黔产毛蒟提取物的制备及其化学成分的定性分析

目的考察黔产毛蒟提取物制备的最佳工艺,定性分析各提取物的化学成分。方法采用溶剂回流加热法进行提取。在单因素试验的基础上,以提取次数、提取时间、料液比和浸泡时间为因素安排L9(34)正交试验,以提取率为指标,优选黔产毛蒟提取的最佳工艺;经D-101大孔吸附树脂分离,得到黔产毛蒟水洗脱液、醇洗脱液;采用理化分析方法对黔产毛蒟提取物进行初步定性分析。结果提取最佳工艺为:提取时间为2 h,提取次数为3次,料液比为1∶30,浸泡时间为2 h;经过初步定性反应确认总提取物含有氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱、甾体或三萜类、黄酮、皂苷、多糖、还原糖及糖苷、香豆素及萜类内酯化合物、酚类和鞣质成分;水洗脱物含有氨基酸、多肽、蛋白质、皂苷、多糖、还原糖及糖苷、香豆素及萜类内酯化合物;乙醇洗脱物含有氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱、甾体或三萜类、黄酮、多糖、还原糖及糖苷、酚类和鞣质成分。结论黔产毛蒟提取的最佳工艺提取率高、稳定可行。

黔产毛蒟挥发油抗炎镇痛活性研究

目的:探讨黔产毛蒟挥发油的抗炎镇痛活性。方法:将50只昆明种小鼠随机分为5组,每组10只,分别为模型组(生理盐水)、黔产毛蒟挥发油低(0.125 ml/100 ml)、中(0.25 ml/100 ml)、高浓度组(0.5 ml/100 ml)和阿司匹林组(3 mg·ml^(-1))。观察二甲苯致小鼠耳廓肿胀和皮肤毛细血管通透性的影响,以评价黔产毛蒟挥发油的抗炎作用;对醋酸致小鼠疼痛和热刺激致痛的影响,以评价黔产毛蒟挥发油的镇痛作用。结果:与模型组比较,挥发油中、高浓度组、阿司匹林组的耳肿胀度明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);挥发油高浓度组和阿司匹林组能有效降低毛细血管通透性,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,挥发油中、高浓度组、阿司匹林组能有效抑制小鼠扭体次数,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),同时挥发油高浓度组能有效减缓小鼠痛阈值(P<0.05或P<0.01)。结论:黔产毛蒟挥发油具有较好的抗炎镇痛活性。

黔产毛蒟挥发油的提取工艺优化及化学成分分析

目的:优化黔产毛蒟挥发油的提取工艺并分析其化学成分。方法 :采用水蒸气蒸馏法(HD)提取黔产毛蒟挥发油。以挥发油提取率为考察指标,以浸泡时间、提取时间、料液比(g/ml)、粉碎程度为考察因素设计正交试验;同时进行验证试验。采用气相色谱-质谱联用法对黔产毛蒟挥发油的化学成分进行分离鉴定,并以面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果:最优提取工艺为浸泡时间3 h、提取时间5 h、料液比1∶10、粉碎程度12目;验证试验中挥发油平均提取率为59.83%(RSD=0.905 3%,n=3)。共鉴定出78种化合物,相对百分含量为81.125%;其中γ-榄香烯(11.858%)、4-乙烯基-α,4-三甲基-3蒟(1-甲基乙烯基)-环己烷甲醇(8.701%)、石竹(8.443%)、α-石竹烯(6.216%)等4种化合物为主要成分。结论:优化的HD法生产设备简单、生产成本低廉、重现性好;挥发油成分分析方法简单、可行,可对黔产毛蒟挥发油的化学成分进行分析。

不同产地毛蒟挥发油的GC-MS分析

目的:对5个不同产地的毛蒟挥发油进行分析研究。方法:用GC-MS法分析测定毛蒟挥发油。结果:各产地的挥发油成分差异较大,其中,石竹烯、α-石竹烯、橙花叔醇2为共有成分。新鲜药材挥发油得油率及化学组分含量均较高。结论:不同产地毛蒟挥发油含量及成分差异性大,易受产地、采收季节、储藏时间等多种因素影响,其规律有待进一步研究。

