一个山羊Ⅰ型毛角蛋白基因的序列及其在皮肤中的表达

角蛋白家族包含表皮软角蛋白和毛发硬角蛋白,可以分为酸性Ⅰ型和碱性或中性的Ⅱ型角蛋白亚家族。从构建的成年山羊皮肤cDNA文库和ESTs分析中发现了和与绵羊羊毛角蛋白8C1和人Ⅰ型毛发角蛋白相应cD-NA序列高度同源的序列,经序列分析证明是一个山羊毛发特异性角蛋白,命名为山羊Ⅰ型毛角蛋白1(gHa1),GenBank序列号为AY510110.1。推导的读码框ORF由413氨基酸组成,与绵羊8C1角蛋白的序列一致性为97.8%。原位杂交显示它在皮肤初级和次级毛囊的皮质层有强烈的表达。

绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9基因的扩增及表达

本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin typeⅡintermediate filament 9,KIFⅡ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP6-1基因启动子,然后与RT-PCR扩增得到的KIFⅡ-9 cDNA序列连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,将重组表达载体以脂质体介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得转基因细胞克隆,结果显示,外源KAP6-1启动子序列和KIFⅡ-9 cDNA整合到细胞基因组中,为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊提供了条件。

鹿科动物毛角蛋白组分的比较研究

角蛋白是动物毛发的主要结构蛋白,由3或7条多肽链以α螺旋扭曲成纤维束。不同种属的动物毛角蛋白组分不同。因此,对不同动物毛角蛋白组分进行研究用于动物种属差异鉴别、亲缘关系以及分类学方面已引起人们的重视。池田典昭等人(1986)、Marshall(1987)、严品华等人(1989)用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)分别对某些动物毛发角蛋白做了比较分析。关于鹿科动物毛发角蛋白组分研究尚未见报道。

猪毛角蛋白降解菌的分离筛选及其降解特性研究

为了筛选能高效降解猪毛角蛋白的微生物,该研究利用猪毛角蛋白为唯一碳氮源的培养基从土壤中分离角蛋白降解菌,并对其菌种分类及降解角蛋白的特性进行了研究。通过驯化共筛选到6株能够降解猪毛角蛋白的菌株,经过7 d发酵培养,菌株X-3对猪毛角蛋白的降解率达77.3%,降解效果最佳。结合菌株形态特征、生理生化特征及16S rDNA发育进化树分析,初步鉴定该菌株为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。菌株X-3是一株广谱的角蛋白降解菌,对猪毛、羊毛、鸡毛、鹅毛、鸭毛的降解率均大于60%。该菌株在角蛋白底物作用下可产生角蛋白酶和二硫键还原酶,且酶活与猪毛角蛋白降解率变化存在显著的正相关性,表明菌株X-3产生的角蛋白酶和二硫键还原酶在角蛋白降解中起到非常关键的作用。在降解过程中,产生了大量的可溶性蛋白,二硫键中的硫也随之转化为硫酸盐、亚硫酸盐和巯基化合物,其中硫酸盐是主要的转化形式。该菌株的分离筛选丰富了猪毛角蛋白降解菌的微生物资源库,在氨基酸饲料生产中具有潜在的应用价值。

高效猪毛角蛋白降解菌株的分离与鉴定

为了筛选能高效降解猪毛角蛋白的微生物,从长期堆放废弃猪毛的土壤中取样,采用以猪毛粉为唯一碳氮源的培养基分离角蛋白降解菌,并对其产角蛋白酶条件进行了研究。通过驯化培养后,筛选到5株能够降解猪毛角蛋白的菌株,其中菌株E-2降解效果最佳。将E-2接种到以猪毛为唯一碳氮源的培养基中培养5 d后,猪毛降解率达58.6%,发酵液中角蛋白酶活为46.6 U·m L^(-1)。结合形态学观察、生理生化特征及ITS序列分析,鉴定该菌株为解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)。E-2产酶影响条件实验结果表明,培养108 h后酶活性最高,产角蛋白酶最适条件为p H值6.0~7.0,温度35~40℃,猪毛粉添加量15 g·L^(-1)。E-2能降解猪毛、鸡毛、羊毛,但降解活性及产酶活性均不同。该菌株的分离筛选为微生物降解猪毛角蛋白提供了新的菌种资源,至今未见解脂耶氏酵母在降解毛发角蛋白方面的相关报道。

