期刊文献+
共找到89篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
基于CRISPR-dCas9转录激活系统的毛果杨ANT转录因子功能分析
1
作者 孟令桐 苏丽伟 +4 位作者 李祥欣 熊天圣 常攀鹏 刘孟卓 周晨光 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期431-440,共10页
基于CRISPR-dCas9的基因转录激活表达能够避免基因异位表达带来的表型干扰,同时使基因有效地特异性表达。该研究利用新型CRISPR-Act3.0表达系统,在毛果杨(Populus trichocarpa)中对维管形成层特异表达转录因子ANT(AINTEGUMENTA)进行基... 基于CRISPR-dCas9的基因转录激活表达能够避免基因异位表达带来的表型干扰,同时使基因有效地特异性表达。该研究利用新型CRISPR-Act3.0表达系统,在毛果杨(Populus trichocarpa)中对维管形成层特异表达转录因子ANT(AINTEGUMENTA)进行基因转录激活,创制遗传材料,并对基因的功能进行分析。首先对毛果杨PtrANTs转录因子进行同源分析,选取其中的PtrANT-4进行后续研究,对该基因进行克隆并利用荧光定量PCR分析其在各组织中的表达情况;其次在PtrANT-4启动子上设计3条gRNAs,构建CRISPR-dCas9转录激活表达载体,利用原生质体瞬时转化法检测该载体的表达;最后将该表达载体利用农杆菌介导法转化毛果杨,获得PtrANT-4转录激活遗传材料。结果表明:毛果杨中有4个PtrANTs转录因子,选取的PtrANT-4基因CDS序列全长为2 058 bp,编码685个氨基酸,在毛果杨侧生分生组织维管形成层特异表达。基于CRISPR-Act3.0表达系统成功构建的转录激活载体,在毛果杨木质部原生质体中转化后具有激活PtrANT-4表达的作用。获得的遗传转化植株中PtrANT-4基因仅在茎维管形成层中的表达量显著提高,说明PtrANT-4在茎维管形成层发育过程中可能起重要作用。该研究为PtrANT的功能研究奠定了一定研究基础,同时为维管形成层干细胞发育的机制研究提供了重要的遗传材料。 展开更多
关键词 CRISPR-dCas9 基因激活表达 PtrANT 毛果杨
下载PDF
毛果杨PtIPT5基因的克隆及低温胁迫表达分析
2
作者 毕田田 张骐 +2 位作者 代金玲 高秀芳 白玉娥 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第22期14-23,共10页
为探究异戊稀基转移酶基因(IPT)的抗逆机理,通过PCR技术从毛果杨叶片中克隆了IPT基因,命名为PtIPT5,对该基因及其蛋白进行生物信息学分析,并使用实时荧光定量技术(qRT-PCR)分析其在毛果杨组培苗不同组织及不同程度低温处理下的表达特性... 为探究异戊稀基转移酶基因(IPT)的抗逆机理,通过PCR技术从毛果杨叶片中克隆了IPT基因,命名为PtIPT5,对该基因及其蛋白进行生物信息学分析,并使用实时荧光定量技术(qRT-PCR)分析其在毛果杨组培苗不同组织及不同程度低温处理下的表达特性。结果表明,PtIPT5基因编码区(coding sequence,CDS)长度为984 bp,可编码327个氨基酸残基;PtIPT5蛋白为稳定亲水蛋白,且无信号肽和跨膜结构,含有GxxGxGK[S,T]保守基序;系统进化树分析结果显示,毛果杨PtIPT5蛋白与美洲黑杨、红皮柳等杨柳科植物的IPT亲缘关系较近;同源蛋白结构域分析结果显示,IPT蛋白高度保守,只有Cas3_I superfamily结构域;亚细胞定位预测PtIPT5蛋白位于叶绿体中;启动子分析结果显示,PtIPT5基因的启动子序列包含多种胁迫响应的顺式作用元件;PtIPT5基因在毛果杨茎段、顶芽、腋芽、主根、侧根、幼嫩叶、扩展叶和黄化衰老叶中均有表达,其中在顶芽、根部和幼嫩叶中相对表达量较高;低温胁迫下,PtIPT5基因的相对表达量随温度降低和胁迫时间增加显著下降,据此推测该基因响应低温胁迫并发挥调控作用。 展开更多
关键词 毛果杨 PtIPT5基因 克隆 低温胁迫 生物信息学 表达分析
下载PDF
毛果杨多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白家族PtPGIP的生物信息学分析
3
作者 刘海静 田星 +4 位作者 王露 宫海丰 殷涵 刘浩宁 包玉英 《山西农业科学》 2023年第8期852-860,共9页