黔产毛蒟挥发油对油酸致大鼠急性肺损伤的影响及其机制

为研究黔产毛蒟挥发油在油酸诱导的大鼠急性肺损伤中的作用及其机制。实验将雄性成年清洁级SD大鼠按照体重随机分为对照组、油酸模型组和毛蒟挥发油组(0.125、0.25、0.5 mL/kg)。油酸模型组大鼠采用右侧颈静脉注射油酸0.2 mL/kg形成急性肺损伤模型;毛蒟挥发油组大鼠在油酸造模前30分钟静脉注射毛蒟挥发油;建模4 h后处死,留取标本。观察各组肺组织病理学形态并进行肺损伤评分,同时测定血气分析值、右下肺湿干重、肺通透指数以及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6和IL-1β炎症因子的含量,最后采用免疫组化和Western Blot检测p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达量。结果表明大鼠PaO_2和PaO_2/FiO_2在油酸模型组明显低于对照组,同时右下肺湿干重、肺通透指数以及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6和IL-1β炎症因子的含量在油酸模型组明显高于对照组。油酸模型组肺组织病理学显示肺损伤明显;毛蒟挥发油组上述指标较油酸模型组明显减轻。p-p38MAPK蛋白表达量在油酸模型组中明显高于对照组,而p-p38MAPK蛋白表达量在毛蒟挥发油组中明显低于油酸模型组。实验证明黔产毛蒟挥发油能够通过抑制p38MAPK通路减少急性肺损伤炎症因子的产生,对急性肺损伤具有较好的保护作用。

毛蒟水提物对CCl_4所致小鼠肝损伤的保护作用

目的研究毛蒟水提物对CCl_4所致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组,模型组,毛蒟水提物低、高剂量组,采用CCl_4建立急性肝损伤模型。观察毛蒟水提物对模型组小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,小鼠肝脏指数和肝组织中Egr-1、TNF-αmRNA表达的影响,以及肝组织的病理学改变。结果毛蒟水提物给药组可明显降低CCl_4所致肝损伤小鼠血清中AST、ALT的活性(P<0.01),降低肝脏组织中Egr-1和TNF-αmRNA的表达水平(P<0.05);可明显改善CCl_4所致肝脏病理细胞损伤,炎症细胞明显减少,且高剂量组更为显著。结论毛蒟水提物对CCl_4所致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抑制Egr-1和TNF-α等炎症通路因子的表达有关。

黔产毛蒟水提物对急性肝损伤小鼠的保护作用

探讨黔产毛蒟水提物(PTE)对四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及其作用机制。本研究中将50只昆明种小鼠随机分为5组,各组10只,分别为空白组、模型组(0.01 g/kg的0.15%CCl_4菜油溶液造模)、PTE组(低剂量组0.5 g/kg和高剂量组1.0 g/kg)和阳性对照组(联苯双酯0.15 g/kg)。检测各组小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量;测定肝组织匀浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;计算肝脏的湿重指数;HE染色法观察肝脏组织的病理学变化。与空白对照组相比,模型组血清ALT、血清AST、肝脏指数、肝组织MDA含量以及血清TNF-α明显增高(均P<0.01),肝组织SOD活性明显降低(P<0.01),肝组织病理损伤明显。与模型组相比,PTE高剂量组和阳性对照组血清ALT显著降低(P<0.01),PTE低、高剂量组和阳性对照组血清AST、肝脏指数、肝组织MDA含量以及血清TNF-α含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),肝组织SOD活性明显升高(P<0.01),并减轻了肝组织病理损害。PTE可减轻CCl_4诱导的急性肝损伤,其机制可能与抗氧化、抑制TNF-α的产生有关。

