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灰毡毛忍冬bZIP25基因的克隆及其表达模式分析
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作者 王珊 曾娟 +6 位作者 谢瑜 周日宝 刘湘丹 童巧珍 龙雨青 陈言 刘小丽 《中南药学》 CAS 2024年第2期335-340,共6页
目的克隆灰毡毛忍冬bZIP25基因序列全长,并进行生信分析及表达模式分析,以初步探索其在灰毡毛忍冬中的生物学功能。方法通过逆转录PCR技术克隆bZIP25基因的序列全长,采用生物信息学分析方法对bZIP25及其编码的蛋白进行分析。运用实时荧... 目的克隆灰毡毛忍冬bZIP25基因序列全长,并进行生信分析及表达模式分析,以初步探索其在灰毡毛忍冬中的生物学功能。方法通过逆转录PCR技术克隆bZIP25基因的序列全长,采用生物信息学分析方法对bZIP25及其编码的蛋白进行分析。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定其在茎、叶及七个花期花中的表达水平。结果克隆得到LmbZIP25基因(OR551766),其编码191个氨基酸,具有典型的bZIP家族结构,在bZIP结构域中与其他植物同源性较高。LmbZIP25基因具有组织特异性,在茎中的表达量显著高于花和叶,在七个花期中黄色花蕾期的表达量最高。结论克隆得到LmbZIP25基因全长,分析其在不同器官和不同花期的表达差异,为进一步探索其在灰毡毛忍冬中花发育中的功能奠定了研究基础。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 bZIP25 基因克隆 生物信息学分析 表达模式分析
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灰毡毛忍冬MADS-box基因家族鉴定与CMB1基因克隆 被引量:1
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作者 付学森 刘紫璇 +4 位作者 王玲 龙雨青 曾娟 周日宝 刘湘丹 《湖南中医药大学学报》 CAS 2024年第3期383-394,共12页
目的鉴定灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides MADS-box家族基因并进行生物信息学分析与表达模式验证,克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬MADS-box家族成员CMB1全长。方法基于转录组数据,利用在线工具对灰毡毛忍冬MADS-box进行生物信息学分析,... 目的鉴定灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides MADS-box家族基因并进行生物信息学分析与表达模式验证,克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬MADS-box家族成员CMB1全长。方法基于转录组数据,利用在线工具对灰毡毛忍冬MADS-box进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR验证MADS-box基因在不同品种中的表达模式,通过RT-PCR、RACE技术克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长。结果28个灰毡毛忍冬MADS-box蛋白长度为89~359 aa,碱性蛋白占比85.7%,不稳定蛋白占比96.4%,亲水性蛋白占比96.4%,均定位于细胞核,均为无跨膜结构的非分泌蛋白。转录组显示,与野生型比较,湘蕾型中28个MADS-box基因有17.86%表达下调,MIKCC型基因中有18.75%表达下调。克隆得到在两个品种的灰毡毛忍冬花中高度特异性表达的CMB1基因全长,均包含一个738 bp的ORF,编码245个氨基酸。CMB1基因在两个品种的花中表达量存在显著差异(P<0.01),且与茎、叶相比,在花中高度特异性表达(P<0.01)。结论基于灰毡毛忍冬转录组数据,鉴定了28个MADS-box家族基因,克隆得到湘蕾型与野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长,为进一步研究灰毡毛忍冬花发育、优良表型形成的分子机制提供研究基础与理论依据。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 MADS-box基因家族 表达分析 CMB1基因 基因克隆 表型变异
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灰毡毛忍冬花器官发育相关LmSOC1基因克隆及表达分析
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作者 龙丽君 马英姿 +4 位作者 曾慧杰 李昌珠 张岗 刘思思 李依民 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期181-190,共10页