植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(Polygalacturonase-inhibiting protein,PGIP)可特异性识别病原菌分泌的多聚半乳糖醛酸酶,从而抑制病原菌对植物细胞壁重要成分——果胶的降解,以增强植物病原菌抗性。为探明模式树种杨树PGIP抗病机制,对... 植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(Polygalacturonase-inhibiting protein,PGIP)可特异性识别病原菌分泌的多聚半乳糖醛酸酶,从而抑制病原菌对植物细胞壁重要成分——果胶的降解,以增强植物病原菌抗性。为探明模式树种杨树PGIP抗病机制,对毛果杨PGIP(PtPGIP)家族成员进行鉴定,以及对蛋白质理化性质和结构、系统进化、基因表达模式进行分析。结果表明,毛果杨基因组中鉴定到4个PtPGIP基因,其中,PtPGIP1和PtPGI2位于6号染色体串联重复,PtPGIP3和PtPGIP4位于16号染色体串联重复;PtPGIP1是假基因,PtPGIP2、PtPGIP3、PtPGIP4具有完整的PGIP蛋白结构域。PtPGIP均为疏水蛋白,具有良好的脂溶性,且具有3~7个N-糖基化位点。亚细胞定位预测表明,其可能定位于细胞外。除PtPGIP1以外,PtPGIP2、PtPGIP3、PtPGIP4蛋白均包含10个LRR片段,LRR中的保守序列xxLxLxx及蛋白质分子对接均表现出差异性。PtPGIP基因的表达具有组织特异性,PtPGIP1基因在各个组织部位的表达水平均较低,PtPGIP2和PtPGIP4基因在根、幼苗、花序中的表达量高于叶片,尤其是PtPGIP2基因在花序中的表达量最高,说明毛果杨PGIP基因家族发生了功能分化,使其在应对多种逆境胁迫中发挥重要作用。 展开更多
关键词 毛果杨 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 基因序列 表达模式 蛋白结构
下载PDF
毛果杨BBX基因家族鉴定与生物信息学分析 被引量:1
4
作者 齐小坤 孟祥熹 +4 位作者 赵志明 袁梦婷 杨志慧 武江昊 王进茂 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期41-49,共9页
BBXs(B-box)转录因子家族在植物生长发育和胁迫反应中发挥重要作用。本研究利用生物信息学手段在毛果杨(Populus trichocarpa)基因组筛选并鉴定出28个PtBBXs基因家族成员,对该家族成员进行结构和表达分析表明,PtBBXs基因不均匀地分布于1... BBXs(B-box)转录因子家族在植物生长发育和胁迫反应中发挥重要作用。本研究利用生物信息学手段在毛果杨(Populus trichocarpa)基因组筛选并鉴定出28个PtBBXs基因家族成员,对该家族成员进行结构和表达分析表明,PtBBXs基因不均匀地分布于15条染色体上,其编码的氨基酸残基数介于184-514,全部为酸性蛋白质。依据基因结构和蛋白质保守基序,可将其分为5个组(A-E),全基因组加倍事件是PtBBXs家族基因数量扩增的主要方式。PtBBX家族基因的启动子区域包含大量激素(脱落酸、赤霉素,和水杨酸等)与非生物胁迫(干旱、低温)响应相关的元件,大多数PtBBXs基因在叶片中高表达,而少量PtBBXs基因(PtBBX5/11/12/28)在根或花序中高表达。转录组数据分析表明,PtBBXs在响应非生物胁迫过程中分工不同,组A和组D的多数成员响应了茉莉酸、水杨酸和低温处理,组B(PtBBX16/19)和组C(PtBBX1/2)基因同时响应盐和干旱胁迫。这些结果为今后进一步挖掘PtBBX基因家族成员功能,以及创制林木抗逆新种质,提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 BBX基因家族 毛果杨 生物信息学 转录响应
下载PDF
毛果杨RAV基因家族生物信息学与组织表达分析
5
作者 范文欣 刘秋艳 +3 位作者 陈甜 王一淇 王海凌 王晓立 《安徽农学通报》 2023年第22期69-73,共5页
鉴定毛果杨基因组上RAV同源蛋白(PtRAV),为进一步分析毛果杨RAV同源蛋白基因提供信息。从Phytozome数据库中查找已知RAV基因保守蛋白序列,通过毛果杨数据库得到毛果杨全基因组RAV保守蛋白序列。解析RAV基因物理化学性质和亚细胞定位用,... 鉴定毛果杨基因组上RAV同源蛋白(PtRAV),为进一步分析毛果杨RAV同源蛋白基因提供信息。从Phytozome数据库中查找已知RAV基因保守蛋白序列,通过毛果杨数据库得到毛果杨全基因组RAV保守蛋白序列。解析RAV基因物理化学性质和亚细胞定位用,构建系统发育树以及组织表达。本研究有利于为后续克隆毛果杨RAV基因提供信息,并为RAV同源蛋白功能的解析、调控网络的构建以及为植物的生长发育及抗逆中的作用提供一定的参考。 展开更多
关键词 毛果杨 RAV 理化性质分析 组织表达
下载PDF
毛果杨NLP基因家族生物信息学分析与鉴定 被引量:9
6
作者 吴翔宇 许志茹 +3 位作者 曲春浦 李蔚 孙琦 刘关君 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期37-43,61,共8页
