毛细管电泳电化学发光联用技术及其应用进展

毛细管电泳吡啶钌电化学发光联用技术是一种高效、灵敏的分析技术,本文综述了近几年毛细管电泳电化学发光技术的发展以及在分析化学、生物分析化学领域的应用进展。

基于三联吡啶钌的毛细管电泳电化学发光联用技术及其在药物分析中的应用

毛细管电泳电化学发光联用技术具有分离效率高、分析速度快、线性范围宽、灵敏度高、试剂消耗少等优点而在分析领域得到广泛的应用。文中概述了基于三联吡啶钌(Ru(bpy)_3^(2+))的毛细管电泳电化学发光联用技术的发展,介绍了该联用技术的检测模式、实验装置及其在心血管类药物、生物碱中的分析应用,同时介绍了该技术在研究药物与蛋白质的相互作用及药代动力学中的应用,并展望了其良好的应用前景。

毛细管电泳-电化学发光联用测定琥乙红霉素

基于琥乙红霉素对联吡啶钌（Ru（bpy），3^2＋）电化学发光的增强作用，结合高效毛细管电泳分离技术，建立了一种毛细管电泳-电化学发光联用检测琥乙红霉素的新方法。分别对分离和检测条件进行了优化。优化条件下，琥乙红霉素的线性范围为0．7～10．0μmol／L，检测限为0．23μmol／L，峰高相对标准偏差RSD为4．1％。采用堆积放大进样技术可进一步提高检测灵敏度。本方法用于生物体液中琥乙红霉素的测定，回收率为81．3％～93．0％。

毛细管电泳联用电化学发光法测定食品中泰乐菌素的研究

基于泰乐菌素能增强联吡啶钌[Ru(bpy)32+]电化学发光信号的现象,结合毛细管电泳分离技术,建立了动物组织和蜂蜜中泰乐菌素测定的新方法。分别对检测和分离条件进行了优化,在优化的试验条件下,泰乐菌素在浓度为0.05～10.00μg/mL范围内具有良好的线性关系,检测限为0.02μg/mL,用于实际样品中泰乐菌素的测定,回收率为80.0%～95.0%。

毛细管电泳-电化学发光分离检测辣椒粉中罗丹明B

建立一种以三联吡啶钌(Ru(bpy)32+)为发光体系的毛细管电泳-电化学发光检测系统,并将其应用于分离和测定辣椒粉中的罗丹明B含量。考察检测电压、Ru(bpy)32+溶液浓度、磷酸盐缓冲液的p H值和浓度、分离电压、进样电压与进样时间等因素对分离检测的影响。结果表明:在检测电压1.14 V、Ru(bpy)32+溶液浓度5 mmol/L、磷酸盐缓冲溶液浓度20 mmol/L(p H 8.0)、进样时间10 s、进样电压10 k V、分离电压15 k V条件下,罗丹明B在6 min中得到分离。方法的线性范围为5×10-7~5×10-5 mol/L,检出限为1×10-7 mol/L(RSN=3)。对1.0×10-5 mol/L的罗丹明B标准溶液连续测定5次,迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为3.2%和1.5%。该方法可成功应用于辣椒粉中罗丹明B含量的测定。

毛细管电泳-电化学电化学发光及其微芯片技术

电化学和电化学发光检测法技术简单、原位和高灵敏度的特点使其能用作毛细管电泳、微芯片毛细管电泳检测器。本文结合本实验室近年来的工作讨论了题示技术的最新进展。

毛细管电泳-联吡啶钌电化学发光法对血浆中丁卡因与普鲁卡因的同时测定

建立了毛细管电泳-电致化学发光同时测定丁卡因和普鲁卡因的新方法。考察了毛细管电泳流动相和检测池中磷酸盐缓冲液pH和浓度、进样时间和电压、分离电压和检测电位等对丁卡因和普鲁卡因的分离以及联吡啶钌电致化学发光检测的影响。基于循环伏安法考察了丁卡因和普鲁卡因的电化学行为与发光机理。在优化的实验条件下,丁卡因和普鲁卡因的标准曲线分别在6.6～265.6μmol/L和0.7～219.0μmol/L范围内呈良好的线性,检出限（S/N=3）分别为1.9μmol/L和0.2μmol/L。对23μmol/L丁卡因和15μmol/L普鲁卡因的标准溶液连续测定5次,迁移时间的相对标准偏差（RSD）分别为0.13%、0.16%,电化学法发光强度的RSD分别为3.7%和4.9%。该方法已成功用于血浆中丁卡因和普鲁卡因的同时检测,平均回收率均为94%,相对标准偏差低于4%。