【目的】克隆灰毡毛忍冬MADS-box家族基因SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1),对其进行生物信息学和表达模式分析,为探究灰毡毛忍冬花冠不开放机制奠定理论基础。【方法】基于花蕾型灰毡毛忍冬转录组数据,筛选到开花调控基因LmS... 【目的】克隆灰毡毛忍冬MADS-box家族基因SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1),对其进行生物信息学和表达模式分析,为探究灰毡毛忍冬花冠不开放机制奠定理论基础。【方法】基于花蕾型灰毡毛忍冬转录组数据,筛选到开花调控基因LmSOC1的Unigene序列并克隆全长cDNA序列,通过生物信息学分析和实时荧光定量PCR技术分析编码蛋白特性和不同品种中LmSOC1基因的表达特异性,最后将LmSOC1基因插入到原核表达质粒载体pTOPO-D1中,并在表达宿主BL21(DE3)中进行蛋白表达。【结果】LmSOC1基因包含645bp的ORF区,LmSOC1蛋白不含信号肽、无跨膜区,为稳定的亲水性蛋白。系统进化树分析表明,LmSOC1蛋白与黄花蒿、榴莲、可可等的SOC1蛋白亲缘关系更近。实时荧光定量PCR分析表明,在2个花蕾型灰毡毛忍冬品种的花蕾和叶片中均检测到LmSOC1基因的表达,而叶片中表达量明显高于花蕾。同时,在早期花蕾中LmSOC1基因的表达量高于晚期花蕾,在‘金翠蕾’品种中这一表达差异极显著(P<0.01)。最后成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出重组蛋白。【结论】通过对LmSOC1基因的克隆和表达分析发现,该基因可能在灰毡毛忍冬花器官发育过程中发挥重要作用,为进一步研究该基因在植物花发育中的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 MADS-BOX LmSOC1 基因克隆 表达分析 原核表达
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施硒对灰毡毛忍冬硒含量、产量及药用成分的影响
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作者 蒋龙 王湘莹 +2 位作者 王晓明 秦平书 滕建利 《湖南生态科学学报》 CAS 2024年第3期40-45,共6页
【目的】探究施硒对灰毡毛忍冬硒含量、产量和药用成分含量的影响。【方法】以灰毡毛忍冬优良品种‘金翠蕾’为试验材料,采用叶面喷施亚硒酸钠方法,设计喷施硒浓度0、50、100、150、200、250 mg/L及喷施次数0次、1次、2次、3次,测定不... 【目的】探究施硒对灰毡毛忍冬硒含量、产量和药用成分含量的影响。【方法】以灰毡毛忍冬优良品种‘金翠蕾’为试验材料,采用叶面喷施亚硒酸钠方法,设计喷施硒浓度0、50、100、150、200、250 mg/L及喷施次数0次、1次、2次、3次,测定不同喷施硒浓度和喷施次数的干花硒含量、鲜花产量、干花绿原酸和木犀草苷含量。【结果】施硒后灰毡毛忍冬的干花硒含量、鲜花产量、干花绿原酸和木犀草苷含量显著增加,喷施硒浓度150~200 mg/L比不施硒分别显著提高了192.42%~231.82%、53.14%~70.29%、16.32%~19.51%、14.61%~21.35%,喷施硒2次比不施硒显著提高了226.23%、63.41%、21.45%和22.31%。鲜花产量、干花绿原酸和木犀草苷含量均随着喷施硒浓度和喷施硒次数的增加呈现先增加后降低的趋势,干花硒含量与喷施硒浓度之间也表现出类似的趋势,但随着施硒次数的增加干花硒含量呈现递增的趋势。【结论】施硒能显著提高灰毡毛忍冬硒含量和产量,改善干花的品质,最适喷施硒浓度为150~200 mg/L,最适喷施硒次数为2次,即在花芽分化前期和花蕾初现期各喷施硒1次。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 施硒 产量 药用成分 硒含量
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灰毡毛忍冬ERF基因家族鉴定及其在衰老过程中的表达分析
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作者 刘燕妮 曹正艳 +3 位作者 吴佩荫 李清清 陈泽雄 唐宁 《经济林研究》 北大核心 2024年第2期13-28,共16页
【目的】灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides为我国南方地区大宗道地中药材和重要经济植物,绿原酸和木犀草苷等药效物质在器官衰老过程中积累且受转录因子调控。乙烯信号转导相关ERF基因家族广泛参与植物的衰老、胁迫响应和次生代谢。鉴... 【目的】灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides为我国南方地区大宗道地中药材和重要经济植物,绿原酸和木犀草苷等药效物质在器官衰老过程中积累且受转录因子调控。乙烯信号转导相关ERF基因家族广泛参与植物的衰老、胁迫响应和次生代谢。鉴定灰毡毛忍冬ERF家族成员并探究其表达模式,可为该类基因调控次生代谢的功能研究提供参考。【方法】基于转录组数据鉴定灰毡毛忍冬ERF转录因子家族,通过系统发育树分析其进化关系,利用MEME在线网站分析序列的结构基序。QRT-PCR分析LmERFs基因在不同器官衰老过程以及冷胁迫和乙烯处理后的表达模式。