NLP基因家族是一类特殊的转录因子,豆科植物根瘤的形成依赖于该基因家族的存在,在非豆科植物中具有调节植物硝酸盐吸收以及同化的功能。通过对毛果杨(Populus trichocarpa)基因组的生物信息学分析,共鉴定出14个毛果杨NLP基因家族成员,... NLP基因家族是一类特殊的转录因子,豆科植物根瘤的形成依赖于该基因家族的存在,在非豆科植物中具有调节植物硝酸盐吸收以及同化的功能。通过对毛果杨(Populus trichocarpa)基因组的生物信息学分析,共鉴定出14个毛果杨NLP基因家族成员,这些成员具有低亲水性的特点,基因结构保守,都含有RWP-RK以及PB1两个保守结构域。通过细胞定位预测,所有成员都定位在细胞核中。直系同源与旁系同源进化分析显示,NLP基因家族成员在漫长的进化过程中经历了严格的选择。染色体定位分析表明,毛果杨NLP基因家族成员坐落在毛果杨9条染色体之上,成员数量的扩增来自于杨柳科染色体自身的扩增事件。芯片数据分析结果显示,NLP基因家族成员在嫩叶,根和雄花中表达,部分基因在木质部以及种子萌发过程之中表达,但所有成员均不在成熟叶片中表达。 展开更多
关键词 毛果杨 NLP 基因家族 表达模式
下载PDF
毛果杨HDAC基因家族序列及其表达分析 被引量:7
7
作者 李淑娟 张超 +2 位作者 张彦妮 董亚茹 马旭俊 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第3期63-76,共14页
【目的】研究毛果杨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)基因家族序列及其对脱落酸(ABA)的应答反应,为HDAC家族基因的功能研究奠定基础。【方法】采用生物信息学方法对毛果杨HDAC家族的16种蛋白进行系统分析;采用实时荧光定量PCR方法,分析了100μmol... 【目的】研究毛果杨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)基因家族序列及其对脱落酸(ABA)的应答反应,为HDAC家族基因的功能研究奠定基础。【方法】采用生物信息学方法对毛果杨HDAC家族的16种蛋白进行系统分析;采用实时荧光定量PCR方法,分析了100μmol/L ABA叶面喷洒处理后6和24h毛果杨叶片HDAC家族16个基因的表达情况。【结果】HDAC家族蛋白分析显示,毛果杨HDAC可分为3个亚家族,即RPD3/HDA1、HD2和SIR2亚家族,与拟南芥HDAC蛋白的亲缘关系较近。HDAC家族大多数成员为亲水性蛋白质(HDA912属于疏水性蛋白),其等电点呈酸性(除了HDA912和SIR2亚家族)。HDAC家族蛋白受磷酸化调节,磷酸化位点主要发生在丝氨酸残基上。绝大部分HDAC蛋白都有不同数目的跨膜螺旋和不同的跨膜方向,而在HD2蛋白中没有发现跨膜区。二级结构分析显示,RPD3/HDA1和SIR2亚家族成员均含有不同比例的α-螺旋、β-折叠片和无规则卷曲,其中无规则卷曲比例达到50%以上(HDA912除外);而HD2亚家族成员不含有α-螺旋,其二级结构主要以无规则卷曲为主,比例高达80%左右。HDAC家族蛋白主要定位于细胞核内,在细胞质、细胞器及其他膜结构中也有分布,HD2蛋白几乎都定位于细胞核内。RPD3/HDA1和SIR2亚家族成员的三级结构可分为6种类型,预示其生物学功能也可能存在差异。实时荧光定量PCR分析结果表明,ABA处理6h显著提高了毛果杨HDA901、HDA903和HDT901基因的表达,而ABA处理24h则会显著降低HDA907和HDT901基因的表达。【结论】作为植物特有的一类组蛋白去乙酰化酶,毛果杨HD2亚家族蛋白在序列和结构等多个方面与其他2个亚家族不同。ABA能够调节杨树HDAC家族基因的表达,HDAC家族基因不同成员对ABA的应答反应不同。 展开更多
关键词 毛果杨 组蛋白去乙酰化酶 生物信息学 脱落酸(ABA) 基因表达
下载PDF
拟南芥、水稻和毛果杨中CesA基因的进化和表达分析 被引量:5
8
作者 朱煜 谭梦月 +3 位作者 邹爱兰 张文举 戚金亮 杨永华 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期11-16,共6页
纤维素是植物细胞壁的主要成分,纤维素合成酶是纤维素合成过程中重要的酶类。利用拟南芥(草本植物)、水稻(禾本科作物)、毛果杨(木本植物)3种已知全基因组序列的模式植物,对纤维素合成酶基因(CesA)家族的成员进行系统分析,了解CesA基因... 纤维素是植物细胞壁的主要成分,纤维素合成酶是纤维素合成过程中重要的酶类。利用拟南芥(草本植物)、水稻(禾本科作物)、毛果杨(木本植物)3种已知全基因组序列的模式植物,对纤维素合成酶基因(CesA)家族的成员进行系统分析,了解CesA基因超基因家族的进化关系。研究结果表明,CesA基因在物种分化之前就已经存在,并且在各个物种内部出现了基因扩张,不同物种扩张程度不同,整个基因家族呈负选择压力。为进一步探讨该家族基因的表达调控模式,以水稻为例对该基因家族的启动子元件进行了分析,发现OsCesA基因可能受到多种胁迫和激素信号的调控;而RT-PCR结果表明ABA可以显著下调该类基因的表达。 展开更多
