Xpert MTB/RIF与改良罗氏比例法药敏试验检测利福平药敏的临床价值

目的对比Xpert MTB/RIF与改良罗氏比例法药敏试验检测利福的平药敏结果。方法选取2019年7月—2022年4月淮安市第四人民医院住院或者门诊中同时进行Xpert MTB/RIF和改良罗氏比例法药敏试验检测利福平药敏的246例肺结核患者为研究对象,比较两种方法检测利福平的药敏情况。结果Xpert MTB/RIF和改良罗氏比例法药敏试验检测利福平的耐药率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=1.15,P>0.05)。比例法药敏试验检测敏感,Xpert MTB/RIF耐药有8例;比例法药敏试验检测耐药,Xpert MTB/RIF敏感0例。246份标本经Xpert MTB/RIF检测出利福平耐药有36例,在结核杆菌RRDR设计ProbeA、ProbeB、ProbeC、ProbeD、ProbeE 5条探针中,Xpert MTB/RIF系统检测利福平耐药位点以ProbeE最高63.9%。以改良罗氏比例法药敏试验为金标准Kappa=0.86。结论Xpert MTB/RIF检测利福平的药物敏感性用时短,高通量,灵敏度高,特异度高。

MGIT 960和比例法对结核分枝杆菌药物敏感性试验的对比研究

目的评价BACTEC MGIT960检测8种抗结核药物耐药性的效果。方法用MGIT960对结核杆分枝杆菌临床分离菌株进行抗结核药物异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果进行比较分析。结果用MGIT960法与L-J比例法对118株结核分枝杆菌临床分离株进行异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星、乙硫异烟胺的耐药性检测,两种方法的符合率分别为97.5%(115/118)、92.4%(109/118)、96.6%(114/118)、84.7%(100/118)、94.9%(112/118)、94.1%(111/118)、97.5%(115/118)、85.6%(101/118)。MGIT960完成一线/二线药物药敏试验的时间平均为8.9和8.3天,L-J法则分别为26.7天和26.1天,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MGIT960所得的药敏结果与传统比例法有较高的一致性,但检测时间较短,有利于耐药结核病人的早期诊断和治疗。

最低抑菌浓度法在耐药结核分枝杆菌药敏试验中的应用

目的分析最低抑菌浓度法(MIC法)在耐药结核分枝杆菌药敏试验中的应用价值。方法对129例临床培养阳性的结核分枝杆菌进行抗结核药物敏感性检测,以改良罗氏比例法药敏试验结果为金标准,分析微量MIC法的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值及诊断符合率。结果以改良罗氏比例法药敏试验为金标准,MIC法药敏试验对于链霉素(SM)药敏检测的灵敏度为100.0%,特异度为97.1%,阳性预测值为89.6%,阴性预测值为100.0%,诊断符合率为97.7%;对异烟肼(INH)药敏检测的灵敏度为96.3%,特异度为98.0%,阳性预测值为92.8%,阴性预测值为99.0%,诊断符合率为97.7%;对利福平(RFP)药敏检测的灵敏度为95.0%,特异度为99.1%,阳性预测值为95.0%,阴性预测值为99.1%,诊断符合率为98.4%;对乙胺丁醇(EMB)药敏检测的灵敏度为83.3%,特异度为99.1%,阳性预测值为90.9%,阴性预测值为98.3%,诊断符合率为97.7%;对卡那霉素(KAN)药敏检测的灵敏度为38.5%,特异度为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为93.5%,诊断符合率为93.8%;对氨基水杨酸(PAS)药敏检测的灵敏度为50.0%,特异度为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为96.8%,诊断符合率为96.9%;对卷曲霉素(CPM)药敏检测的灵敏度为66.6%,特异度为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为98.4%,诊断符合率为98.4%。结论与改良罗氏比例法药敏试验比较,MIC法药敏试验对于4种一线抗结核药物链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇和3种二线抗结核药物卡那霉素、对氨基水杨酸、卷曲霉素的药物敏感性检测符合率较高,同时也是一种快速、操作方便、定量和准确的方法,结合药物的MIC值可以为临床个体化用药精准治疗提供依据,同时也有利于新药的研究和开发,更好的满足临床需求。

