牦牛皮肤中调控毛色基因表达定量和黑色素细胞组织学分析

旨在通过分子水平和组织学水平阐明牦牛不同被毛颜色的机理。采用实时荧光定量PCR技术检测皮肤组织中决定色素形成通路中的主效基因:鼠灰色基因(Agouti signaling protein gene(ASIP),Agouti)、小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、黑色素皮质素受体1基因(Melanocortin 1 receptor,MC1R)和酪氨酸酶基因(Tyrosinasegene,TYR)表达量。结果表明:MC1R表达量在黑色毛色高于白色毛色;MITF表达量在黑色毛色与白色毛色中差异明显;ASIP表达量在白色毛色和黑色毛色中差异不显著;TYR表达量在天祝纯白被毛中表达量是大通纯黑被毛的2.87倍,这与有色被毛高表达的结果相反,TYR的表达量对牦牛黑色素的合成影响有待深入研究。采用石蜡切片制作方法,用HE和甲苯胺蓝染色。通过显微镜观察发现牦牛毛囊是由毛鞘、毛乳头和毛球外面周围的结缔组织形成的。在天祝白牦牛的表皮和毛囊周围发现分布着大量的黑色素细胞,同时发现有少量的黑色素颗粒存在。大通牦牛的毛囊和表皮黑色素细胞中均发现有黑色素的存在。黑色被毛毛囊中与毛发相连毛乳头附近的黑色素含量比毛囊周围其他部位含量高。大通牦牛的毛囊群比天祝牦牛毛囊群密集,毛囊的直径比天祝长,毛发较粗。大通牦牛毛囊周围黑色素细胞比天祝白牦牛密集,细胞核大,而且更为明显。

豫医无毛小鼠近交系毛色基因遗传学测试

目的 :考核豫医无毛小鼠 (YYHL)近交系纯化程度及毛色基因型。方法 :用复隐性基因小鼠DBA/ 2、6 15分别对YYHL近交系进行了毛色基因测试。结果和结论 :杂交所生的F1代全部为野生色 ,表明其毛色基因为纯合 ,其基因型为AABBccDD。豫医无毛小鼠近交系已达到近交系的国际标准。

TW近交系小鼠的血液生化及毛色基因检测

目的建立野生来源TW(Tianjin wild,TW)近交系小鼠的体重和血液生化正常范围并检测其毛色基因纯合性。方法分别选用F23代TW近交系成年小鼠,进行毛色基因测试,并检测动物的体重及血液生化指标。结果 6周龄前,雌雄TW小鼠体重差异无统计学意义(P<0.05);6周龄后雄性TW小鼠体重明显高于同期雌性小鼠体重,差异具有统计学意义(P<0.05)。血生化检测指标中,雌雄小鼠的总蛋白和甘油三酯均值不同,差异具有统计学意义(P<0.05),其他各项差异均无统计学意义(P>0.05),且与文献报道的其他品系结果不一致。毛色基因测试,F1代小鼠的毛色为白腹野生色,其基因型为AWAWBBccDD。结论 TW小鼠毛色基因已达纯合,且在一些指标上与通用实验小鼠品系不同,具有自身特点。

DXB／c小鼠毛色基因的测试

ＤＸＢ／ｃ小鼠毛色基因的测试牛荣，魏泓，焦有烈，史燕燕，郑亚萍１．重庆第三军医大学实验动物中心重庆６３００３８２．军事医学科学院遗传上的高度纯合性是对近交系动物的基本要求。在于近交系小鼠的遗传监测方法，国际上通用的已有很多。其中，毛色基因的测定是近交...

