毛细管电泳-无鞘流电喷雾质谱用于药物分析

毛细管电泳-质谱联用技术具有分离效率高、检测灵敏度高、样品消耗量少,可同时提供样品的结构信息等优点,成为复杂样品分离分析的强有力工具。但是,毛细管电泳与质谱联用的接口技术依然未能很好的解决。为了拓展我们发展的金箔包裹的毛细管电泳分离柱尖端直接作为喷雾电极和无鞘流质谱接口的应用,本文报道了用无鞘流接口毛细管电泳-电喷雾质谱联用(CE-ESI-MS)分析5种酪氨酸激酶抑制剂(舒尼替尼、甲磺酸伊马替尼、吉非替尼、达沙替尼、埃罗替尼)的研究结果。这种接口集分离与电喷雾离子化于一根毛细管中,制作简单,成本低廉,且可批量制作。实验发现采用非水毛细管电泳分离模式不仅可以对5种酪氨酸激酶抑制剂实现基线分离,而且可以获得稳定的质谱信号。考察了电解质溶液组成对分离效果的影响,得到优化的背景电解质组成,即含2%(v/v)乙酸及5 mmol/L乙酸铵的乙腈-甲醇(80∶20,v/v)混合溶剂。在优化的条件下,5种激酶抑制剂可以得到基线分离,无鞘接口也可以长时间保持稳定的电喷雾,分析物的保留时间日内、日间重复性(RSD值)分别小于0.5%和0.8%,接口批次间的RSD值小于2.6%。与水相分离条件下的CE-MS对比,非水相条件下的5种酪氨酸激酶抑制剂的分离柱效更高,检测灵敏度更高,绝对检出限达到amol级。此外,采用无鞘流CE-MS分析了各类有机酸(千层纸素A、丹酚酸C和迷迭香酸)和脂溶性的大环内酯类抗生素(阿奇霉素、红霉素和环孢素A),均可以获得良好的分离效果和质谱检测结果。

毛细管电泳-质谱联用法测定灵芝药材中核苷类成分

建立一种用于测定赤芝和紫芝中的核苷类成分的毛细管电泳-质谱联用法(CE-MS)。CE条件为:熔融石英毛细管柱(120 cm×50μm),缓冲液体系100 mmol/L甲酸-10%甲醇水溶液。运行电压25 kV;毛细管温度25℃。MS条件为:0.3%甲酸-75%甲醇水溶液为鞘液,流速3μL/min;干燥气体流速6 L/min,干燥温度350℃;采用电喷雾离子化源(ESI),正离子模式检测,全扫描范围m/z 50～350。以5-氯胞嘧啶阿拉伯糖苷为内标物。结果表明,胞嘧啶、鸟嘌呤、胞苷、腺苷、次黄嘌呤、鸟苷、肌苷和尿嘧啶在线性范围内具有较好的线性关系(除鸟苷外,其他成分R2>0.990)。加样回收率在95.3%～104.6%之间。各待测化合物的最低检测限(LOD)和最低定量限(LOQ)分别分布在0.13～9.85μg/mL和0.42～20.83μg/mL之间。测定结果显示赤芝的核苷类成分的含量上高于紫芝。CE-MS适合用于中药中核苷类成分的分析检测。

毛细管电泳指纹图谱及毛细管电泳-质谱联用在中药质量控制中的作用

以作者多年从事毛细管电泳、毛细管电泳-质谱联用及其指纹图谱对中药的研究成果为基础,介绍了毛细管电泳实验条件的优化方法、毛细管电泳指纹图谱的研究方法与评价方法及其在中药质量控制中的作用。

猪肝中克伦特罗和沙丁胺醇的毛细管电泳-质谱联用分析

为监测畜产品中克伦特罗和沙丁胺醇残留,建立了一种适于猪肝等生物组织样品的毛细管电泳-质谱联用分析方法。优化了克伦特罗和沙丁胺醇两种β-激动素的毛细管电泳分离和质谱检测的条件。样品经预处理后,用毛细管电泳-质谱联用分离分析,电泳分离时间小于6 m in;在最佳实验条件下,克伦特罗和沙丁胺醇的检出限分别为0.4和0.3μg/kg。方法灵敏度高、特异性强,测定结果准确可靠,可用于畜产品中克伦特罗和沙丁胺醇残留的确证性检测。

