毛酸浆果提取物对RAW264.7细胞的免疫调节作用

该文探讨了毛酸浆果提取物(Physalis pubescens L.Fruits Extract,PPFE)对RAW264.7巨噬细胞免疫调节作用。采用噻唑蓝比色法(MTT)确定细胞毒性和增殖活性,格里斯法(Griess)、酶联免疫法(ELISA)、荧光探针法、中性红吞噬实验测定体外培养的巨噬细胞中一氧化氮(NO)、肿瘤因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、活性氧(ROS)含量以及吞噬率;流式细胞术测定细胞周期变化及细胞凋亡情况,荧光定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TNF-α、IFN-γ以及IL-6等细胞因子mRNA表达水平。结果显示:运用UHPLC-Q-TOF-MS测定PPFE化学成分分析,共鉴定出14种黄酮类物质。PPFE作用RAW264.7细胞的安全浓度在25~250μg/mL范围内,与空白组相比,毛酸浆果提取物质量浓度为25μg/mL时免疫增强效果最佳,其细胞增殖率、NO释放量、吞噬率、相对活性氧水平、TNF-α、IFN-γ、IL-6的分泌量分别为130.53%、27.79μmol/L、189.88%、137.75%、150.54 pg/mL、119.36 pg/mL、15.41 pg/mL。PPFE治疗组的细胞周期的G0/G1期、S期、G2/M期百分比分别为53.08%、17.40%、29.52%。细胞凋亡率与空白组相比降低了52.80%,同时极显著(p<0.01)上调TNF-α、IFN-γ、IL-6的表达。综上可知,PPFE通过调节RAW264.7细胞吞噬功能、分泌免疫因子、细胞周期分布及凋亡情况,以及上调细胞因子mRNA表达水平,增强RAW264.7细胞免疫调节作用。