毛细管电泳-电化学发光/电化学检测法同时测定维生素B_1和B_6

建立了毛细管电泳-电化学发光/电化学检测（CE-ECL/EC）法同时测定维生素B1（VB1）和维生素B6（VB6）的新方法。在碱性条件下对VB1进行水解,可增强其电化学发光信号,并采用序贯均匀设计对毛细管电泳分离条件进行优化,测定VB1的电化学发光信号和VB6的电化学信号。VB1和VB6能在5min内得到良好的分离。电化学发光强度与VB1浓度在5.0~5 000.0μg/mL范围内具有良好的线性关系（r=0.997）,检测限（S/N=3）为2.7μg/mL;电流强度与VB6浓度在10.0~1 000.0μg/mL范围内具有良好的线性关系（r=0.998）,检测限（S/N=3）为6.8μg/mL。VB1和VB6的加标回收率范围为96.0%~100.0%,相对标准偏差为1.4%~6.7%。用建立的方法对复合VB片中的VB1和VB6进行测定,结果较好。

毛细管电泳-电化学发光间接测定人血浆中盐酸甲氯芬酯

建立了一种毛细管电泳-电化学发光间接测定人血浆中盐酸甲氯芬酯（MFX）的新方法。在碱性条件下，三联吡啶钌在铂电极上的弱电化学发光信号可以被MFX增敏，且MFX水解后灵敏度比未水解的灵敏度提高了6倍。研究了工作电极电位、磷酸盐缓冲溶液浓度及其pH值、分离电压、进样电压和进样时间等实验参数对MFX水解产物N，N-二甲氨基乙醇测定的影响。在优化实验条件下，其浓度线性范围为0.020～50μg／mL，检出限（3σ）为6．3ng／mL，峰高的相对标准偏差为3．1％（10μg／mL MFX，n=11）。利用该法间接地测定了人血浆中MFX的含量，回收率为95．9％～96．9％．

毛细管电泳电化学发光法测定盐酸帕罗西汀的研究

实验发现盐酸帕罗西汀能增强钌联吡啶的电化学发光信号,据此建立了一种盐酸帕罗西汀的毛细管电泳-电化学发光测定新方法。在实验中,分别对毛细管电泳分离条件和电化学发光检测条件进行了优化。在优化的实验条件下,盐酸帕罗西汀检出限为3.45×10^-8g/mL（S/N=3）,线性范围为3.0×10^-7-1.0×10^-4g/mL。通过对1.0×10^-5g/mL的盐酸帕罗西汀进行11次平行测定,峰高的RSD为2.5%。已用于盐酸帕罗西汀片剂的测定。

毛细管电泳电化学发光用于丙吡胺及其与血浆蛋白结合率的测定

本实验利用透析袋平衡透析、毛细管电泳Ru(bpy)32+电化学发光检测技术测定了丙吡胺和人血浆蛋白的结合率。在恒电位1.3V;进样电压10kV持续10s,分离电压15kV,运行缓冲液30mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5),检测池中为5mmol/LRu(bpy)32+稀释于50mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5)中等最优化的条件下,丙吡胺的检出限为10μmol/L(S/N=3)。对蛋白结合率的测定结果表明,人血浆中的药物浓度为1.6～8.2mmol/L,丙吡胺与血浆蛋白的结合是呈线性的,其线性回归方程为y=-0.07+0.93x,线性相关系数r为0.9999,丙吡胺与人血浆蛋白的结合率约为90.4%。

毛细管电泳-间接电化学发光法对茶叶中百草枯农药残留的检测

基于农药百草枯对钌联吡啶-三丙胺（TPA）体系的电化学发光具有显著的抑制作用，建立了毛细管电泳-间接电化学发光检测茶叶中残留农药百草枯的新方法。讨论了初始电位、钌联吡啶和TPA浓度、进样电压、进样时间、运行缓冲溶液的浓度与pH值等条件对百草枯检测灵敏度的影响。确定最佳实验条件为1．20V初始电压、0．7mmol／L钌联吡啶、0．6mmol／LTPA、9kV进样电压、9s进样时间、35mmol／L磷酸盐（pH8．5）为运行缓冲溶液。在优化实验条件下，百草枯浓度在5×10^-7-5×10^-5mol／L范围内呈良好线性（相关系数为0．9945），检出限为9．4×10^-8mol／L。对5×10^-5mol／L百草枯标准溶液连续测定5次，相对峰高与迁移时间的相对标准偏差分别为3．7％和2．1％。该方法对2．0×10^-6、1．0×10^-5mol／L百草枯标样的萃取回收率分别为74％和83％，相对标准偏差分别为15％、4．2％（n=5）。

毛细管电泳-电化学发光法研究阿莫西林在人尿中的药代动力学

建立了毛细管电泳-电化学发光（CE-ECL）法测定人尿中阿莫西林的新方法，并将该方法用于人尿中阿莫西林药代动力学的研究。结果表明：阿莫西林在尿液中平均回收率为95．35％，该方法的线性范围为0．001～5．0μg／mL，检出限（3σ）为0．32ng／mL，对1．0μg／mL阿莫西林连续测定6次，其相对标准偏差小于2．0％。给药后6h内的排泄率为44．54％，人尿中阿莫西林最大药物浓度出现时间为1．0～1．5h。本方法用于人尿中阿莫西林药代动力学的研究具有快速、简便、灵敏、样品用量少等特点。

