全自动生化分析仪免疫比浊法检测项目分析参数的优化设置研究

目的:优化全自动生化分析仪免疫比浊法检测项目分析参数和分析方法,实现抗原过量异常高值样本的自动识别、自动稀释重测,以提高检测质量和检验效率。方法:选用在医院进行尿微量白蛋白(mALB)检测且尿蛋白检测结果为“+++”或“++++”的183个尿液样本,采用免疫比浊法检测mALB线性范围上限附近样本,确定线性范围上限的吸光度限值;手动稀释重测不同浓度抗原过量样本,确定前区检查限值;选择正确的自动重测条件和稀释条件,优化检测项目分析参数后再次检测不同浓度mALB样本,根据验证优化效果对检测方法进行进一步优化、验证。结果:完成检测项目参数优化设置后吸光度>2.5,mALB略高于线性范围上限,抗原过量且mALB检测结果<4 483.8 mg/L的高值样本均可自动识别、自动稀释重测;进一步优化后,mALB可见异常高值样本均可自动识别、自动稀释重测。结论:全自动生化分析仪免疫比浊法检测项目分析参数的优化设置,可实现检测项目抗原过量样本的自动识别、自动稀释重测,有效克服检测系统局限性,避免异常高值结果的漏检和误检,确保样本检测质量。

胶乳免疫比浊法检测CA19-9的性能验证研究

目的对基于生化分析平台检测CA19-9活性的胶乳免疫比浊试剂盒进行检测性能的验证研究。方法收集2022年1月至4月期间就诊于中国医学科学院肿瘤医院的肿瘤患者315例及表观健康人43例的血清样本进行性能验证试验。参考CLSI EP15-A方案,用两种水平的质控品验证待测试剂盒的精密度;参考EP6-A方案,评价待测试剂盒的线性范围;验证血清样本的稀释准确性;参考EP7-P方案,用含特定浓度干扰物(胆红素、血红蛋白、乳糜、类风湿因子)的混合血清评价试剂盒的抗干扰能力;使用表观健康人的新鲜血清样本验证待测试剂盒的生物参考区间,使用肿瘤患者的新鲜血清比较待测试剂盒与电化学发光法检测结果的相关性和偏差。结果精密度验证显示,两种水平质控品的批内CV和批间CV(低浓度:4.08%和4.33%;高浓度:3.01%和3.55%)均小于允许不精密度(批内CV≤6.85%和批间CV≤9.14%)。在21.08~843.21U/mL的检测范围内,检测曲线呈一阶线性分布,理论值与实测值的平均百分偏倚1.57%,线性良好。本试验验证的最大稀释度为1∶64倍稀释,稀释验证样本与原倍血清的相对偏移为9.11%。4.65%(2/43)的表观健康人的CA19-9测定值在参考区间之外。当血清样本中胆红素≤40mg/dL、血红蛋白≤150mg/dL、类风湿因子≤500IU/mL、脂肪乳含量≤5%时,对待测试剂的检测结果无明显干扰。对临床比对样本的Spearman相关性检验显示,待评估试剂的检测结果与电化学发光法显著相关,相关系数为0.96,阳性符合率为97.78%,阴性符合率95.00%,总符合率96.19%。结论基于生化分析平台胶乳免疫比浊法检测CA19-9的性能良好,能够满足临床需求,但仍需从抗干扰、检测灵敏度等方面寻求进一步优化。