毛细管电泳-质谱联用技术的新进展

毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术综合了CE的高效分离能力、广泛的样品适应性和MS的高灵敏度、可提供结构信息等优势,已发展成为一种重要的分离分析手段。本文对近几年来CE-MS联用接口技术的发展作一简单介绍,并对CE-MS在生命分析、食品药品分析等领域的一些应用进展予以综述。

毛细管电泳-质谱联用法测定性保健品中的脱水吗啡和西地那非

建立了毛细管电泳-电喷雾电离质谱联用法同时测定性保健品中脱水吗啡和西地那非的分析方法。以5．0mmoL／L乙酸（用0．1moL／L乙酸铵调至pH；3．7）作为背景缓冲溶液，50％甲醇（含7．5mmool/L甲酸）作为鞘液，以保留时间和质荷比对分离出的组分予以定性确证，用峰面积进行定量。结果表明，脱水吗啡和西地那非的线性范围分别为200．0—40000．0μg/L，40．0—40000．0μg/L，检出限分别为40，0、8．0μg/L。样品的加标回收率为88％-102％，相对标准偏差为3．2％-5．0％。此方法简便、快速、灵敏，适用于含中药成分的性保健品中这两种药物的同时分析。

毛细管电泳-质谱联用技术研究进展

毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术兼具毛细管电泳高效分离能力与质谱高灵敏检测、高真度定性的优势,已成为物质分离分析研究的一种非常重要的工具。本文对近几年来CE-MS联用的关键技术及CE-MS在中药分析、环境检测等领域的一些应用进展进行综述,对其发展进行了展望。

高效毛细管电泳-电喷雾飞行时间质谱联用分析黄连中的生物碱

建立了高效毛细管电泳-电喷雾飞行时间质谱联用(HPCE-ESI-TOF/MS)快速定性分析黄连中生物碱类化合物的分析方法.使用未涂层石英毛细管,以50mmol/L乙酸铵-0.5%甲醇溶液(用氨水调至pH=7.2)作为运行缓冲液,分离电压为25kV;鞘液组成为50%甲醇-49.5%水-0.5%乙酸,鞘液流速为4μL/min;质谱选用正离子模式,碰撞电压(Fragmentor)为100V.结果表明,通过各色谱峰紫外光谱和质谱测得精确分子量结果,结合文献,对黄连中7种生物碱进行了鉴定.表明本方法简便、快速,是黄连中生物碱类化合物快速分离、鉴别的有效方法.

毛细管电泳-质谱联用技术及其在药物和生物分析中的应用

毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术是在液相色谱-质谱联用技术基础上发展起来的一项新型分析技术,它结合了毛细管电泳具有的分离效率高、分离速度快、样品消耗量少以及质谱检测具有的高灵敏度和强结构解析能力等优点,现已成为倍受分析化学工作者关注的新型微量分析技术。目前,CE-MS联用技术是中药有效成分分析,体内药物分析以及生物样品,如氨基酸、多肽、蛋白质和多糖等分析的重要手段。本文对CE-MS联用技术中同轴鞘流及无鞘流纳流电喷雾等几种接口装置的研究进展,CE-MS技术在中药活性成分分析及多级质谱结构解析以及氨基酸、多肽及蛋白质等生物样品分析中的应用研究进行了综述,并对该技术的发展进行了展望。

整体柱毛细管电泳与质谱联用检测肺癌患者尿液中的己醛和庚醛

采用外补充鞘流液的接口形式,实现毛细管电泳与质谱的联用,在石英毛细管(100μm i.d.)内原位合成3mm长的聚甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯[poly(MAA-co-EDMA)]整体柱,进行样品的在线衍生化、在线预富集以及分离检测.建立了醛类物质的毛细管电泳-质谱联用分析方法,并应用于肺癌患者尿样中己醛和庚醛的检测.对缓冲液浓度,分离电压等条件进行了优化,方法的相对标准偏差为6.7%～13.9%,检测限在0.15～0.18mol.L-1范围内.该方法分析速度快,灵敏度高,为CE/MS的联用提供了一种新的装置设计思路.

