生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达

【目的】研究生淀粉结合域SBD及糖化酶基因在毕赤酵母中的融合表达，提高酶的表达量和水解生淀粉的能力。【方法】利用In-fusionTMPCR克隆技术将淀粉结合域SBD无缝隙插入到黑曲霉糖化酶基因glu的5’端构建融合表达质粒pPICgK-psg，实现融合酶基因psg在毕赤酵母GSll5中的高效表达，并进行酶学性质研究。【结果】融合酶的最适作用条件及热稳定性均与原始酶无明显差别，但反应温度及pH值的范围更为宽泛，在反应温度6O～70℃，pH值为4．0～7．0时均较稳定；融合酶PSG降解生淀粉的能力较原始酶PG提高29．6％，比原始菌株提高86．5％。【结论】淀粉结合域SBD的融合提高了糖化酶水解生淀粉的能力。