金黄仓鼠黄色毛色基因突变的遗传规律

在正常饲养的金黄仓鼠以下简称仓鼠生产群中 ,发现一只黄色雄性仓鼠个体。为探讨该黄色仓鼠的出现原因及其遗传规律 ,作者用该黄色仓鼠与其同胞交配和回交繁殖。结果表明

拉布拉多犬与金毛猎犬毛色基因MC1R(R306ter)与TYRP1(Q331ter)SNP位点的检测

目的建立犬毛色基因MC1R R306ter(c.C916T)与TYRP1 Q331ter(c.C991T)SNP位点的检测方法。方法采用PCR/测序的方法,对19只拉布拉多犬和15只金毛猎犬的MC1R基因c.C916T SNP位点及TYRP1基因c.C991T SNP位点的多态性进行检测,根据MC1R和TYRP1的多态性对犬的毛色基因型进行分析。结果 PCR/测序法能够对TYRP1基因c.C991T SNP位点进行明确和有效的检测。但MC1R基因c.C916T SNP位点的测序结果出现了特殊峰,经克隆/测序法确认该特殊峰型为杂合性SNP位点。毛色基因型分析表明,金毛猎犬的毛色基因型皆为纯合的eeBB(15只),未见其他基因型。拉布拉多犬的毛色基因型分别为:黑色犬EeBB(6只)、EeBb(2只);黄色犬eeBB(9只)、eeBb(2只)。未发现其他如EEBB和EEBb(黑色)、eebb(黄色)的毛色基因型。另外,拉布拉多犬样本中没有巧克力色犬,也未检测出其相应的Eebb和EEbb基因型。结论本研究成功建立了犬毛色基因MC1R R306ter(c.C916T)与TYRP1 Q331ter(c.C991T)SNP位点的检测方法,为分析毛色基因型与导盲犬培训成功率之间的相关性提供了前期工作基础。

犬毛色、毛色基因型及性别与导盲犬培训成功率的相关性研究

目的探究拉布拉多犬与金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别对导盲犬培训成功率的影响。方法采用PCR/测序方法对45只拉布拉多犬和16只金毛猎犬的毛色基因MC1R(c.C916T)、TYRP1(c.C991T)位点进行多态性检测,并对基因型加以分型,探讨犬毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率的相关性。另外对中国导盲犬大连培训基地犬只的性别进行统计分析,探讨犬性别与导盲犬培训成功率的关系。结果金毛猎犬共检测16只(14雄2雌),毛色表型均为金黄色,毛色基因型均为ee BB基因型;拉布拉多犬共检测45只(23雌22雄),毛色表型为黄色(23只)与黑色(22只),毛色基因型分别为ee BB、ee Bb、EEBb、Ee BB、Ee Bb。通过χ2检验的关联度分析,拉布拉多犬与金毛猎犬的毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率无显著相关性(P>0.05),另外,拉布拉多犬与金毛猎犬的性别与导盲犬成功率也无显著相关性(P>0.05)。结论拉布拉多犬和金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别与导盲犬成功率没有显著相关性,不能作为预测导盲犬培训成功率的有效指标。

TS/N猫的毛色基因报告

目的TS/N猫的毛色基因观察报告。方法通过30年来对十余代华药虎皮猫TS/N封闭选育的观察,总结了种群毛色基因的情况。结果华药虎皮猫TS/N封闭群毛色基因型为:"AA,BB,CC,DD,HH,LL,oo,RR,ss,tbtb,ww"。结论华药虎皮猫TS/N封闭群的11个毛色基因位点(A,B,C,D,H,L,O,R,S,T,W)均纯合。

自发性先天性白内障大鼠毛色基因型鉴定

目的 测定新育成的自发性先天性白内障(TSC)大鼠的毛色基因位点纯合度和毛色基因型。方法 选用东部战区总医院的基础群F29代TSC成年大鼠与已知复隐性基因的F344和BN大鼠作杂交和回交实验,进行毛色基因测试。结果 TSC大鼠毛色基因位点A、B、C、D遗传纯合度均达100%,毛色基因型为AABBcc。结论 TSC大鼠毛色基因已达纯合,符合近交系鉴定关于毛色基因位点遗传纯合度的规定。