【结果】在灰毡毛忍冬中共鉴定出65个具AP2保守结构域的LmERFs基因,可将其分为3个亚组。利用RNA-Seq技术筛选了在幼嫩和衰老叶片之间差异表达的20个LmERFs。进一步qRT-PCR分析显示,分别有18个、13个和11个LmERFs基因在叶片、茎和花的衰老过程显著差异表达,其中LmERF2、LmERF9、LmERF16、LmERF17和LmERF19基因表达在不同器官衰老过程中均具显著差异。冷胁迫后,叶和茎中7个LmERFs(LmERF1、LmERF2、LmERF6、LmERF7、LmERF8、LmERF11和LmERF12)显著上调,LmERF3、LmERF9、LmERF16和LmERF19显著下调;而乙烯处理诱导了LmERF1、LmERF8和LmERF12基因的表达,抑制了LmERF2、LmERF4、LmERF9、LmERF10、LmERF14、LmERF15、LmERF16、LmERF17、LmERF18和LmERF19基因的表达。【结论】8个LmERFs(LmERF1、LmERF2、LmERF6、LmERF9、LmERF10、LmERF15、LmERF16和LmERF19)响应了器官发育、冷胁迫和乙烯诱导的衰老过程,这为后续挖掘高效调控灰毡毛忍冬次生代谢的靶点LmERFs提供了数据支持。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 ERF基因家族 器官衰老 乙烯 冷害胁迫
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我国灰毡毛忍冬的生态适宜性区划研究
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作者 梁晴 杨正久 +5 位作者 吴桃生 肖承鸿 胡思雨 韦德群 刘英波 谭怀美 《贵州农业科学》 CAS 2024年第8期113-120,共8页
【目的】探明影响灰毡毛忍冬生长的生态因子与其地理分布,为其适宜栽培区的选址、规划建设及植物资源的利用提供科学依据。【方法】收集全国1 242个灰毡毛忍冬分布样点的信息,综合58个生态因子,利用MaxEnt(最大熵)模型筛选影响灰毡毛忍... 【目的】探明影响灰毡毛忍冬生长的生态因子与其地理分布,为其适宜栽培区的选址、规划建设及植物资源的利用提供科学依据。【方法】收集全国1 242个灰毡毛忍冬分布样点的信息,综合58个生态因子,利用MaxEnt(最大熵)模型筛选影响灰毡毛忍冬适宜性分布的主导生态因子,结合ArcGIS预测灰毡毛忍冬在全国潜在的适宜分布区。【结果】构建的MaxEnt模型对预测灰毡毛忍冬潜在适宜分布区具有极高的准确度和可信度(AUC=0.971);影响灰毡毛忍冬分布的生态因子按建模贡献率大小包括11月降水量、寒冷指数、5月降水量、土壤类型、海拔、4月降水量、等温线、最干月降水量、坡度、年均温变化范围、9月平均气温、3月降水量、8月平均气温和10月降水量,其中,主要生态因子是11月降水量、寒冷指数和5月降水量,贡献率分别为35.4%、21.6%和17.5%;按适宜性综合评价等级分为最适宜区、中适宜区、低适宜区和不适宜区4类,灰毡毛忍冬的潜在分布集中在秦岭以南,包括贵州、重庆、湖南、广西、广东、江西、福建、浙江、台湾地区和陕西等区域;最适宜分布区包括贵州中部及东部、广西北部、湖南西部和南部小部分地区、湖北西南部、重庆南部、四川东南部及广东北部小部分地区,以及福建、江西、浙江、安徽两两交汇地区。【结论】影响灰毡毛忍冬适宜性分布的主导生态因子是11月降水量、寒冷指数和5月降水量,灰毡毛忍冬的潜在分布集中在秦岭以南;最适宜分布区在贵州中部及东部、广西北部、重庆南部,以及福建、江西、浙江、安徽两两交汇地区。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 生态适宜性 MaxEnt模型 ARCGIS
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细毡毛忍冬叶提取物的抗菌、抗氧化活性研究
7
作者 邢慧子 高平 +5 位作者 邓小宽 梁歌 李旭廷 王斌 李思聪 张敏 《四川林业科技》 2024年第4期98-105,共8页
为代替金银花花蕾作为饲料添加剂,降低饲料成本,充分利用细毡毛忍冬叶资源,因此探究细毡毛忍冬叶粗提物、工艺优化提取物及精制提取物的抗菌、抗氧化活性。测定细毡毛忍冬叶不同提取物的主要活性成分含量,并进行各提取物对大肠杆菌、金... 为代替金银花花蕾作为饲料添加剂,降低饲料成本,充分利用细毡毛忍冬叶资源,因此探究细毡毛忍冬叶粗提物、工艺优化提取物及精制提取物的抗菌、抗氧化活性。测定细毡毛忍冬叶不同提取物的主要活性成分含量,并进行各提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠寒沙门氏菌及铜绿假单胞菌的体外抑菌实验,并对抑菌效果较好的细毡毛忍冬叶精制物进行MIC(最小抑菌浓度)及MBC(最低杀菌浓度)测定。使用ABTA、DPPH、FRAP三种抗氧化能力检测方法测定各提取物总抗氧化能力。(1)细毡毛忍冬叶精制产物在抑菌活性实验中表现出显著抑菌活性,抑菌能力与金银花花蕾精制产物相近,比粗提物及工艺优化产物高。(2)细毡毛忍冬叶精制物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌的MIC分别为12.5 mg·mL^(-1)、6.25 mg·mL^(-1)、1.56 mg·mL^(-1)、3.125 mg·mL^(-1),MBC分别为25 mg·mL^(-1)、12.5 mg·mL^(-1)、3.125 mg·mL^(-1)、12.5 mg·mL^(-1)。(3)细毡毛忍冬叶精制物具有较强抗氧化性,其抗氧化能力随着溶液浓度的增加而逐步升高,且抗氧化性高于粗提物、工艺优化产物及金银花精制物,表明经过富集纯化的细毡毛忍冬叶产物的抗氧化性显著增加。细毡毛忍冬叶精制产物具有较好的抗菌、抗氧化活性,具有代替金银花作为饲料添加的潜力。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 抗菌 抗氧化
