高效液相色谱法测定毛冬青胶囊中芦丁的含量

目的采用高效液相色谱法测定毛冬青胶囊中芦丁的含量。方法采用Kromasil C18色谱柱（250×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：48：2），检测波长为360nm。结果芦丁在5．14～82．24μg／mL浓度范围内线性关系良好（r=0．9994）。平均加样回收率为98．74％（n=5，RSD=1．5％）。结论本法简便、准确、重现性好，可用作毛冬青胶囊的质量控制。

毛冬青胶囊对大鼠体内细胞色素P450代谢活性的影响

目的:采用Cocktail探针药物法研究毛冬青胶囊对大鼠CYP1A2、CYP3A2、CYP2C6、CYP2D1、CYP2D2和CYP2E1体内代谢活性的影响。方法:分别以茶碱、咪达唑仑、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、右美沙芬和氯唑沙宗作为探针底物,将大鼠随机分为3组:空白对照组、毛冬青的低剂量组和高剂量组。低、高剂量组每日分别灌胃给予毛冬青胶囊1.8、3.6 g·kg-1,空白对照组每日给予与低剂量组等体积的生理盐水,各组均为1次/天,连续14 d。各组分别于第15天给予Cocktail探针药物,于给药前、后不同时间点取血,用LC-MS/MS检测各探针药物的血药浓度,计算药代动力学参数。结果:茶碱低剂量组cmax、AUC0-t有极显著差异(P≤0.01);甲苯磺丁脲高剂量组和氯唑沙宗低剂量组AUC0-t有显著差异(P≤0.05);其他无统计学差异。结论:毛冬青胶囊对大鼠体内CYP2C6和CYP1A2有强诱导作用,对CYP2E1有中强诱导作用,其他亚型基本无影响。

HPLC法测定毛冬青胶囊中具栖冬青苷和毛冬青酸的含量

目的：建立HPLC法同时测定毛冬青胶囊中具栖冬青苷和毛冬青酸含量的方法,并对3个批次毛冬青胶囊中上述两种化合物进行定量分析。方法：Zorbax SB-C18（4.6 mm×150mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长215 nm,柱温40℃,流速1.0 mL·min-1,进样量20μL。结果：具栖冬青苷和毛冬青酸的线性范围分别为1.22-521.1μg·mL-1（r=0.9995）、1.23-289.6μg·mL-1（r=0.9991）,加样回收率分别为99.24%（RSD=0.68%）、99.53%（RSD=0.85%）。结论：该方法简便、准确、重复性好,可为毛冬青胶囊提供质量控制依据。

毛冬青胶囊中原儿茶醛含量测定的方法学验证

目的:对毛冬青胶囊中原儿茶醛含量测定方法进行验证。方法:考察毛冬青胶囊中原儿茶醛含量测定的色谱条件、供试品溶液的制备、空白干扰试验、线性、精密度、稳定性试验、准确度、样品测定等内容。结论:经过对该制剂原儿茶醛含量测定的方法学验证,显示该方法操作简单,稳定性、重现性好,可用于本制剂的质量控制。

毛冬青皂酮胶囊对急性脑梗死模型大鼠神经保护作用

目的:分析毛冬青皂酮胶囊对急性脑梗死模型大鼠神经保护作用并初步探索其保护机制。方法:从60只SPF级SD大鼠中随机选取50只,建立大鼠动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),余下10只记作假手术组。将成功建模大鼠随机分为模型组,对照组,毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组。对照组给予0.03 g·kg^-1莫尼地平溶于2 mL生理盐水灌胃,毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组分别使用0.2 g·kg^-1、0.1 g·kg^-1、0.05 g·kg^-1毛冬青皂酮胶囊颗粒溶于2 mL生理盐水灌胃,假手术组和模型组给予2 mL生理盐水灌胃,连续用药6 d,每天1次。治疗6 d后,在第7天时,按照Longa评分标准对大鼠进行神经功能评分,并取大鼠眼底静脉丛血,收集血清,通过酶联免疫吸附实验法检测大鼠血清炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL^-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;断头法处死大鼠后取模型大鼠大脑皮层梗死部位组织和假手术组大鼠相同位置的大脑皮层组织,通过HE染色观察大脑皮层病理变化;通过RT-qPCR检测大鼠大脑皮层组织中IκBα、核因子κBp65(nuclear factorκ-Bp65,NF-κBp65)、κB抑制蛋白激酶β(inhibitor of nuclear factorκB kinaseβ,IKKβ)mRNA表达水平;通过蛋白免疫印迹法检测大鼠大脑皮层组织中κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κBα,IκBα)、NF-κBp65、IKKβ、磷酸化κB抑制蛋白激酶β(phosphorylation inhibitor of nuclear factorκB kinaseβ,p-IKKβ)水平。结果:神经功能评分结果显示:对照组、毛冬青皂酮胶囊高剂量组、毛冬青皂酮胶囊中剂量组、毛冬青皂酮胶囊低剂量组在治疗后评分均降低(P<0.05),给药前模型组、对照组、毛冬青皂酮胶囊高剂量组、毛冬青皂酮胶囊中剂量组、毛冬青皂酮胶囊低剂量组均高于假手术组,给药后模型组高于假手术组(P<0.05),对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均低于模型组(P<0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组和毛冬青皂酮胶囊中剂量组均低于毛冬青皂酮胶囊低剂量组和对照组(P<0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组低于中剂量组(P<0.05);血清IL^-1β和TNF-α水平模型组高于假手术组(P<0.05),对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均低于模型组(P<0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组和中剂量组均低于毛冬青皂酮胶囊低剂量组和对照组(P<0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组低于中剂量组(P<0.05);大脑皮层组织HE染色结果显示,模型组细胞水肿严重,对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均有所减轻,高剂量组病理变化与假手术组最接近;大脑皮层组织IκBα和IKKβmRNA和蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);NF-κBp65 mRNA和蛋白表达水平及p-IκBα、p-IKKβ水平比较:模型组显著高于假手术组(P<0.05),对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均低于模型组(P<0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组和中剂量组低于毛冬青皂酮胶囊低剂量组和对照组(P<0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组低于中剂量组(P<0.05)。结论:毛冬青皂酮可显著降低急性脑梗死大鼠神经功能评分,减轻炎症反应,减轻神经细胞水肿,其减轻大鼠神经炎性损伤的机制为下调NF-κBp65、IκBα基因、蛋白表达水平,抑制p-IκBα、p-IKKβ水平,从而对急性脑梗死大鼠神经具有保护作用。