不同毛色巴什拜羊皮肤组织中10个候选基因表达水平分析

为探讨可能影响动物毛色的10个候选基因(TCF25、TYR、TYRP1、ASIP、KIT、MITF、EDNRB、SLC7A11、MC1R和DCT)与巴什拜羊毛色的关系,利用实时荧光定量PCR技术对30只1周岁不同毛色(棕色、白色和黑色各10只)被毛的巴什拜羊皮肤组织中与毛色相关基因的mRNA表达量进行了研究,所有数据使用SPSS 23.0进行单因素方差分析。结果显示,在不同毛色被毛巴什拜羊皮肤中,TCF25、ASIP和EDNRB基因在白色被毛皮肤中的表达量均显著高于黑色和棕色被毛皮肤(P<0.05);TYR、TYRP1、DCT和MC1R基因在黑色被毛皮肤中的表达量均显著高于白色和棕色被毛皮肤(P<0.05);MITF基因在棕色被毛皮肤中的表达量显著高于白色和黑色被毛皮肤(P<0.05),而KIT和SLC7A11基因在不同毛色皮肤组织中均无显著差异(P>0.05)。综上可知,TCF25和ASIP基因主要与巴什拜羊白色被毛性状相关,TYR、TYRP1、DCT和MC1R主要与巴什拜羊黑色被毛性状相关,而MITF和EDNRB基因参与调控巴什拜羊棕色和白色被毛性状的具体作用机制还有待进一步探究。

农业经济动物稀释毛色表型形成研究进展

毛色是家畜驯化过程中最早被选择的性状之一,对该性状的偏好性选择导致家畜毛色丰富多样。家畜的毛色表型是由黑素细胞中真黑色素(产生黑色/棕色)和褐黑色素(产生黄色/红色)的相对含量决定,当真黑色素或褐黑色素的合成被稀释,或者两种色素的合成均被稀释时,就会形成不同的稀释毛色表型。为深入理解家畜毛色变异的遗传机制,许多学者已经进行了大量的毛色遗传学研究,以确定家畜的毛色相关基因和因果突变。目前,已鉴定出超过300个基因座和150个与毛色相关的基因。稀释毛色表型作为动物毛色遗传研究领域的一个重要研究方向,其遗传学研究已取得了一定进展。已发现多个因果基因可以引起哺乳动物的毛色稀释和禽类的羽色稀释,这些基因通过影响潜在的色素形成途径来影响黑素细胞的发育和分化、黑色素的合成以及黑素小体的运输。相似的毛色稀释表型通常在不同物种间被发现,可能由保守的或不同的毛色稀释基因引起。在同一物种中,可能有多个基因导致相同或相似的稀释毛色表型。该文对农业经济动物(主要是猪、马、牛、羊、鸡)稀释毛色(羽色)表型的类型及其形成的因果基因和突变,以及遗传机理等研究进展进行综述,以期为动物稀释毛色(羽色)遗传机制的深入研究提供参考。

