神经生长因子对大鼠全脑缺血再灌后内耳迟发性毛细胞死亡和听力损伤的影响

目的 :研究大鼠全脑缺血再灌注后内耳迟发性毛细胞死亡的变化及神经生长因子 (NGF)对其的影响。方法 :通过四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血 再灌注模型 ,扫描和透射电镜观察耳蜗毛细胞超微结构改变 ,4 0Hz听觉相关电位 (AERP)检测听力阈值。结果 :缺血再灌组于全脑缺血 30min再灌注后 1d耳蜗Corti’s器外毛细胞静纤毛倒伏、脱失 ,再灌注 3d出现外毛细胞迟发性死亡 ,显示细胞凋亡特征。再灌注后 1d、3d 4 0HzAERP阈值较缺血前显著增高 ,听力下降 ,再灌注 7d细胞和听力损伤出现修复变化 ;NGF组再灌注后外毛细胞静纤毛损害明显减轻 ,未见明显迟发性毛细胞死亡 ,听力无显著损失。结论 :全脑缺血再灌注可引起内耳迟发性毛细胞死亡和听力损失 ,迟发性毛细胞死亡机制可能是病理性坏死与细胞凋亡共存。

低频强声暴露后巴马香猪耳蜗caspase-3表达及毛细胞死亡观察

目的了解高强度低频噪声(下称:低频强声)暴露对巴马香猪耳蜗凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的影响,同时观察耳蜗毛细胞死亡情况。方法将8只巴马香猪随机分为对照组2只及实验组6只;所有动物均于实验前行听性脑干反应(ABR)检测,然后将实验组随机分为噪声暴露后即刻组、36h组及84h组,每组各2只,分别暴露于50Hz、142dB SPL的噪声中5min,于噪声暴露后相应时间点行ABR检测,用免疫组织化学染色和免疫荧光DAPI标记细胞核两种方法观察耳蜗组织中caspase-3的表达,同时通过细胞计数方法计算毛细胞缺失率判定细胞死亡情况。对照组不给予噪声暴露,其他条件与实验组相同。结果噪声暴露前8只巴马香猪的ABR平均阈值为61.25±10.72dB nHL;低频强声暴露后实验组中的即刻组、36h组和84h组的动物双耳ABR均未引出;实验各组动物耳蜗各部位均可见caspase-3阳性表达,且随着暴露后时间延长,caspase-3阳性表达逐渐减弱;噪声暴露后即刻组、36h组与正常对照组相比较,耳蜗三排外毛细胞排列及层次明显错乱;噪声暴露后84h组耳蜗三排外毛细胞消失,仅可见一层内毛细胞;正常对照组及噪声暴露后即刻组、36h组、48h组耳蜗外毛细胞缺失率分别为0%、0%、14.06%、100%。结论低频强声暴露使巴马香猪听性脑干反应阈值较暴露前明显提高,随暴露后时间延长,耳蜗组织中caspase-3阳性表达减弱,毛细胞死亡数量明显增加,螺旋神经节区域也出现了细胞凋亡现象。