2种结核分枝杆菌耐药基因突变检测方法诊断利福平耐药结核病的评估研究

目的评价荧光定量PCR探针熔解曲线法(简称Melt PCR法)和Gene Xpert MTB/RIF技术(简称Xpert法),用于临床涂阳标本诊断利福平耐药结核病(Rifampicin resistant tuberculosis,RR-TB)的检测效能及应用价值。方法随机收集2016年2月至2018年6月在河北省胸科医院就诊肺结核患者结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)涂阳标本278例,应用传统的结核菌比例法药敏试验(对照检测方法)、Melt PCR法和Xpert法同时进行RR-TB情况的检测,分析Melt PCR法和Xpert法检测RR-TB的效能。结果3种方法同时对278例MTB阳性标本的利福平耐药进行检测,耐药检出结果差异无统计学意义(P>0.05)。与传统药敏试验结果相比,Melt PCR法和Xpert法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度和约登指数分别为97.96%、98.25%、92.31%、99.56%、98.20%、96.21%和95.92%、97.38%、88.68%、99.11%、97.12%、93.30%,Kappa值分别为0.940和0.904(P<0.05),均为高度一致。3种方法在痰液中的利福平耐药均显著高于支气管肺泡灌洗液,且差异具有统计学意义(P<0.05)。不同带菌量样本的利福平耐药检出结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论Melt PCR法和Xpert法用于临床涂阳标本中检测RR-TB具有相似的高灵敏度和特异度等检测性能,可结合实际需求在耐多药结核病防治中推广和应用。

基因芯片法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性分析

目的分析基因芯片法检测结核分枝杆菌（MTB）耐药性的灵敏度、特异度及符合率,为临床提供方便、准确、快速的MTB耐药性的检测方法。方法以DNA测序法为金标准,采用基因芯片法与比例法药敏试验同时对2014年8~12月收治的250例结核病患者的痰液标本分离MTB菌株进行耐药性检测,比较两种方法检测MTB对利福平和异烟肼耐药性的效能。结果基因芯片法与比例法药敏试验检测MTB对利福平的耐药率分别为3.0%、3.5%,对异烟肼的耐药率分别为6.7%、8.2%。以DNA测序法为金标准,基因芯片法检测MTB对利福平与异烟肼耐药性的灵敏度、特异度及符合率均高于比例法药敏试验,且检测时间短于比例法药敏试验,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论运用基因芯片法检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性,具有较高的灵敏度、特异度与符合率,可以代替比例法药敏试验成为检测MTB耐药性的有效方法。

基于药敏试验比例法的耐多药肺结核精准治疗效果的分析

目的探讨基于药敏试验比例法的耐多药肺结核(multidrug-resistant pulmonary tuberculosis,MDR-PTB)患者精准治疗的效果,为制订MDR-PTB治疗方案提供科学依据。方法选取2016年1月5日至2018年4月30日在深圳市慢性病防治中心行结核病治疗的180例MDR-PTB确诊患者,初始治疗方案为6个月阿米卡星、吡嗪酰胺、左氧氟沙星、乙胺丁醇、丙硫异烟胺/18个月吡嗪酰胺、左氧氟沙星、乙胺丁醇、丙硫异烟胺。根据是否完善10种常用药物的药敏试验比例法分为精准治疗组和经验治疗组,精准治疗组根据药物敏感试验结果调整治疗方案。回顾性分析两组患者治疗方案及病情转归等资料。统计学分析采用χ^(2)检验。结果180例患者中,精准治疗组113例,经验治疗组67例。精准治疗组药物的耐药率从低到高依次为:卷曲霉素(0,0/113)、阿米卡星(2.65%,3/113)和卡那霉素(2.65%,3/113)、对氨基水杨酸(7.96%,9/113)、丙硫异烟胺(11.50%,13/113)、氧氟沙星(38.05%,43/113)、乙胺丁醇(39.82%,45/113)、链霉素(76.99%,87/113)。精准治疗组患者在治疗过程中根据药敏试验比例法进行药物调整104人次,从低到高依次为:阿米卡星(3人次)、丙硫异烟胺(13人次)、左氧氟沙星(43人次)、乙胺丁醇(45人次)。精准治疗组治疗成功率为78.8%(89/113),高于经验治疗组的52.2%(35/67),差异有统计学意义(χ^(2)=13.805,P=0.0002)。精准治疗组和经验治疗组患者治疗过程中,丙氨酸转氨酶升高[32.3%(31/96)比34.0%(18/53)]、血肌酐升高[4.2%(4/96)比5.7%(3/53)]、白细胞计数减少[24.0%(23/96)比22.6%(12/53)]患者比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论基于药敏试验比例法的传统MDR-PTB治疗方案具有较高的治疗成功率,仍是值得选择的治疗方式。