免疫磁分离及免疫比浊分析对福氏志贺菌的自动快速定量检测

目的以SPA包被的磁珠和富含SPA的金黄色葡萄球菌分别与福氏志贺菌的多抗血清结合,制备福氏志贺菌特异的多抗磁珠和抗体致敏的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂与免疫比浊试剂,利用免疫比浊分析探索其在福氏志贺菌自动快速定量检测中的初步应用。方法福氏志贺菌F1a免疫日本大耳白兔制备多抗血清,磁珠包被SPA后再与多抗偶联,制成多抗免疫磁珠。以该磁珠捕获模拟标本的福氏志贺菌,接种MH平板37℃培养18～24h,菌落计数后计算免疫磁珠的特异富集作用。富含SPA的金黄色葡萄球菌(No1800株)经甲醛灭活后,与福氏志贺菌的多抗血清结合,制备特异抗体致敏的金黄色葡萄球菌,作为协同凝集试剂和自动定量检测的免疫比浊试剂,在日立7060全自动生化分析仪编制程序进行自动检测并进行初步的方法学评价。结果福氏志贺菌F1a免疫日本大耳白兔获得了高质量的多抗血清,特异性好,凝集效价达1∶320;制备多抗免疫磁珠对福氏志贺菌具有一定的富集作用,菌落计数显示磁珠处理的细菌捕获效率约为30%;抗体致敏的金黄色葡萄球菌,作为协同凝集试剂和自动定量检测的免疫比浊试剂,在玻片上能与待测福氏志贺菌产生明显的凝集现象,在日立7060全自动生化分析仪上定量检测灵敏、特异、线性良好。结论以福氏志贺菌的多抗血清分别致敏SPA包被的磁珠和富含SPA的金黄色葡萄球菌,制备特异的多抗磁珠对福氏志贺菌有一定的特异捕获与富集作用,抗体致敏的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂与免疫比浊试剂对福氏志贺菌的自动、快速、定量检测具有较好的效果,为病原菌的快速诊断和自动定量分析提供了新的思路。

免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白的方法学评价

近来年研究表明,尿微量白蛋白不仅是肾脏血管内皮损伤的标志,也是全身血管内皮细胞损伤的标志。一些调查研究认为,尿微量白蛋白阳性是心血管事件发生的独立危险因素[1]。因此,检测尿微量白蛋白对相关疾病的早期诊断和治疗有重要的参考意义。为了验证免疫透射比浊法（简称＂透射法＂）微量白蛋白诊断试剂用于尿微量白蛋白检测的准确性及实用性,本文以免疫散射比浊法（简称＂散射法＂）微量白蛋白诊断试剂作参比方法,对检测结果进行相关性分析和方法学评价。

乳胶凝集免疫比浊法检测梅毒特异性抗体的性能评价

目的进行乳胶凝集免疫比浊法(3TP法)的性能评价试验,并与TPPA、雅培化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)检测梅毒螺旋体特异性抗体的性能进行比较,为临床实验室选择梅毒自动化检测方法提供参考。方法在日立7180仪器上分别做3TP法的精密度试验、干扰试验等方法学评价实验。用3TP法与CMIA检测2009～2011年3年间临检中心室间质量评价的标本及44例临床经TPPA检测阳性的患者血清。结果 3TP法CV为3.38%,临床确证的自身免疫性疾病和大于或等于65岁的高龄患者的8例患者结果均为0。脂血标本检测加入脂血前后检测结果也均为0,溶血标本结果,一份由220U/mL降低为205U/mL,变异率为-6.8%;另一份由197U/mL上升为246U/mL,变异率为+24.7%。110份临检中心的室间质量控制样本中3TP法有107份符合预期结果,符合率为97.3%;TPPA有106例符合预期结果,符合率为96.4%;CMIA有105份符合预期结果,符合率为95.4%,三者差异无统计学意义(P>0.05)。检测44例TPPA阳性的临床患者血清,3TP阳性结果为44例,CMIA阳性为42例。结论结果显示,3TP法具有良好的精密度、抗干扰能力、灵敏度和特异性,与TPPA、CMIA检测性能相近,适合用于临床实验室的梅毒筛查检测。

共振光散射比浊法测定环境水样中Pb(Ⅱ)

基于铅与重铬酸钾反应产生沉淀拟定了一种测定铅的共振光散射比浊法.通过实验确定了适宜的反应条件.实 验表明,在λ=497 nm处,该体系有较大且较稳定的共振光散射强度,并且共振光散射强度与铅浓度成线性关系,线 性范围为0.1-1.0μg/ml,检测限为0.0573μg/mL.该方法快速,灵敏,简便.将该方法用于实际含铅水样中的铅的测定 并与原子吸收光谱法比较,结果较为满意.