毛细管电泳和质谱联用在线预浓缩酚酸类化合物及其抗氧化活性评价

目的建立一种新型高效的毛细管电泳和质谱联用（CE—MS）在线预浓缩方法，用于检测丹参样品中酚酸类化合物中4种亲水活性成分（丹参素、丹酚酸B、咖啡酸和紫草酸），并对其抗氧化活性作出评价。方法利用CE—MS在线预浓缩技术，采用未涂层石英毛细管柱（90cmx50μm），电压：27kV。样品的进样压力：50mhar。选样时间：3～300S，毛细管温度：25℃。鞘液：5mmol·L-1的乙酸氨溶液（甲醇溶解），流速：4mL·min-1。结果该技术灵敏度比通常的流体注射提高了30～50倍。结论该方法可用于分析丹参药材中丹参素、丹酚酸、咖啡酸、紫草酸等酚酸类化合物，也可以用于评价丹参样品中酚酸类化合物的抗氧化成分。

蛋白质酶解混合物的动态修饰毛细管电泳-质谱联用分析

利用羟丙基纤维素溶液动态涂层技术修饰毛细管管壁 ,改善了分离效率 .在不影响质谱检测的条件下 ,将动态涂层毛细管电泳与质谱检测联用 ,有效地提高了对蛋白质的鉴定能力 .将该技术应用于对复杂蛋白质样品的酶解产物的分析鉴定 。

凝胶电泳-毛细管液相色谱-质谱联用技术分析大肠癌肿瘤与癌旁组织的差异蛋白质组

通过凝胶电泳将大肠癌患者的手术标本组织(肿瘤与癌旁)中的总蛋白按照分子量分成不同的组分,经胶内水解后,利用毛细管液相色谱-质谱联用技术对各个组分的多肽混合物进行蛋白质组学分析,共鉴定出29种差异表达的蛋白质,其中肿瘤组织中表达上调的蛋白质19种,如Fibrinogen beta chain,Vimentin,Fibrinogen gamma chain,Histone H2A type 1-B/E,Isoform 1 of Periostin,Fibrinogen alpha chain,Histone H3.1,Alphaenolase,Protein disulfide-isomerase A3等;在肿瘤组织中表达下调的有10种蛋白质,如Sarcomeric tropomyosin kappa,Transgelin,Heat shock protein beta-1,Talin-1,Isoform 2 of Vinculin,Isoform 1 of Filamin-C等。通过蛋白质印迹实验对其中的踝蛋白1(Talin-1)和烯醇化酶(Alpha-enolase)的蛋白质组学鉴定结果进行了验证。生物信息学分析表明在大肠癌组织中表达上调的蛋白多具有胞外分泌的属性,提示这些蛋白很有可能会渗透到机体内的循环系统中,从而在患者血液或者腹水中能够被检测到;而在大肠癌组织中表达下调的蛋白则多为细胞骨架、胞外基质纤维等的组成成分,这些蛋白的下调常与肿瘤细胞向周围组织的侵袭和转移有密切关系。本研究为大肠癌的早期诊断、大肠癌初筛等方面的研究等提供了基础数据,对进一步深入研究大肠癌发病机制具有重要意义。

毛细管电泳-质谱联用技术在环境分析中的应用

毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术综合了CE的快速、高分离能力与MS强大的鉴定功能等特点,已经成为一种重要的分离分析手段。文章对CE-MS联用的发展、特点及在环境分析领域的应用进展予以综述。

用N,N-二甲基六烷基溴化铵涂层的毛细管对重组促红细胞生长素及其酶解产物进行毛细管电泳和毛细管电泳-电喷雾质谱分析

采用毛细管电泳技术研究了重组促红细胞生长素(rhEPO)的分离问题。用N,N-二甲基六烷基溴化铵(6,6-ionene)涂层的毛细管测定了rhEPO中唾液酸的微多相性,同时采用毛细管电泳-质谱(CE-M S)联用技术在22m in内鉴定了rhEPO20段胰酶消化肽中的11段。该方法简单快捷,重现性好,可用于蛋白质一级结构的测定。