关键词 拟南芥 水稻 毛果杨 纤维素合成酶基因 进化树 基因表达
下载PDF
毛果杨全基因组NBS类型抗病基因分析 被引量:5
9
作者 吴大强 蔡诚 +1 位作者 魏国 项艳 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期152-157,共6页
A full set of disease resistance(R) candidate genes encoding nucleotide-binding sites(NBS) in a complete genome of Populus trichocarpa was identified and characterized by structural diversities,physical positions,phyl... A full set of disease resistance(R) candidate genes encoding nucleotide-binding sites(NBS) in a complete genome of Populus trichocarpa was identified and characterized by structural diversities,physical positions,phylogenetic relationships.Based on structures of N-terminal motif and leucine-rich repeat domains motif,we found 381 NBS-coding sequences with 122 non-regular NBS genes and 259 regular NBS genes that were further classified into 13 types such as TNL,CNL,NL,XNL,TN and other minor types.Meanwhile 81.9% of the NBS genes were distributed in cluster,and 81.8% of the cluster genes had duplicates.The results showed that there were many duplicate phenomenon occurred in the evolution of disease resistance genes of P.trichocarpa.After analysis of NBS standard phylogenetic tree in the genome of P.trichocarpa,the structure of tree exhibited a star topology,and the regular NBS genes were classified into 68 groups by less than 30% amino acid sequence diversity in each domain. 展开更多
关键词 毛果杨 生物信息学 抗病基因 NBS 系统进化树
下载PDF
毛果杨中链酰基辅酶A合成酶的克隆及酶学分析 被引量:3
10
作者 曹山 蒋璐瑶 +6 位作者 李丽红 要笑云 张强 撖静宜 王莹 李慧 陆海 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期9-15,共7页
中链酰基辅酶A合成酶(MACS)属于腺苷酸合成酶超基因家族,催化中链脂肪酸与辅酶A结合形成相应的中链酰基辅酶A。本研究通过同源检索毛果杨基因组数据库中的4CL基因,克隆得到毛果杨Pt MACS1的基因序列(基因编号:est Ext_fgenesh4_pg.c_640... 中链酰基辅酶A合成酶(MACS)属于腺苷酸合成酶超基因家族,催化中链脂肪酸与辅酶A结合形成相应的中链酰基辅酶A。本研究通过同源检索毛果杨基因组数据库中的4CL基因,克隆得到毛果杨Pt MACS1的基因序列(基因编号:est Ext_fgenesh4_pg.c_640066)。通过序列分析可知,Box I和Box II两个在4CL中保守的结构域在该蛋白中并不保守。将Pt MACS1与原核表达载体p ET-30a(+)构建融合表达载体Pt MACS1-p ET-30a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白进行表达。镍柱纯化重组蛋白后进行酶学活性分析,研究结果表明该蛋白对中链脂肪酸己酸、壬酸、癸酸显示出明显活性:Kcat分别为(130±2.65)、(193±3.46)、(201±5.51)μmol/(min·mg),以该蛋白的最适底物癸酸测得该蛋白的最适反应温度为37℃,最适反应p H为7.0。该结果表明,Pt MACS1属于毛果杨中链酰基辅酶A合成酶家族一员,为后续毛果杨腺苷酸合成酶超基因家族的鉴定及分类分析提供资料。 展开更多