毛细管电泳柱端电化学发光法分离测定药物和尿液中的盐酸维拉帕米

采用带有柱端电化学发光(ECL)检测池的毛细管电泳(CE)法分离并测定盐酸维拉帕米(Verapamil,VRPM)。盐酸VRPM作为共反应剂,增强了吡啶钌的电化学发光强度。在优化的条件下,ECL强度与VRPM在7.0×10-7～5.0×10-4mol/L范围内呈良好的线性关系;检出限(S/N=3)为4.6×10-8mol/L。本方法已成功用于药物和人体尿样中盐酸VRPM含量的测定。研究了VRPM与牛血红蛋白(BHb)的相互作用,计算其结合常数为3.72×103L/mol,最大结合量为1.375×10-4mol。

用毛细管电泳电化学发光法测定盐酸氟西汀的含量

目的:在实验中观察到盐酸氟西汀能增强钌联吡啶的电化学发光信号,基此建立了一种盐酸氟西汀的毛细管电泳-电化学发光新方法。方法:在实验中,对毛细管电泳分离条件和电化学发光检测条件进行了优化。结果:在优化的实验条件下,测得盐酸氟西汀线性范围为5.0×10^(-7)～1.0×10^(-4)g·mL^(-1),检出限为5.75×10^(-8)g·mL^(-1)(S/N=3)。对1.0×10—5 g·mL^(-1)的盐酸氟西汀进行11次平行测定,峰高的相对标准偏差(RSD)为2.0%。结论:该方法可用于测定盐酸氟西汀片剂的含量。

毛细管电泳柱端电化学发光法测定文拉法辛对映异构体浓度

以磺化β-环糊精(S-β-CD)为手性选择剂,建立了毛细管电泳-电化学发光法测定文拉法辛(VEN)对映体浓度的方法。考察了S-β-CD浓度、缓冲液pH值及浓度、进样时间与电压、分离电压和检测电位对VEN对映体分离以及联吡啶钌电致化学发光检测的影响,优化了分离条件,考察了VEN的电化学行为与发光机理。在优化条件下,2种VEN对映体在0.1～1 000μg/L质量浓度范围内与其发光强度呈良好线性,检出限分别为0.01、0.05μg/L。该法用于人血浆中VEN对映体的分离检测,两对映体的回收率为94%～100%,相对标准偏差不大于3.2%。

毛细管电泳-联吡啶钌电化学发光测定利多卡因

基于利多卡因对联吡啶钌在铂电极上的电致发光信号有增敏作用,建立了一种测定利多卡因的毛细管电泳-电化学发光分析方法.讨论了磷酸盐缓冲液pH值、浓度、分离电压、检测电位等实验参数对利多卡因分离检测的影响.在优化的实验条件下,利多卡因在1.5～740μmol/L内呈良好线性,检出限为0.1μmol/L.应用此法测定了尿液中利多卡因的含量,回收率为90%～93.5%.

毛细管电泳-电化学发光测定人尿中的氟哌啶醇

建立毛细管电泳电化学发光法测定氟哌啶醇的新方法.考察了工作电极电位、磷酸盐缓冲液浓度及其pH值等对氟哌啶醇测定的影响.在优化实验条件下,氟哌啶醇浓度线性范围为0.01～10 mg·L^-1,检出限（3σ）为3.5μg·L^-1;相对标准偏差为1.6%（3.0 mg·L^-1,n=11）.利用该法测定了人尿加标后氟哌啶醇的含量,回收率为95.0%～99.5%.

毛细管电泳电化学发光检测香草扁桃酸和高香草酸

利用毛细管电泳电化学发光(CE-ECL)法检测了尿样中的香草扁桃酸(VMA)和高香草酸(HVA),得到了最佳的分离检测条件:50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH 8.2);分离电压16kV;检测电势1.2V(相对于饱和甘汞电极).在最佳条件下,VMA和HVA的浓度检测限(S/N=3)分别为5.0×10-7 mol/L和6.1×10-7 mol/L,线性回归系数分别为0.999 3和0.997 9.并以此方法将尿液中的VMA和HVA在10min内有效地分离检测,不受其他干扰,得到加标回收率分别为98%和99%,取得了满意的结果.

毛细管电泳-电化学发光法测定盐酸曲马多制剂及血浆中曲马多

采用毛细管电泳结合柱末电化学发光检测器提出了测定盐酸曲马多制剂及血浆中曲马多含量的方法。检测的原理系基于曲马多分子中的叔氨基对在pH9的磷酸盐缓冲介质中钌联吡啶络离子[Ru(Bpy)23+]与溶解氧在铂盘工作电极上反应的电化学发光的增强作用。对毛细管电泳及电化学发光检测的试验条件进行了优化。在优化的试验条件下,制剂中曲马多在1.0×10-8～7.0×10-6mol.L-1,血浆中曲马多在2.0×10-7～6.0×10-6mol.L-1范围内呈线性,检出限(3S/N)分别为7.0×10-9mol.L-1和1.0×10-7mol.L-1。采用该方法对盐酸曲马多制剂和血浆中曲马多的浓度分别进行了测定,所得平均回收率分别为98.9%和89.9%。