大孔吸附树脂富集纯化毛冬青总皂苷工艺研究

目的 :研究大孔树脂富集、纯化毛冬青总皂苷的工艺条件及参数。方法 :以毛冬青总皂苷的洗脱率和精制度为指标 ,考察大孔树脂富集、纯化毛冬青总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果 :毛冬青样品液 4 7mL( 6.4 3g/L)上大孔树脂柱 (R 1 5mm×H 90mm ,干重 2 .52 g) ,用蒸馏水 1 0 0mL、 50 %乙醇 1 0 0mL依次洗脱 ,毛冬青总皂苷富集于 50 %乙醇洗脱液部分 ,且除杂质能力强。结论 :通过大孔树脂富集与纯化后毛冬青总皂苷洗脱率达 95% ,50 %乙醇洗脱液干燥后总固物中毛冬青总皂苷纯度可达 57.5%。采用此法可较好地纯化毛冬青总皂苷。

毛冬青总皂苷对小鼠脑缺血再灌注模型的影响

目的:探讨毛冬青总皂苷对小鼠脑缺血再灌注模型的作用机制及特点。方法:将小鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、金纳多组、毛冬青总皂苷大、中、小剂量组7组。采用阻断小鼠双侧颈总动脉缺血10 min、恢复灌流10 min、再缺血10 min、恢复供血、再灌注24 h,研究毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注小鼠的NO水平和NOS活力,Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的含量以及脑组织神经细胞的影响。结果:小鼠脑缺血再灌注模型复制成功,毛冬青总皂苷可显著降低脑匀浆中NO水平、NOS活力、升高脑匀浆中ATP酶活力,并显著减轻脑组织海马区和皮质区神经细胞的损伤,均以大剂量、中剂量为优。结论:毛冬青总皂苷可显著改善小鼠脑缺血再灌注模型的脑缺血状况,具有抗脑缺血损伤的作用。

毛冬青总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及血液微量元素影响

目的研究毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其血液微量元素的影响。方法动物随机分为假手术组、模型组、毛冬青总皂苷(高、中、低)剂量组及阳性药物对照组,运用大鼠大脑中动脉栓塞,制作脑缺血再灌注损伤模型,缺血10 min后,给药组及阳性药物组于舌下静脉给予高、中、低剂量的毛冬青总皂苷及假手术组、模型组给予等体积的溶剂。缺血60 min再灌注24 h后,每组取8只大鼠断头取脑,TTC染色,测定脑梗死体积;取血,测定血液中3种微量元素Ca、Zn、Cu的含量。结果毛冬青总皂苷组与模型组相比,毛冬青总皂苷治疗组脑梗死体积减小,病理变化较轻;模型组与假手术组比较血液中Ca、Cu含量增加明显有统计学意义,Zn含量明显降低与假手术组比较有统计学意义(P<0.05),毛冬青高、中、低剂量组与模型组比较Ca、Cu含量明显降低,Zn含量明显升高,而且呈明显的量效关系,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其保护机制与毛冬青总皂苷抗氧化作用及增强氧自由基的清除有关。

毛冬青总皂苷对AHNP诱导肝损伤大鼠骨中7种微量元素的影响

目的探讨了毛冬青总皂苷对AHNP诱导肝损伤大鼠骨中微量元素的影响。方法应用逆行胰胆管术注射牛磺胆酸钠(TAC)复制急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠实验动物模型,进行了毛冬青总皂苷(高、低剂量)的治疗。观察了5组(假手术对照组、AHNP模型组、毛冬青总皂苷高剂量组、毛冬青总皂苷低剂量组、尼尔雌醇组、)大鼠股骨中Cu、Mn、Fe、Zn、Pb、Mg和Ca等微量元素的变化。结果统计学结果显示与AHNP模型组比较,毛冬青总皂苷能提高AHNP大鼠骨质中Cu、Fe、Mn、Mg、Ca等元素的含量,尼尔雌醇组中的Zn含量提高,毛冬青总皂苷组中的Zn含量反而下降;尼尔雌醇组与毛冬青总皂苷组中Pb含量下降明显。结论说明毛冬青总皂苷的治疗作用并不是单一的,可以认为中药毛冬青总皂苷是通过发挥对人体整体的调节作用来调节骨骼中微量元素的变化,改变骨质的代谢情况,促进骨密度的提高。

毛冬青总皂苷提高血瘀大鼠脑缺血耐受的作用机制

目的:研究毛冬青总皂苷提高血瘀大鼠脑缺血耐受模型的作用机制,为中药毛冬青的新用提供实验依据。方法:采用大鼠连续注射地塞米松复制血瘀模型。给予相应的药物,连续灌服7d,于第7天给药后1h,阻断双侧颈总动脉血流10min,恢复灌注72h后,颈内动脉线栓法致左大脑中动脉栓塞2h,再灌注24h。复制大鼠脑缺血耐受模型。取血测全血黏度;断头取左脑,测定ATP酶、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力,HE染色观察海马区组织病理变化,免疫组化法观察Bcl-2、Bax阳性的表达情况。结果:缺血耐受组及缺血再灌注损伤组大鼠全血黏度明显升高、ATPase及T-SOD活力显著下降(P<0.01)、Bax阳性表达显著增加(P<0.01),大鼠血瘀合并脑缺血耐受模型复制成功。与缺血再灌注损伤组比较,缺血耐受组动物全血流变值升高,T-SOD及ATPase活力增强,动物脑组织的病理损伤程度明显减轻。与缺血耐受组比较,各剂量毛冬青总皂苷能显著或明显改善血瘀大鼠的全血黏度,增强ATPase、T-SOD活力及Bcl-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性表达,对脑神经细胞的损伤有明显的保护作用。结论:毛冬青总皂苷能从改善血液循环、改善能量代谢、诱导内源性抗氧化物活性增强、增强抗凋亡效应、减轻神经细胞损伤等方面实现提高脑缺血耐受的作用。

基于STAT5信号通路调控Treg免疫功能的毛冬青总皂苷抗脑缺血炎症损伤的分子机制研究

目的:探讨毛冬青总皂苷抗反复脑缺血再灌注炎症损伤的作用机制。方法:80只昆明雄性小鼠,分为假手术组,模型组,金纳多组,毛冬青总皂苷高、低剂量组(400、100mg/kg)。各组灌胃给予相应药物10d后,采用双侧颈总动脉反复阻断再灌注,造成小鼠脑缺血再灌注损伤模型(假手术组仅暴露双侧颈总动脉)。再灌注22h后,取材。ELISA检测血清白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-10,脑匀浆中NO、NOS水平;Western blot法检测小鼠脑组织STAT5、p-STAT5、Foxp3蛋白表达;HE染色法观察脑组织皮质区病理状态,免疫荧光染色检测小鼠脑组织CD_(4)^(+)CD_(25)^(+)Treg分布。结果:与模型组比较,毛冬青总皂苷可降低小鼠脑匀浆NOS、血清IL-6水平;升高血清IL-10、IL-2水平及脑匀浆NO水平;升高脑组织p-STAT5/STAT5、Foxp3蛋白表达及CD_(4)^(+)、Foxp3阳性表达;改善皮质区病理变化。结论:毛冬青总皂苷可通过调控STAT5激活Treg细胞拮抗炎症级联反应的恶性进程,改善局部脑损伤,发挥对脑缺血炎症损伤保护作用,可作为有效治疗脑缺血疾病的备选药物,进一步开发利用。