小鼠黑素细胞中过表达Oct-1对毛色主效基因的影响

【目的】克隆小鼠八聚体结合转录因子1(octamer-binding transcription factor 1,Oct-1)基因序列,探讨八聚体结合转录因子1在小鼠黑素细胞中过表达对毛色主效基因表达的影响及在毛色形成中的作用。【方法】使用实验室冻存的第5代小鼠黑素细胞,通过普通PCR方法用引物以小鼠黑素细胞c DNA为模板克隆Oct-1基因c DNA序列,构建小鼠Oct-1克隆载体和真核表达载体;通过KEGG PATHWAY、NCBI、Transfec等软件对获得的序列进行生物信息学分析;在细胞水平通过细胞转染技术过量表达小鼠Oct-1;转染后使用荧光显微镜观察细胞转染效率,采用分光光度计对小鼠黑素细胞中黑色素含量进行测定,并进行Real-time PCR实验检测转染后黑素细胞中毛色主效基因在m RNA水平表达量的变化,Western blot实验检测转染后细胞中MITF、TYR、TYRP-1和TYRP-2蛋白水平的变化。【结果】经测序和拼接最终获得长度为2 313 bp的小鼠Oct-1基因的c DNA序列;成功构建真核表达载体,载体上连有小鼠黑素细胞特异性TYRP-2基因启动子和一个启动报告基因绿色荧光蛋白;通过KEGG PATHWAY分析获得与毛色形成有关的34个候选基因,NCBI查找出34各个基因的启动子,由Transfec启动子分析软件找出Oct-1可以调节的毛色主效基因;细胞转染后,在荧光显微镜下可观察到黑素细胞带有绿色荧光说明转染效率明显;分光光度计检测显示,转染后小鼠黑素细胞中黑色素含量减少(P<0.05);荧光定量检测结果显示,小鼠黑素细胞中Oct-1 m RNA表达量显著增加(P<0.001),表明小鼠Oct-1转染效率显著,MITF m RNA显著降低至0.70倍(P<0.01),TCF m RNA显著降低至0.66倍(P<0.01),Ras、Frizzled、ERK2和TYRP-2 m RNA的表达未见变化,TYR m RNA显著增加至7.69倍(P<0.01),TYRP-1 m RNA升高至3.11倍(P<0.01),αMSH m RNA显著增加至18.49倍(P<0.001),AC m RNA显著增加至6.88倍(P<0.01),c-kit m RNA显著增加至18.75倍(P<0.001),ET1 m RNA增加至1.50倍(P<0.05),ETB-R m RNA显著增加至13.47倍(P<0.001),CAM m RNA增加至1.46倍(P<0.05);蛋白免疫印迹结果显示,小鼠黑素细胞中Oct-1转染组MITF蛋白显著降低至0.67倍(P<0.01),TYR蛋白增加至1.16倍(P<0.05),TYRP-1蛋白升高至1.15倍(P<0.05),TYRP-2蛋白未见变化。【结论】通过PCR和克隆技术及核酸测序技术获得了小鼠Oct-1基因全长2 313 bp的CDS区,经生物信息学分析找出Oct-1作用的毛色主效基因,过表达Oct-1后使黑素细胞中MITF和TCF的表达降低,TYR、TYRP-1、αMSH、AC、c-kit、ET1、ETB-R和CAM的表达增加。证实Oct-1可调节毛色主效基因的表达,参与黑色素合成的调节,改变毛色。

灵长类毛色基因研究进展

毛色在动物生活中起着信息交流和伪装等作用。灵长类不同物种之间、同一物种不同个体之间都有着丰富的毛色,然而,毛色变化的分子机制却研究得较少。已有的研究发现,灵长类毛色变化既不能归因于某些毛色基因的序列差异,也不能归因于毛色基因表达量的差异。本文对灵长类的毛色、灵长类的毛色基因(主要是MC1R和ASIP基因)的研究进行了简要的概述,以期为灵长类毛色基因的进一步研究提供参考。

牛、绵羊和山羊染色体同源性分析及山羊部分毛色候选基因染色体电子定位

旨在为牛科物种进化和山羊毛色基因染色体定位研究提供更多的理论依据。利用GOATMAP DATA-BASE和NCBI生物学数据库查询牛、山羊和绵羊常染色体上的标记,然后用Phylogenetic Computer Tools与进化树软件Phylip进行牛、绵羊和山羊染色体同源性分析;利用比较基因组学和生物信息学方法对山羊部分皮毛颜色候选基因进行定位。结果表明,山羊、牛和绵羊染色体具有较高的同源性,相应同源染色体间相似性系数在0.000 0-1.000 0;结果,山羊皮毛颜色候选基因Myo5a,Brca1、Sox10、Zic2、kit、Snai2、Wnt3a和Tyrp1分别电子定位于山羊10、17、5、12、6、14、7和8号染色体上。