基因芯片技术在检测痰涂阳肺结核患者结核分枝杆菌耐药性的应用效果

目的探讨基因芯片技术在结核病耐多药快速检测中的应用效果。方法收集重庆市五个区县1 030例涂阳肺结核患者的痰标本,同时进行罗氏培养和基因芯片检测异烟肼、利福平耐药性,培养后的菌株用比例法药敏试验检测异烟肼、利福平的耐药性。以比例法药敏试验为判断标准,对基因芯片的检测效果进行分析。结果对同时有两种耐药性检测结果的958例患者进行了统计学分析,基因芯片对异烟肼检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P>0.05),符合率94.1%,灵敏度80.2%,特异度95.9%,阳性预测值71.8%,阴性预测值97.4%,Kappa值为0.724。基因芯片对利福平检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P>0.05),符合率96.3%,灵敏度86.4%,特异度97.5%,阳性预测值80.9%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.815。此外,基因芯片对异烟肼和利福平耐药结核病检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P>0.05),符合率96.9%,灵敏度78.3%,特异度98.3%,阳性预测值78.3%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.766。结论基因芯片技术可用于耐多药结核病早期快速筛查和诊断,以弥补传统药敏试验的不足,但该方法对检测环境要求较高,需对操作人员严格培训。

Gene-Xpert MTB/RiF与熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药分析

目的评价Gene-Xpert MTB/RiF法与熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药的不同应用价值。方法入选235例涂阳结核病患者痰标本分别做传统比例法药敏试验、Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法检测结核分枝杆菌的利福平耐药,以传统药敏试验作为金标准进行比较。结果 235例标本中比例法药敏试验利福平耐药12例(5.1%)、Gene-Xpert MTB/RiF利福平耐药例15例(6.4%)、熔解曲线法利福平耐药19例(8.1%),Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法敏感度分别为91.7%和100.0%;特异度分别为98.2%和96.7%。结论Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法两者均可应用于结核分枝杆菌利福平耐药性的快速检测,Gene-Xpert MTB/RiF法在我国开展结核菌耐多药筛查具更有较强的实用性,有更广的应用前景。

GeneXpert MTB/RIF系统在疑似结核病患者中的诊断价值

目的评价GeneXpert MTB/RIF系统在临床疑似结核病患者中的诊断价值。方法对临床疑似结核病患者的220份标本分别进行抗酸涂片镜检、结核分枝杆菌培养、鉴定及比例法药敏试验、GeneXpert MTB/RIF系统检测结核分枝杆菌及利福平敏感性。应用统计学方法分析GeneXpert MTB/RIF系统检测结果。结果 GeneXpert MTB/RIF系统与罗氏培养法检测结核分枝杆菌之间的差异无统计学意义(P>0.05),并且通过Kappa检验2种方法检测的结果,一致性较好(Kappa=0.944)。GeneXpert MTB/RIF系统与抗酸涂片镜检检测结核分枝杆菌之间的差异有统计学意义(P<0.05)。Kappa检验2种方法检测的结果,一致性一般(Kappa=0.726)。以结核培养为金标准,220份疑似结核病患者的标本中,GeneXpert MTB/RIF系统检测结核分枝杆菌的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.92%、97.92%、95.45%、98.60%。结论 GeneXpert MTB/RIF系统在临床疑似结核病患者的诊断中具有重要价值。