免疫比浊法定量检测葡聚糖的研究

葡聚糖影响甘蔗品质及制糖生产，主要表现在糖分损失、糖液粘度增加、过滤困难、结晶异常、糖产品适用性受限等，从而降低提糖率，增加制炼成本，影响糖产品质量。本文对单克隆抗体比浊法测定葡聚糖的方法学进行研究，结果表明，该方法能快速准确测定糖厂蔗汁等在制品及产品中葡聚糖含量，线性范围10～500 mg/L，检测限为10 mg/L，加标回收率98%～102%，RSD〈4%，灵敏度1.3 mg/L。

胶乳免疫比浊法测定血清铁蛋白的方法学评价

目的对胶乳免疫比浊法定量测定血清铁蛋白(FER)进行方法学评价。方法参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的评价方法,对胶乳免疫比浊法测定血清FER的精密度、回收实验、线性范围等进行评价。结果胶乳免疫比浊法测定血清FER的批内、日间变异系数(CV)均<5.0%,精密度良好;FER浓度在25~500 ng/m L范围内,检测线性良好;比对实验:两种厂家的试剂盒测定FER结果相关性良好(r2=0.990 7,n=40),检测结果基本一致(P>0.05);回收率为96.20%~102.43%;40例健康体检者样本的检测值均在待验证区间之内。结论胶乳免疫比浊法用于定量检测人血清FER水平,测定结果准确可靠,操作简便、快速,能直接在全自动生化分析仪上使用,适用于临床样本检测。

注射用头孢菌素类抗生素细菌内毒素动态比浊定量法的研究

目的:应用动态比浊定量法研究头孢菌素类抗生素细菌内毒素。方法:通过对样本中定量添加标准内毒素的干扰预试验,将头孢菌素类抗生素制备成5种浓度系列,测得回收率,并筛选出最佳检测浓度,最后进行3个批号的试验。结果:内毒素的回收率分别为92.48%(头孢曲松钠舒巴坦钠),111.1%(头孢拉啶),99.39%(头孢他啶),73.31%(头孢曲松钠),111.9%(头孢呋辛),109.2%(头孢噻肟钠),133.3%(头孢哌酮钠舒巴坦钠),133.6(头孢硫脒)。头孢菌素类抗生素浓度小于等于1mg/mL的条件下,对动态比浊定量法无干扰作用,可用于有效的日常细菌内毒素检查。结论:动态比浊定量法为头孢菌素类抗生素的细菌内毒素的定量检测提供了一种全新的、高效的方法。

免疫透射和免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白及补体的比较

目的:比较免疫透射和免疫散射比浊法测定免疫球蛋白和补体时的准确性、精密度、偏离度及测定范围。方法:采用贝克曼LX-20与DELTA特定蛋白分析仪,分别以免疫透射和免疫散射比浊法,对同一临床标本测定血清中免疫球蛋白(IgGI、gAI、gM)和补体(C3、C4)的含量。结果:两种仪器测定IgG、IgA、IgM、C3、C4准确性、精密度均良好。两法各浓度值测定结果的预期偏差均在可接受范围。结论:贝克曼LX-20应用免疫透射比浊法与DELTA特定蛋白分析仪应用免疫散射比浊法测定免疫球蛋白和补体准确性、精密度均比较好,且散射比浊法优于透射比浊法。

硫酸铵-EDTA比浊测定血浆纤维蛋白原的评价

本文推荐并评价了一种比浊测定血浆纤雏蛋白原的新方法.该法简便实用,可进行微量分析;纤维蛋白原浓度在0.025～8g/L 内呈线性。批内、批间CV 分别是3.47%和4.58%,回收率平均为98.9%,选择性和抗干扰能力强.作者在文中还重点讨论了所用试剂浓度的选择及试验依据.

免疫比浊法测定体检人群胃蛋白酶原水平与年龄和性别的关系

目的分析健康体检人群的血清PG I、PGⅡ水平及PG I/II比值（PGR）与年龄和性别关系,并与胃镜检查结果比较及对验证PGI、PGII与PGR参考区间。方法采用免疫比浊法检测377名血清PG I和PGII水平并胃镜检查,分析影响PG水平的相关因素。结果消化性溃疡组血清PGI及PGII显著升高,PGR显著降低;萎缩性胃炎PGI显著降低,PGII升高,PGR显著降低。体检人群血清PGI和PGII水平男性高于总体水平;在18~75岁年龄段,随年龄增长,PGI和PGⅡ水平上升,PGI/PGⅡ比水平下降。结论健康体检人群中,消化性溃疡组血清PGI及PGII水平显著升高,PGR降低;萎缩性胃炎组PGI显著降低,PGII升高,PGR显著降低。血清PG水平与年龄、性别相关;联合测定血清PGⅠ、PGⅡ和PGR在健康人群胃部疾病筛查有重要意义。

静态离子交换分离-硫酸钡比浊法测定高铈化合物中SO_4^(2-)