PVA/角蛋白复合膜对亚甲基蓝吸附性能的研究

将PVA和牦牛毛提取的角蛋白进行共混,制备了PVA/角蛋白复合膜,探究其对亚甲基蓝的吸附性能,考察吸附时间、角蛋白含量、温度对PVA/角蛋白复合膜吸附性能的影响。结果表明:该复合膜对亚甲基蓝的吸附量随吸附时间先高速升高后趋于平衡,时间趋近于无穷大时,吸附率高达74.33%左右,随角蛋白含量的增大呈增速减缓的上升趋势,随温度升高不断下降,且在各个温度下的吉布斯自由能ΔG都小于0,该吸附反应都能自发正向进行。PVA/角蛋白复合膜对于Langmuir型分子吸附模型、准二级动力学模型的拟合度更高,说明该吸附过程主要由单分子层的化学吸附来完成。

废弃毛发角蛋白在缓/控释肥料中的应用研究进展

制革及毛纺等工业中的废弃动物毛是一种重要的角蛋白资源,应用价值高。近年来随着现代生物技术的进步,动物毛角蛋白提取及资源化利用方面的研究工作也不断发展,特别是其在有机肥料领域的应用。本文在总结角蛋白结构及其提取方法的基础上,重点综述了其在缓/控释肥料方面的应用研究进展,并对目前角蛋白用作缓/控释肥料存在的问题和发展趋势方向进行了分析。

转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究

【目的】利用体细胞核移植技术制备转毛角蛋白Ⅱ型中间丝K2.9基因的高绒质绒山羊胚胎,为绒山羊优良品种的培育提供一种全新的技术材料。【方法】以含有Neor基因标记的K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得转K2.9基因细胞,将获得的转基因阳性细胞与体外成熟的绒山羊卵母细胞进行核移植,并对生产的重构胚进行了体外培养。本文分别进行了激活方法、供体细胞和卵母细胞来源的筛选,且对获得的囊胚进行了PCR鉴定。【结果】(1)Iono+6-D对成年羊卵母细胞的孤雌激活效果好于A23187+6-D,显著提高了胚胎的卵裂率。(2)羔羊孤雌胚的卵裂率显著低于成年羊,但囊胚率差异不显著。(3)来自2只绒山羊胎儿的转基因成纤维细胞对核移植胚的发育没有显著影响,但2号羊的转基因细胞显著提高了融合率。(4)以羔羊卵进行核移植,显著降低了核移植胚的发育率。(5)对获得的囊胚进行PCR鉴定,成功扩增到目的基因。【结论】将K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染的绒山羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞,核移植到成年羊卵母细胞中,以Iono+6-D进行激活,首次成功、高效地获得携带K2.9基因的绒山羊囊胚。

染苑精粹

木聚糖酶处理对玉米苞叶纤维机械性能的影响；日落黄染料的物理化学性能和光谱性能;阳离子鸡毛角蛋白助剂改性棉织物的染色动力学;

专利技术

专利名称：角蛋白接枝水性聚氨酯聚合物皮革复鞣填充材料的制备方法 专利公开号：CN106478957A 申请人：温州大学 摘要：一种角蛋白接枝水性聚氨酯聚合物皮革复鞣填充材料的制备方法，以水性聚氨酯丙烯酸酯溶液为第1组分，在一定温度下，添加有机碱形成碱性催化体系，以牛毛角蛋白粉末为第2组分，将第1组分和第2组分经催化接枝反应，再经降温和有机酸调节pH值，