HBeAg抗HBe血清转换的作用不明显,联合用药也未能提高此作用;但联合用药增加HBeAg阴转的持续应答率。