毛冬青酸抗血栓实验研究及机制探讨

目的 :研究毛冬青酸 (Ilexolicacid ,ILa)的抗血栓作用及其作用机制。方法 :测闭塞性血栓形成时间 (occlusivethrombusformationtime ,OT) ;称大鼠下腔静脉血栓湿重 ;测大鼠血浆凝血酶原时间 (PT)和部分凝血活酶时间 (KPTT) ;测大鼠血浆优球蛋白溶解时间 (ELT) ;ADP、胶原诱导家兔血小板聚集 ,测 5min血小板最大聚集率 (MPAR5M) ;放射免疫法测大鼠胸主动脉壁 6 酮 PGF1a和血小板内cAMP含量。结果 :ivILa 2 0、4 0、80mg/kg均可明显延长大鼠颈总动脉OT ,减轻大鼠下腔静脉血栓湿重 ,缩短ELT ,对PT和KPTT无影响 ;ivILa 2 5、5 0mg/kg均能明显抑制ADP、胶原诱导的血小板聚集 ;ivILa 2 0、4 0、80mg/kg,大鼠胸主动脉壁 6 酮 PGF1a含量均增加 ;ILa 3、6mg/mlPRP 37℃水浴 15min ,血小板内cAMP含量均增加。结论 :ILa具有抑制动。

平衡透析法测定具栖冬青苷和毛冬青酸的大鼠血浆蛋白结合率

目的建立测定具栖冬青苷、毛冬青酸血药质量浓度的方法,并测定其大鼠体外血浆蛋白结合率。方法采用高效液相色谱法和平衡透析法测定具栖冬青苷、毛冬青酸在大鼠体外血浆中的血浆蛋白结合率。结果低、中、高3种质量浓度,具栖冬青苷在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为39.72%±2.68%,52.05%±3.35%和52.32%±0.76%;毛冬青酸在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为55.18%±3.66%,60.79%±2.20%和47.00%±1.59%。结论建立HPLC法对具栖冬青苷和毛冬青酸进行分离,方法简便。体外实验,具栖冬青苷和毛冬青酸与大鼠血浆属中等结合型药物,且蛋白结合率与药物质量浓度无关。

HPLC法测定毛冬青胶囊中具栖冬青苷和毛冬青酸的含量

目的：建立HPLC法同时测定毛冬青胶囊中具栖冬青苷和毛冬青酸含量的方法,并对3个批次毛冬青胶囊中上述两种化合物进行定量分析。方法：Zorbax SB-C18（4.6 mm×150mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长215 nm,柱温40℃,流速1.0 mL·min-1,进样量20μL。结果：具栖冬青苷和毛冬青酸的线性范围分别为1.22-521.1μg·mL-1（r=0.9995）、1.23-289.6μg·mL-1（r=0.9991）,加样回收率分别为99.24%（RSD=0.68%）、99.53%（RSD=0.85%）。结论：该方法简便、准确、重复性好,可为毛冬青胶囊提供质量控制依据。

高效液相色谱法测定毛冬青酸在大鼠体内的血药浓度

【目的】建立在大鼠血浆中测定毛冬青酸血药浓度的方法。【方法】大鼠尾静脉注射毛冬青酸后,依一定的时间间隔,自颈动脉采血,分离血浆,经氯仿沉淀蛋白后,以乙腈—体积分数0.2%磷酸为流动相,色谱柱为Kromasil 100-5C18(250mm×4.6mm,5μm),流速为1.0mL/min;柱温为30℃;紫外检测波长为203nm。【结果】本研究方法在2.04～51.0μg/mL范围内线性关系良好,低、中、高3个浓度的回收率为93.5%～94.8%,日内精密度sR为1.5%～4.5%、日间精密度sR为2.7%～11.1%。【结论】经过系统的方法学考察,本研究所建立的测定方法灵敏度较高、重现性良好,可用于血浆中毛冬青酸的含量测定。

HPLC法测定复方毛冬青氯贝酸铝片中芦丁的含量

目的:采用高效液相色谱法测定复方毛冬青氯贝酸铝片中芦丁的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱,流动相为 0．2 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(含10％冰醋酸)-甲醇(63:27),流速1．0 ml·min-1,检测波长为360 nm。结果:芦丁在0．10～ 1．65 μg范围内线性关系良好(r=0．999 9)。平均加样回收率为98．3％(n=5,RSD=0．6％)。结论:本法简便、准确、重现性好,可用作复方毛冬青氯贝酸铝片的质量控制。