关键词 毛果杨 MACS 克隆 原核表达 酶学分析
下载PDF
毛果杨Eukaryotic translation initiation factor 5A(eIF5A)同源基因的生物信息学分析 被引量:4
11
作者 邵龙婷 郑唐春 +2 位作者 臧丽娜 李爽 曲冠证 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期141-149,共9页
为研究毛果杨eIF5A基因间的同源性及其进化关系,以毛果杨的eIF5A基因为研究对象,利用生物信息学软件及网站对其进行碱基分布、氨基酸组成、亲疏水性、保守区以及二级结构和三级结构的预测与分析,并与其他物种的eIF5A氨基酸序列进行多重... 为研究毛果杨eIF5A基因间的同源性及其进化关系,以毛果杨的eIF5A基因为研究对象,利用生物信息学软件及网站对其进行碱基分布、氨基酸组成、亲疏水性、保守区以及二级结构和三级结构的预测与分析,并与其他物种的eIF5A氨基酸序列进行多重比对与进化分析。结果表明,4个毛果杨eIF5A基因定位于不同染色体上,且都只含有5个外显子;研究还发现不同成员间氨基酸数目、氨基酸序列间的疏水性存在一定的差异;亚细胞定位分析表明,4个eIF5A蛋白均定位于细胞质上;二级结构预测结果显示,4个eIF5A氨基酸序列以无规则卷曲、扩展链和α-螺旋为主要组成部分,且4条氨基酸序列三维结构十分相似。上述结果均为毛果杨eIF5A基因家族的进一步功能分析提供了一定基础。 展开更多
关键词 毛果杨 EIF5A 生物信息学
下载PDF
毛果杨全基因组硝酸根转运蛋白家族(NRT2s)序列分析 被引量:4
12
作者 袁丁 李红 +1 位作者 郝文芳 罗志斌 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期80-86,共7页
以拟南芥(Arabidopsis thaliana)和莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardttii)高亲和性硝酸根转运蛋白(NRT2s)为对照,对毛果杨(Populus trichocarpa)NRT2s家族成员进行序列比对、系统发育分析、基因结构分析、理化性质预测、疏水性与跨膜区... 以拟南芥(Arabidopsis thaliana)和莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardttii)高亲和性硝酸根转运蛋白(NRT2s)为对照,对毛果杨(Populus trichocarpa)NRT2s家族成员进行序列比对、系统发育分析、基因结构分析、理化性质预测、疏水性与跨膜区预测、结构域检测等生物信息学分析。结果表明:毛果杨基因组包含6个NRT2s家族成员并可分为3个亚家族。其中PtNRT2.1、PtNRT2.2和PtNRT2.3属于亚家族I;PtNRT2.4和PtNRT2.5属于亚家族II;PtNRT2.6属于亚家族III。亚家族I保守程度最高,亚家族II和III可能由亚家族I进化而来。所有的NRT2s都具有高度相似的结构域、功能区和基因结构,在不同物种中的进化较为保守。不同的NRT2s成员定位于不同的亚细胞结构中,其具体功能可能存在差异,并共同参与调控杨树的硝态氮平衡。 展开更多
关键词 氮素营养 硝酸根 转运蛋白 毛果杨 序列分析
下载PDF
毛果杨PLD基因家族全基因组水平鉴定及其盐胁迫下的表达分析 被引量:4
13
作者 刘聪 张洋 +2 位作者 夏德安 陈雪冰 魏志刚 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2021年第3期23-36,共14页
[目的]对木本模式植物毛果杨PLD基因家族的进化中的选择压力、启动子中顺式作用元件、组织表达特性以及盐胁迫下表达模式进行分析,为挖掘PtrPLD在非生物胁迫中作用提供参考。[方法]利用拟南芥PLD基因家族蛋白序列比对得到毛果杨基因组... [目的]对木本模式植物毛果杨PLD基因家族的进化中的选择压力、启动子中顺式作用元件、组织表达特性以及盐胁迫下表达模式进行分析,为挖掘PtrPLD在非生物胁迫中作用提供参考。[方法]利用拟南芥PLD基因家族蛋白序列比对得到毛果杨基因组同源基因,再经过保守结构域鉴定后确定PtrPLD基因;利用软件ClustalW和MEGA对PtrPLD和AtPLD基因的氨基酸序列进行比对和系统进化分析;利用MEME、PlantmPLoc、 ExPasy等软件工具分析PtrPLD基因及编码蛋白的特征;利用Tbtools软件分析同源基因的Ka/Ks值;利用Plantcare在线工具分析PtrPLD启动子中顺式作用元件;利用Phytozome转录组数据库以及qRT-PCR分析PtrPLD组织表达特性;利用qRT-PCR分析各组织中PtrPLD对盐胁迫响应情况。