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电喷雾检测器高效液相色谱法测定复方北豆根氨酚那敏片中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙
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作者 沈心 顾晓风 周震宇 《化学分析计量》 CAS 2024年第1期65-69,共5页
建立电喷雾检测器高效液相色谱法测定复方北豆根氨酚那敏片中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙。选用Waters XBridge C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以甲醇为流动相A,0.05%三氟乙酸溶液为流动相B,梯度洗脱,检测器温度... 建立电喷雾检测器高效液相色谱法测定复方北豆根氨酚那敏片中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙。选用Waters XBridge C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以甲醇为流动相A,0.05%三氟乙酸溶液为流动相B,梯度洗脱,检测器温度为35℃。灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量浓度分别在2.33~291.57μg/mL、2.42~302.40μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.9996、0.9992,检出限分别为1.17、1.21μg/mL,定量限分别为2.33、2.42μg/mL。测定结果的相对标准偏差分别为2.54%和0.66%(n=6),样品加标平均回收率分别为104.8%和101.5%。该方法简单快捷,可为控制制剂中金银花投料的规范性提供技术支持。 展开更多
关键词 复方北豆根氨酚那敏片 高效液相色谱法 电喷雾检测器 毡毛忍冬皂苷乙 川续断皂苷乙 金银花
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贵州产细毡毛忍冬质量标准研究
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作者 谭霖 龙滢 +1 位作者 邹大维 杨桂花 《山东化工》 CAS 2024年第10期142-143,148,共3页
为控制贵州产细毡毛忍冬药材的质量,建立贵州产细毡毛忍冬药材的显微鉴别、薄层鉴别等标准。采用粉末进行显微鉴别;采用TLC法对绿原酸成分进行薄层鉴别,以硅胶G薄层板,展开剂:乙酸丁酯-丙酮-甲酸-水(体积比7∶3∶1.2∶1),展开,取出,晾干... 为控制贵州产细毡毛忍冬药材的质量,建立贵州产细毡毛忍冬药材的显微鉴别、薄层鉴别等标准。采用粉末进行显微鉴别;采用TLC法对绿原酸成分进行薄层鉴别,以硅胶G薄层板,展开剂:乙酸丁酯-丙酮-甲酸-水(体积比7∶3∶1.2∶1),展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁试液与1%铁氰化钾试液(体积比1∶1)混合液的上清液,显色,斑点清晰分离度好。本文采用的方法和研究的各项指标可用于贵州产细毡毛忍冬药材的质量控制。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 显微鉴别 绿原酸 TLC
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银翘解毒片(胶囊)中灰毡毛忍冬皂苷乙的检查研究
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作者 黄招光 薛阳 +2 位作者 周云峰 杨建冬 黄炳泉 《光明中医》 2024年第2期278-280,287,共4页