不同毛色牦牛皮肤组织学观察及MC1R基因功能验证

旨在阐明不同毛色牦牛皮肤组织形态学特点及MC1R调控黑色素合成的可能分子机制。采集大通牦牛(黑褐色)和天祝白牦牛(白色)各6头的背部皮肤组织,用甲苯胺蓝染色法分别对不同毛色牦牛皮肤组织进行染色,观察黑色素和成熟黑色素细胞的含量差异及分布特征,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MC1R在不同毛色牦牛皮肤中的表达差异。B16小鼠黑色素瘤细胞中转染shRNA MC1R干扰载体后,应用qRT-PCR和Western blot检测转染效率,分析比较各组中与毛色相关基因(Agouti、MITF、TYR)的表达差异性,利用酶标仪检测不同时间点黑色素产量。结果表明,两种毛色牦牛的表皮和毛囊周围均分布着大量的黑色素细胞,但天祝白牦牛仅在表皮基底层和毛根处检测到少量黑色素,而大通牦牛表皮层和毛囊处产生大量黑色素。与大通牦牛相比,天祝白牦牛皮肤中MC1R表达量极显著降低(P<0.01)。在成功抑制MC1R的B16细胞中,TYR表达量极显著降低(P<0.01),MITF表达量显著降低(P<0.05),而Agouti表达量未发生显著变化(P>0.05);同时黑色素含量减少。综上表明,黑色素大量沉积与MC1R高表达是导致牦牛毛色差异的原因。将shRNA MC1R载体成功转染B16小鼠黑色素瘤细胞后,MC1R的抑制情况与下游调控基因TYR表达一致,进而降低黑色素含量,说明MC1R对黑色素的合成及毛色形成起重要的调控作用。

动物毛色形成的原因和机制

动物毛色的表现形式除受基因控制外,还与环境因素有关。本文描述了影响动物毛色的基因以及后天的环境和管理对动物毛色的影响。

关于家兔毛色遗传规律的探讨分析

归纳完善了控制家兔毛色不同座位基因的作用,对不同位点基因互作关系进行了分析,指出家兔毛色是由多个位点基因共同作用的结果。结果表明:影响家兔毛色的基因至少涉及10个位点,野鼠色家兔毛色基因型是家兔毛色的基本基因型,其他家兔毛色来源于野鼠色家兔基因突变以及突变基因重组;提出了特征基因和特征基因型概念,制定了26种毛色兔的毛色与"完整基因型"对照表。

拉布拉多犬的毛色遗传

当念世界犬的品种有300多个,其中拉布拉多犬拥有3套不同的毛色并且颜色反差很大,是一个非常少见的品种.

冬季不同海拔大绒鼠MC1R基因的表达量及UCP1、Hb、Mb含量的比较

为探究横断山冬季不同海拔大绒鼠的毛色差异、生理及血液指标的变化情况,自北向南从德钦、香格里拉、丽江、剑川和哀牢山5个地区按高海拔至低海拔进行采样,通过PCR扩增大绒鼠黑素皮质素受体1(melanocortin receptor 1,MC1R)基因序列,使用FQ-PCR测定其皮肤的MC1R基因表达量,并利用酶联免疫分析法(ELISA)测定褐色脂肪组织中解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)含量、血清中血红蛋白和肌红蛋白含量。结果表明:扩增出的MC1R基因片段为约200 bp的部分序列;哀牢山和剑川地区的大绒鼠MC1R基因表达量显著高于丽江、香格里拉和德钦地区;德钦和香格里拉地区的UCP1含量和肌红蛋白含量显著高于哀牢山、剑川和丽江地区;5个地区间血红蛋白含量差异不显著。以上结果表明大绒鼠通过改变MC1R基因的表达量来改变毛色,还通过升高肌红蛋白含量和UCP1含量来增加产热能力,从而适应横断山不同海拔的环境变化。

吉林马几种毛色遗传的初步探讨

一、前言我国广大农牧民对马的毛色选择,素来比较注意。这可能是传统的习惯爱好,也可能是在长期的驾驶马匹过程中,积累了马的毛色与工作性能、气质有密切联系的经验的结果。吉林的广大农牧民一般称红(骝毛)、黑(黑毛)、紫(红骝毛)三种毛色为上色,而最喜爱的是枣红(枣骝毛),其次是黑和红栗。对于马的毛色和工作性能的相关性究竟怎样,我们了解甚少。