[结果]PtrPLD家族的16个基因可分为C2-PLD和PX/PH-PLD 2个亚家族,分别包含13个和3个基因;有7对旁系同源基因且它们之间的Ka/Ks均远小于1;PtrPLD家族基因启动子区含有大量非生物胁迫和激素响应元件,其中,PtrPLDδ4启动子共含有9种、20个元件;PtrPLD家族编码的蛋白均含有Motif 1~4,且同一进化分支上的基因编码蛋白序列高度保守。PtrPLD基因家族表达特性分析表明,PtrPLD家族基因在根、茎和叶中具有表达特异性,并且多数成员主要在根部表达;NaCl胁迫下,PtrPLD家族基因在根、茎和叶中表达量在0~72 h内均表现为先上升后下降再上升的变化趋势。[结论]PtrPLD家族基因在毛果杨响应盐胁迫过程中有着重要作用,本项研究对于今后PtrPLD家族基因生物学功能的鉴定与非生物逆境胁迫响应基因资源的挖掘具有推动作用。 展开更多
关键词 毛果杨 PLD基因家族 生物信息学分析 盐胁迫
下载PDF
毛果杨叶肉原生质体分离及BpFLA20基因亚细胞定位 被引量:3
14
作者 于淼 于颖 +2 位作者 李泓莹 杨佳绒 王超 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期9-14,共6页
以毛果杨(Populus trichocarpa)幼嫩叶片为材料,进行原生质体分离,结果表明,酶解液(20 mL)的组成为1.5%纤维素酶R10+0.4%离析酶+2 mL 0.2 mol/L MES+10 mL 0.8 mol/L甘露醇+0.2 mL 2 mol/L KCl,所得原生质体为2×10^5个细胞/mL。在... 以毛果杨(Populus trichocarpa)幼嫩叶片为材料,进行原生质体分离,结果表明,酶解液(20 mL)的组成为1.5%纤维素酶R10+0.4%离析酶+2 mL 0.2 mol/L MES+10 mL 0.8 mol/L甘露醇+0.2 mL 2 mol/L KCl,所得原生质体为2×10^5个细胞/mL。在此基础上,对白桦中一个FLA(fasciclin-like arabinogalactan-protein)基因BpFLA20进行了亚细胞定位研究。系统进化分析显示,BpFLA20蛋白在序列上与次生壁合成相关的AtFLA11和AtFLA12蛋白相近。以白桦的根、茎、叶cDNA为模版,进行了荧光定量PCR实验,结果表明该基因在根中的表达量最高,在叶中的表达量最低。以本研究分离的毛果杨原生质体为受体,利用PEG介导的原生质体瞬时转化法将35S::FLA20-GFP融合表达载体转化到毛果杨原生质体中进行亚细胞定位研究,结果显示,BpFLA20蛋白定位于细胞膜。 展开更多
关键词 毛果杨 原生质体分离 BpFLA20基因 亚细胞定位
下载PDF
转KN1毛果杨细胞分裂素、赤霉素含量及其相关形态结构 被引量:2
15
作者 李岩 赵德刚 +1 位作者 王新俊 车小红 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1093-1096,共4页
为了研究KN1基因超量表达对木本植物生长发育的影响,本研究测定了转KN1基因毛果杨细胞分裂素类激素及赤霉素的含量,并进行表型及解剖结构观察。结果表明,转基因毛果杨植株细胞分裂素类激素ZR、dhZR和iPA的含量分别为14.14ng/g、18.29ng/... 为了研究KN1基因超量表达对木本植物生长发育的影响,本研究测定了转KN1基因毛果杨细胞分裂素类激素及赤霉素的含量,并进行表型及解剖结构观察。结果表明,转基因毛果杨植株细胞分裂素类激素ZR、dhZR和iPA的含量分别为14.14ng/g、18.29ng/g和12.43ng/g,明显高于对照的9.44ng/g、12.47ng/g和7.60ng/g,而赤霉素GAs含量为9.61ng/g,低于对照的12.14ng/g,从而引起其植株矮化、分枝增加、叶片增厚、叶色变深、表皮细胞增大、栅栏和海绵组织发达等现象。本研究将为探索KN1基因对木本植物生长发育的影响提供依据。 展开更多
关键词 毛果杨 KN1基因 细胞分裂素含量 解剖结构
下载PDF
毛果杨半胱氨酸蛋白酶基因PtCP2和PtCP4原核表达及蛋白纯化 被引量:1
16
作者 张强 李丽红 +6 位作者 要笑云 蒋璐瑶 王莹 撖静宜 曹山 李慧 陆海 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期511-518,共8页