目的 建立银翘解毒片(胶囊)中灰毡毛忍冬皂苷乙的检查方法,考察是否存在山银花掺伪金银花情况。方法 以灰毡毛忍冬皂苷乙为检测指标,采用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)进行定性分析,并运用超高效液相色谱-质谱... 目的 建立银翘解毒片(胶囊)中灰毡毛忍冬皂苷乙的检查方法,考察是否存在山银花掺伪金银花情况。方法 以灰毡毛忍冬皂苷乙为检测指标,采用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)进行定性分析,并运用超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)进行结果确认。结果 在薄层色谱中,有3批样品出现与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品位置和颜色一致的斑点,在液相色谱中,有4批次样品出现与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品保留时间一致的色谱峰,通过UPLC-MS/MS法验证,4批样品检出灰毡毛忍冬皂苷乙成分,出现山银花掺伪情况。结论 所建方法能准确甄别银翘解毒片(胶囊)中灰毡毛忍冬皂苷乙的情况,有助于控制该制剂中金银花药味的质量。 展开更多
关键词 银翘解毒片(胶囊) 山银花 金银花 毡毛忍冬皂苷乙
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灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 刘湘丹 陈勋 +5 位作者 龙雨青 王志辉 刘笑蓉 王朝晖 童巧珍 周日宝 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第7期1215-1224,共10页
目的分别克隆灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因全长序列,并进行生物信息学和表达量分析,以揭示HQT2在灰毡毛忍冬与忍冬绿原酸生物合成中的可能功能。方法多糖多酚试剂盒法分别提取灰毡毛忍冬与忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆HQT2基因的... 目的分别克隆灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因全长序列,并进行生物信息学和表达量分析,以揭示HQT2在灰毡毛忍冬与忍冬绿原酸生物合成中的可能功能。方法多糖多酚试剂盒法分别提取灰毡毛忍冬与忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆HQT2基因的全长c DNA序列,运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分别测定灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花中相关基因的相对表达量;采用HPLC测定绿原酸含量并结合表达量做相关性分析。结果克隆得到LmHQT2(MH196564)和LjHQT2(MK294639),其开放阅读框长度均为1296 bp,编码431个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,可能定位于细胞质中,属于氯霉素乙酰转移酶样结构域超家族;qRT-PCR结果显示,HQT2基因具有组织特异性,在灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花器官中表达存在差异;绿原酸含量与基因相对表达量之间呈现一定的相关性。结论本研究成功克隆了灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因并探索其在不同器官中的表达模式,推测HQT2基因在灰毡毛忍冬与忍冬的绿原酸生物合成途径中发挥不同功能,为进一步研究该基因的功能及探究灰毡毛忍冬和忍冬绿原酸生物合成调节机制提供了研究基础。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 忍冬 HQT2 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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灰毡毛忍冬花蕾乙醇提取物中酚酸类化学成分 被引量:2
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作者 姚静远 单宇 +5 位作者 鲁正熹 吴君芝 王湘莹 王晓明 冯煦 陈雨 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期92-94,共3页
从灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)花蕾乙醇提取物中分离并鉴定出9个酚酸类化合物,分别为咖啡酸(1)、绿原酸(2)、4-O-咖啡酰奎宁酸(3)、5-O-咖啡酰奎宁酸(4)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(5)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸(6)、4,5-O... 从灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)花蕾乙醇提取物中分离并鉴定出9个酚酸类化合物,分别为咖啡酸(1)、绿原酸(2)、4-O-咖啡酰奎宁酸(3)、5-O-咖啡酰奎宁酸(4)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(5)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸(6)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸(7)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸乙酯(8)和4,5-O-二咖啡酰奎宁酸乙酯(9)。化合物4、5、6、7、8和9均为首次从灰毡毛忍冬中分离获得。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 花蕾 乙醇提取物 酚酸类 结构鉴定