毛蒟化学成分研究

目的:研究胡椒科植物毛蒟的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、凝胶色谱等方法进行化学成分的分离纯化,通过理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:从毛蒟中分离得到了15个化合物,分别鉴定为:galgravin(1)、veraguensin(2)、N⁃isobutyl⁃7⁃phenyl⁃2E,4E⁃nonadienamide(3)、异樱花素(4)、芝麻素(5)、ladanein(6)、futoquinol(7)、5⁃羟基⁃3,7,3′,4′⁃甲氧基黄酮(8)、halicerebroside(9)、stigmalactam(10)、N⁃甲基阿西米洛宾(11)、3β⁃hydroxy⁃5α,8α⁃epidioxyergosta⁃6,22⁃diene(12)、ervatamine(20R)(13)、四氢鸭脚木碱(14)、cannabisin F(15)。结论:其中,化合物4、10、13、14和15为首次从该植物中分离得到,化合物10、14为首次从该属中分离得到。

壮药毛蒟生药学鉴别研究

目的：壮药毛蒟生药学鉴别研究。方法：原植物鉴别、性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别。结果：多年生攀缘藤本，揉之有香，幼枝被柔软的短毛，老时脱落。叶互生，卵状披针形或卵形，雌雄异株；茎扁圆柱形，叶多皱缩，叶基部两边有毛茸，叶柄密生短毛；类多角形表皮细胞1列，可见刚毛和非腺毛。内皮层凯氏点明显。木化纤维束3-6列，外韧型维管束7-11个，可见中柱鞘纤维。髓部宽广，可见2-3个外韧型异常维管束。薄壁细胞中可见大量淀粉粒、草酸钙砂晶和小方晶。以环己烷三氯甲烷丙酮甲酸（8：4：1：0．15）为展开剂，以10％磷钼酸溶液为显色剂，供试品与对照药材显相同颜色的斑点。结论：以上特征明显、稳定，可作为壮药毛蒟生药学鉴别依据。

毛蒟挥发油测定及其贮存期考察

目的水蒸汽蒸馏法提取广西产毛蒟中挥发油,GC-MS法测定挥发油中β-石竹烯含有量,并对其最佳贮存期进行考察。方法挥发油的分析色谱柱为HP-5MS（30 m×0.25 mm,0.25μm）;程序升温;载气为氦气;水杨酸甲酯为内标物。结果挥发油得油率在0.23%-1.64%之间,贮存1年后其下降率为22.68%,1.5年后下降率为41.63%;β-石竹烯在0.033 9-0.542 4μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 6）,平均回收率为98.5%（RSD=2.0%,n=6）;β-石竹烯含有量在31.363 8-338.957 2 mg/m L之间,一年后其下降率为35.03%,一年半后下降率为44.53%。结论建议毛蒟的贮存时间不超过1年。

胡椒属三种民族药的生药学鉴别研究

目的:对胡椒属植物石南藤Piper wallichi(Miq.)Hand.-Mazz.、毛蒟P.puberulum(Benth.)Maxim.、山蒟P.hancei Maxim.进行生药学对比研究,建立鉴别三者主要特征的方法。方法:基于原植物基原鉴定、药材性状鉴定、不同器官显微组织鉴定,比较三者异同点,采用薄层色谱法鉴别三者。结果:三者显微特征较为相似。石南藤的叶片形状为椭圆形,毛蒟及山蒟叶片均为卵状披针形;石南藤枝被疏毛,毛蒟幼枝及叶片被短柔毛,而山蒟无毛。石南藤茎显微横切中髓部所占比例最小,仅为60%,而毛蒟和山蒟占比达到80%~90%。建立的薄层色谱鉴别方法能鉴别石南藤、毛蒟及山蒟。结论:可根据叶片形状、茎枝是否被毛、茎显微中髓部所占比例、薄层色谱鉴别区分石南藤、毛蒟及山蒟。该研究为三者的鉴别、质量控制及资源开发利用奠定了基础。