【目的】对毛果杨半胱氨酸蛋白酶基因Pt CP_2和Pt CP4进行原核表达及重组蛋白纯化,为进一步研究该基因的酶学特征和生理功能打下基础。【方法】从毛果杨中克隆两个半胱氨酸蛋白酶基因Pt CP_2和Pt CP4,构建其原核表达载体p ET-30a-Pt CP_... 【目的】对毛果杨半胱氨酸蛋白酶基因Pt CP_2和Pt CP4进行原核表达及重组蛋白纯化,为进一步研究该基因的酶学特征和生理功能打下基础。【方法】从毛果杨中克隆两个半胱氨酸蛋白酶基因Pt CP_2和Pt CP4,构建其原核表达载体p ET-30a-Pt CP_2及p ET-30a-Pt CP4,并在转入大肠杆菌后在体外诱导表达重组蛋白,采用包涵体洗涤法对目的蛋白进行纯化。【结果】Pt CP_2基因CDS序列全长1107 bp,编码368个氨基酸;Pt CP4基因CDS序列全长1104 bp,编码367个氨基酸。Pt CP_2和Pt CP4基因编码的蛋白均属于RD19A-like类型木瓜蛋白酶。Pt CP_2和Pt CP4基因在毛果杨根、茎、叶中均有表达,其中Pt CP_2在叶中表达量最高,Pt CP4在根中表达量最高。通过包涵体洗涤法在体外得到了高表达量、单一的重组蛋白Pt CP_2和Pt CP4,切除信号肽后蛋白酶大小分别为38.151和38.069 k D。【结论】原核表达获得的纯化重组蛋白Pt CP_2和Pt CP4可用于进一步研究毛果杨半胱氨酸蛋白酶的酶学特征和生理功能。 展开更多
关键词 毛果杨 半胱氨酸蛋白酶 原核表达 蛋白纯化 定量PCR
下载PDF
毛果杨RAV/PLC基因生物信息学分析 被引量:1
17
作者 孙尧 孙鑫 王雷 《广东农业科学》 CAS 2019年第12期36-41,I0001,共7页
【目的】利用生物信息学手段,对毛果杨(Populus trichocarpa)RAV/PLC基因编码蛋白质结构和特征进行预测。【方法】以PLC(Phospholipases C)为关键字在Phytozome数据库搜索毛果杨磷脂酶C基因序列,以RAV/PLC基因及其蛋白质序列为研究对象... 【目的】利用生物信息学手段,对毛果杨(Populus trichocarpa)RAV/PLC基因编码蛋白质结构和特征进行预测。【方法】以PLC(Phospholipases C)为关键字在Phytozome数据库搜索毛果杨磷脂酶C基因序列,以RAV/PLC基因及其蛋白质序列为研究对象,利用多种生物信息学分析工具对其基因结构及蛋白功能进行分析。【结果】在毛果杨PLC编码基因中发现了一个可编码RAV和PLC结构域的特殊基因,该基因在Phytozome数据库中编号为Potri.018G109200,ORF区域长度为1650 bp,编码549个氨基酸,预测分子量为62.72338 ku,理论等电点为9.16;该基因在茎中表达量最高,芽中表达量其次之根和叶中表达量较低。其编码蛋白包含1个AP2结构域、1个B3结构域和1个PLC-X结构域,AP2/B3结构域和PLC-X结构域之间可能存在一个跨膜区;启动子元件分析表明,RAV/PLC基因可能与光应答及激素应答相关;String软件预测RAV/PLC基因可能与MYB103、WRKY49、ABI5、DXS2存在功能关联;KEGG分析表明,该基因主要与RAV转录因子信号通路有关;同时利用同源建模方法获得了RAV/PLC的完整三维模型。【结论】通过对RAV/PLC基因结构和蛋白功能预测,为该基因克隆及参与信号通路分析提供参考。 展开更多
关键词 毛果杨 RAV/PLC 结构分析 功能预测
下载PDF
毛果杨中与PtMKK4互作的PtMPKs的筛选及验证
18
作者 王磊 宿红艳 +2 位作者 顾亮 常志远 陈娜 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第10期60-66,共7页
【目的】在外界刺激传递到胞内引起细胞响应的信号转导网络中,促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联途径处于中心环节。该途径由MAPKKK,MAPKK和MAPK 3种蛋白激酶组成,各组分之间以逐级磷酸化的方式构成信号放大途径,特异感受上游刺激,将信号... 【目的】在外界刺激传递到胞内引起细胞响应的信号转导网络中,促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联途径处于中心环节。该途径由MAPKKK,MAPKK和MAPK 3种蛋白激酶组成,各组分之间以逐级磷酸化的方式构成信号放大途径,特异感受上游刺激,将信号放大并向下传递给靶蛋白。迄今尚未在杨树中确定一条完整的MAPK信号通路。毛果杨MAPKK成员PtMKK4在干旱信号转导中发挥重要作用,筛选、鉴定其进一步激活的靶标MAPKs将为深入理解MAPK级联途径调控植物逆境响应机制提供重要信息。【方法】利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术筛选、鉴定与PtMKK4互作的MAPKs,并采用半定量PCR方法对筛选到的PtMPKs在干旱和高盐胁迫处理下表达水平的变化进行分析。【结果】分别构建pGBKT7-PtMKK4诱饵表达载体和pGADT7-Pt MPKs猎物表达载体,共转化酵母Y2H感受态细胞。仅共转化p GBKT7-Pt MKK4和pGADT7-PtMPK6-1的酵母菌可在营养缺陷型筛选培养基SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His和SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal中生长,且在SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal中生长的菌落显示蓝色。双分子荧光互补试验进一步证实PtMKK4和PtMPK6-1存在蛋白互作。此外,与PtMKK4相似,PtMPK6-1可被20%PEG和200 mmol·L-1NaCl诱导表达。【结论】在毛果杨MAPK级联途径中,PtMPK6-1可能为PtMKK4激活的靶标。 展开更多