将静态离子交换技术与比浊法相结合建立了测定高铈稀土化合物中硫酸根含量方法。研究了离子交换分离条件(R-SO3H树脂用量、萃取时间、萃取酸度)和比浊测定条件(分析波长、酸度、稳定剂用量、BaCl2浓度等)对测量结果的影响。结果表明,在H+浓度为0.18mol/LHCl介质中15g强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂与试液混匀,静置1h后以中速滤纸过滤,可以富集SO42-,并与大量基体元素铈分离。分离后的滤液在2.4mmol/L HCl中和一定量的稳定剂存在下,BaCl2质量浓度为20g/L时,SO42-和Ba2+生成稳定的胶态悬浮体,在430nm波长处溶液的吸光度随着SO42-浓度增加而线性增加,其增加值ΔA430nm与SO42-质量浓度在0.80～6.00μg/mL范围内呈良好的线性关系,其线性相关系数为0.999 7,检测下限为0.010%(质量分数)。本法用于高铈化合物中SO42-的测定,测定结果与电感耦合等离子体原子发射光谱法相符。

散射免疫比浊抑制法检测卡马西平、丙戊酸浓度

目的：应用散射免疫比浊抑制法检测血清卡马西平(CAR)、丙戊酸浓度(VPA)。方法：利用大分子物质抗原与相应抗体反应生产不溶性免疫复合物而易于检测的原理，通过速率 散射比浊法测定药物浓度。 结果：卡马西平平均回收率100.6%，日内RSD为2.08%,日间RSD为 3.43%；丙戊酸线性范围2～150 μg·ml-1，平均回收率97.7%，日内RSD为2. 21%，日间RSD为3.56%。 结论：方法快捷，无需处理样品，灵敏性高，重复性好，适用临床血药浓度监测。

免疫散射比浊法检测 IgG 的性能验证

目的：对免疫散射比浊法检测 IgG 的分析性能进行验证，探讨适用于该系统性能验证的合理模式。方法参照相关文件及标准，对该系统检测 IgG 的精密度、正确度、分析测量范围（AMR）和参考区间进行验证。结果低值样本批内精密度为2.24％，总精密度为2.25％；高值样本批内精密度为2.73％，总精密度为2.68％；检测不同批号配套校准品的相对偏倚为5.18％；初始稀释度 AMR 为2.44-33.5g／L；参考区间与厂家声明一致。结论该系统测定 IgG 的主要分析性能均与厂家声明的性能一致；厂家提供的参考区间可以接受，验证方案和统计方法简便、可操作性强。

氯化银比浊法测定水泥及原料中微量氯离子的研究

用氯化银比浊法可以准确地测定水泥及其原料中微量氯的含量。采用大分子物质糊精做保护胶体，增强氯化银比浊液稳定性，该方法将原比浊液的稳定时间从２０ｍｉｎ延长至６０ｍｉｎ。

单克隆抗体免疫比浊法检测肺癌患者血清血管生成素-2

目的 初步评价单克隆抗体免疫比浊法（MAITA）检测血清血管生成素-2（Ang-2）试剂盒,探讨Ang-2在肺癌患者血清中的表达及临床意义.方法 采用CLSI EP10-A2实验方案初步评价MAITA检测血清Ang-2的精密度、偏差、线性漂移、交叉污染等性能;测定153例健康者血清Ang-2水平建立参考值范围;测定156例（包括68例肺癌）患者的血清Ang-2和硫酸粘多糖片段（SGF）水平,应用受试者工作特征曲线（ROC）评估Ang-2在肺癌患者的应用价值.结果 三个异值样本的总不精密度和偏差中,低值拒绝,中、高值均可接受;截距、斜率和非线性差异均有显著性.Ang-2的参考值范围：（17.29±5.05）U/ml;肺癌的最佳诊断界限值为37.50 U/ml.肺癌患者血清Ang-2（48.34±15.29）U/ml明显高于肺部良性疾病患者和健康组[分别为（24.67±5.53）U/ml和（19.93±5.92）U/ml,P〈0.01].Ang-2与SGF联合检测肺癌患者的阳性率达95.59%.结论 MAITA检测血清Ang-2试剂盒符合CLSI EP10-A2文件要求,Ang-2在各期肺癌患者血清中有较高表达,与SGF联合检测可有效提高对肺癌的诊断.