毛云芝菌产漆酶液体培养条件的优化

探索了不同的培养条件下毛云芝菌产漆酶的情况,发现该菌漆酶属于组成型漆酶,其酶活力高,产酶周期短,酶的合成与菌体生长没有明显相关性;以漆酶的酶活为指标,采用正交试验设计方法对毛云芝菌液体培养的摇瓶生长条件进行了优化研究。结果表明:优化培养基的组成(质量分数)为麸皮3%,蛋白胨0.2%,牛肉膏0.3%,MgSO4.7H2O 0.05%,KH2PO40.3%;TE6%(体积分数),VB120 mg/L;自来水,pH自然。该营养条件下的酶活为1 668 U/mL,约是优化前培养基酶活的16倍,为工业化生产提供了一定的理论依据。

响应面法优化毛云芝菌产漆酶的培养条件研究

研究了影响毛云芝菌产漆酶的培养条件,通过单因素实验选取试验各因素的水平,根据Box-Benhnken试验设计原理,进行响应面回归分析,以漆酶酶活为响应值,确定了影响漆酶产量的各因素的水平,结合验证实验结果得到其最佳的培养条件为接种量8.2%、装液量30.8%、摇床转速141r/min。

中心组合试验优化毛云芝菌固体发酵培养条件

为了优化毛云芝菌固体发酵培养条件,采用中心组合试验设计方法,研究初始加水量、接种量、培养温度及其交互作用对漆酶活力的影响。应用SAS软件和响应面分析相结合的方法,模拟得到回归方程的预测模型和可信度,并通过岭脊分析得到最佳的发酵条件为:装量为10 g干料的250 mL三角瓶中加蒸馏水38 mL,种子液4.3 mL,培养温度26.6℃。该条件下酶活达到1.4778×104U,约是优化培养条件前酶活的11.75倍。

中药药渣发酵生产毛云芝菌漆酶培养基的工艺研究

为充分利用中药药渣,该研究探索不同中药药渣对毛云芝菌漆酶产酶效果的影响。结果表明:大黄、麻黄和芍药药渣可有效促进毛云芝菌漆酶的产量。在选择大黄药渣的基础上,优化药渣培养基的组成为麸皮3%,蛋白胨0.2%,大黄药渣12%,MgSO43g/L,KH2PO43g/L,pH值5.0,该培养基产酶酶活可达到4 828.2 U/mL,约是优化前培养基产酶酶活的1.4倍。

毛云芝菌固体发酵产漆酶的分离纯化及酶学性质

作者对毛云芝菌利用桑叶和麸皮固体发酵所产漆酶进行了分离纯化,并研究了纯化后漆酶的酶学性质。将毛云芝菌固体发酵漆酶粗提液通过离心、过滤、大孔树脂脱色、硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose fast flow层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析,结果得到电泳纯的漆酶,纯化倍数15.53,酶活回收率51.21%。用SDS-PAGE测得该酶相对分子质量62 600;该酶反应的最适温度为50℃,在柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中最适pH值为4.0,在醋酸缓冲液中最适pH值3.0;氧化ABTS的Km为0.093 mmol/L,对邻苯二酚的Km为3.71 mmol/L。

毛云芝菌漆酶的分离纯化和性质研究

将发酵液经真空抽滤后得粗酶液,以硫酸铵为盐析剂进行分级盐析沉淀、再经DEAE-52离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析对漆酶进行分离纯化,用SDS-PAGE证明可获得纯的漆酶,纯化倍数为183.69倍,酶活回收率为24.77%。实验表明,该酶在30℃条件下具有较高的稳定性;在pH3.4～5.8范围内的相对酶活均在80%以上,漆酶稳定性较好,pH3.8的时候漆酶的稳定性最好。

毛云芝菌菌丝体化学成分在运动保健中的作用

通过小鼠毛细血管通透性和血小板聚集功能试验表明,毛云芝菌菌丝体的有效成分能够疏通血管、改善脏器血液微循环,增加运动血液供给;体外抗氧化性能试验表明,毛云芝菌菌丝体的有效成分对氧自由基有很好的清除效果,有显著的运动保健作用。

利用桑叶和麸皮固体发酵毛云芝菌产漆酶的培养基优化研究

采用响应面法对毛云芝菌固体发酵产漆酶的培养基进行优化。首先运用部分因子筛选实验(FFD)筛选出对发酵培养基影响较大的重要因素,分别为桑叶与麸皮比例、草酸铵、葡萄糖;然后用最陡爬坡实验逼近最佳响应面区域,最后通过Box-Behnken实验设计,利用SAS进行回归分析和岭脊分析,得到主要因素的最佳比例及浓度。在优化培养基的条件下,固体发酵培养酶活较初始培养基提高了10倍。

毛云芝子实体抗氧化活性研究

毛云芝子实体分别用石油醚、乙酸乙酯、乙醇及水提取其中的活性物质,并对所有提取物从DPPH自由基的清除、抑制脂质过氧化力及金属离子螯合力,这三个方面进行体外抗氧化活性的测定。结果表明:毛云芝子实体的各提取物在清除DPPH自由基、抑制脂质过氧化、金属离子鳌合力的抗氧化活性实验中,均表现出不同程度的抗氧化活性,且随浓度的增加活性越强,其中乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最高。

毛云芝菌利用糖蜜酒精废水产漆酶培养基优化

为提高毛云芝菌的漆酶产量,降低生产成本,同时使糖蜜废水中的营养成分得到充分利用,变废为宝,以糖蜜废水作为碳源,对毛云芝菌发酵产漆酶进行研究。在单因素试验基础上,以不同浓度糖蜜废水、尿素含量为自变量,漆酶活力为因变量,采用Box-Behnken设计方法得到最佳的培养基配方为糖蜜废水浓度47%,尿素添加量0.5%,漆酶活力可达1 810.0 U/mL,约为优化前的6倍。说明毛云芝菌利用糖蜜废水作为碳源生产漆酶是可行的,为糖蜜废水资源化利用高效生产有价值产品奠定了理论基础。