关键词 毛果杨 MAPK级联途径 酵母双杂交 双分子荧光互补
下载PDF
毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫能力分析
19
作者 遇文婧 杨帅 +1 位作者 黄颖 刁桂萍 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期51-58,共8页
【目的】研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫功能,为开发新型林木抗虫生物农药奠定基础。【方法】本研究通过研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子及其在舞毒蛾幼虫取食胁迫下的表达模式,分析PtrSPI基因功能;利用真... 【目的】研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫功能,为开发新型林木抗虫生物农药奠定基础。【方法】本研究通过研究毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子及其在舞毒蛾幼虫取食胁迫下的表达模式,分析PtrSPI基因功能;利用真核重组蛋白PtrSPI饲喂舞毒蛾幼虫,观察记录幼虫的取食量、体质量和死亡率,并测定取食后的幼虫体内丝氨酸蛋白酶活性,探讨PtrSPI蛋白的抗虫能力。【结果】结果表明毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子基因PtrSPI的启动子区域共包含5个与植物抗病虫相关的元件;经舞毒蛾幼虫取食后,毛果杨叶片的PtrSPI基因呈先降后升的表达模式,且在取食30 h达到峰值,为空白对照的2.03倍;高质量浓度重组蛋白PtrSPI(300和500 mg/mL)对舞毒蛾幼虫的取食量和体质量有显著的抑制作用,而且分别在取食4和6 d后舞毒蛾幼虫死亡率均达到60%以上,而幼虫体内丝氨酸蛋白酶的活性在取食初期显著上升。【结论】本研究验证了毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制子PtrSPI的抗虫能力,可为进一步研发新型无公害抗虫生物农药提供理论基础和研究材料。 展开更多
关键词 丝氨酸蛋白酶抑制子 毛果杨 抗虫功能 生物农药 舞毒蛾
下载PDF
毛果杨漆酶基因LAC-1的克隆与原核表达研究
20
作者 李丽红 撖静宜 +6 位作者 王莹 曹山 张强 蒋璐瑶 要笑云 李慧 陆海 《植物学研究》 2016年第2期39-46,共8页
目的:克隆毛果杨漆酶基因LAC-1,对其进行生物信息学分析,并构建原核表达载体在大肠杆菌中进行融合蛋白的诱导表达并纯化目的蛋白,为植物漆酶基因蛋白体外结构与功能的研究提供一定的理论基础。方法:根据同源克隆的原理,利用已经研究公... 目的:克隆毛果杨漆酶基因LAC-1,对其进行生物信息学分析,并构建原核表达载体在大肠杆菌中进行融合蛋白的诱导表达并纯化目的蛋白,为植物漆酶基因蛋白体外结构与功能的研究提供一定的理论基础。方法:根据同源克隆的原理,利用已经研究公布的拟南芥中的漆酶基因序列对毛果杨基因组数据库进行同源检索,利用PCR技术克隆毛果杨漆酶基因的序列,构建重组表达载体,转化大肠杆菌BL21并表达重组蛋白,通过Ni-NTA亲和层析进行纯化。结果:克隆获得了毛果杨漆酶基因的序列(命名LAC-1,基因登录号XP_002310245),序列分析表明LAC-1具有漆酶基因的保守结构域,进化树分析表明该序列与拟南芥的漆酶基因AtLAC4有较高的同源性,利用所构建的原核表达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳检测结果表明表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论:LAC-1属于毛果杨基因家族的一员,该漆酶基因可以在体外成功进行原核表达,为毛果杨漆酶基因家族成员的鉴定及后续活性功能的分析提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 毛果杨 LAC 基因克隆 序列分析 原核表达
下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部