用毛细管电泳-质谱(CE-MS)内标法检测杜仲中绿原酸

杜仲作为一种传统的中药材,其药用成分主要为次级代谢产物绿原酸,是很多种中草药的重要活性成分,广泛存在于杜仲叶片和忍冬科植物的干燥花蕾或初开的花朵中。本研究提供了一种高效准确的从植物样本中检测绿原酸的方法。该方法使用萘乙酸作为内标物提高定量的精确性,减少系统误差,并通过毛细管电泳联用质谱定性提高检测的灵敏度。毛细管电泳联用质谱仪建立萘乙酸标准品与绿原酸标准品的标准曲线,其中萘乙酸与绿原酸的标准曲线相关性系数分别为0.999 4和0.999 1,均大于0.999 0,说明仪器方法及毛细管电泳参数与质谱参数可靠。绿原酸标准品分别以杜仲与金银花植物粉末作为基质,其添加回收率分别为93.61%和97.43%,说明提取方法的提取效率较高。为验证方法的适用性,运用本方法检测分析得出杜仲植物粉末中绿原酸含量为0.92%,金银花植物粉末中绿原酸含量为1.31%。

基于毛细管电泳-质谱联用技术的代谢/蛋白质组学分析

毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术具有高灵敏度、高分析效率、低样品损耗等优点,在强极性和带电荷的物质分析中具有明显优势,已广泛应用于生命科学、医学、药学等多个领域。在过去的十几年,影响其应用的主要因素包括系统的稳定性、实验的可重复性、数据的准确性等。为解决现有问题,进一步拓展其应用,研究人员在技术设计和改进等方面做了大量工作。医学和分析化学领域的相关研究证明了CE-MS在代谢组学和蛋白质组学中的实用性。这篇文章综述了2015年以来,CE-MS在技术和应用方面的最新进展,为未来的技术发展及应用提供借鉴。为提高CE-MS的分析效率和数据可比性,该文对多个方面的研究进行了讨论,包括涂层与样品的相互作用、接口技术、运行参数和数据处理方法。文中关于复杂样品(组织、细胞、体液等)代谢组学/蛋白质组学的综述研究,使癌症病理分析、药物开发和疾病监测等分析数据更加可视化,为CE-MS临床分析应用提供借鉴。除了对CE-MS的最新发展进行综合评述外,还提出未来应加强3个方面的研究:(i)从样品前处理和分离技术方面优化分析方法;(ii)从毛细管涂层和接口技术方面调整分析技术;(iii)从临床研究和数据分析方面开发新思路。

基于毛细管电泳-质谱联用的PTEN缺失诱导代谢重编程研究

前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤之一,PTEN缺失普遍存在于前列腺癌中,并诱导肿瘤细胞代谢重编程。PTEN缺失诱导的代谢重编程可能为肿瘤靶向治疗提供信息。本实验基于毛细管电泳-质谱联用技术(CE-MS)对PTEN缺失后前列腺癌细胞DU145及正常前列腺细胞RWPE1代谢变化进行系统性分析。在DU145和RWPE1两种细胞中分别检测到200和214种代谢物,相比对照细胞,PTEN敲除后分别含有28和37种差异代谢物。两种细胞敲除PTEN后,均出现苏糖酸升高,异丁基肉碱、二磷酸腺苷、N-羟乙酰神经氨酸、天冬氨酸、亚牛磺酸下降。DU145敲除PTEN后,特异的代谢变化为L-2-羟戊二酸、甘磷酸胆碱、维生素B1、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽,且都显著升高,这些代谢物或比值的升高能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭及抗化疗。同时,发现肌酸酐、肌肽、乙酰神经氨酸等已报道与癌症诊断、预后相关的标志物受PTEN调控。通过对两种细胞差异代谢物比较,鉴定了PTEN诱导的代谢变化及PTEN与其它肿瘤相关基因共同诱导的代谢变化,为PTEN对代谢通路的调控分子机制研究提供信息。

唾液阿片类毒品的毛细管电泳/质谱联用分析方法研究

本文在对电泳分离条件和质谱检测条件进行考查的基础上,建立了阿片类毒品的毛细管电泳/质谱联用(CE/MS)分析方法。采用含15%甲醇浓度为80mmol/L乙酸铵-乙酸(pH=5.1)缓冲溶液作为背景缓冲体系,含15mmol/L乙酸铵和0.25%乙酸的60%甲醇水溶液作为鞘液,0.5psi压力下进样10s,分离电压25kV。在优化条件下,吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因和海洛因4种毒品的唾液添加样本稳定性(RSD,n=5)均≤5%,检测限为10~50ng/mL。该方法稳定性好,灵敏度高,可以用于唾液中4种阿片类毒品的筛查。