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灰毡毛忍冬化学成分的研究 被引量:60
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作者 茅青 曹东 贾宪生 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期273-281,共9页
从灰毡毛忍冬(Lonicera mocranthoide Hand. -Mazz.)花的乙醇提取物的正丁醇溶解部分分得三个常春藤皂甙元的双糖链甙,其中一个为已知化合物川续断皂甙乙(dipsacoside B,Ⅰ);另外两个为新化合物,分别命名为灰毡毛忍冬皂甙甲(macranthoid... 从灰毡毛忍冬(Lonicera mocranthoide Hand. -Mazz.)花的乙醇提取物的正丁醇溶解部分分得三个常春藤皂甙元的双糖链甙,其中一个为已知化合物川续断皂甙乙(dipsacoside B,Ⅰ);另外两个为新化合物,分别命名为灰毡毛忍冬皂甙甲(macranthoidin A,Ⅱ)和灰毡毛忍冬皂甙(nmcranthoidin B,Ⅲ),两者的次级皂甙灰毡毛忍冬次皂甙甲(macranthoside A,Ⅱb)和灰毡毛忍冬次皂甙乙(macranthoside B,Ⅲb),亦未见报道。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 川续断皂甙乙 毡毛忍冬皂甙甲和乙 毡毛忍冬次皂甙甲和乙
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UPLC-QTRAP-MS/MS法同时测定连花清瘟胶囊(颗粒)中18种成分及山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙 被引量:1
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作者 李应才 黄合琤 杨野 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2131-2137,共7页
目的建立UPLC-QTRAP-MS/MS法同时测定连花清瘟胶囊(颗粒)中连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、(R,S)-告依春、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大... 目的建立UPLC-QTRAP-MS/MS法同时测定连花清瘟胶囊(颗粒)中连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、(R,S)-告依春、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、红景天苷、甘草苷、甘草酸铵,以及山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙的含量。方法该药物40%甲醇提取液的分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相(5 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸)-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子模式扫描;多反应监测模式。结果19种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率89.37%~102.19%,RSD 2.03%~3.75%。各批样品均未检出灰毡毛忍冬皂苷乙。结论该方法简便、准确、高效,可用于连花清瘟胶囊(颗粒)的质量控制及山银花的掺伪鉴别。 展开更多
关键词 连花清瘟胶囊(颗粒) 化学成分 山银花 毡毛忍冬皂苷乙 UPLC-QTRAP-MS/MS
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灰毡毛忍冬乙醇提取物减缓D–半乳糖致小鼠胚胎成纤维细胞氧化应激的效果
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作者 韩少凡 程满 +5 位作者 王懿文 陈彦超 朱登峰 彭国平 饶力群 汪启明 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期43-51,78,共10页
为探讨灰毡毛忍冬乙醇提取物对D–半乳糖诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)氧化应激的保护作用及其潜在机制,通过广泛靶标代谢组测序和高效液相色谱法检测灰毡毛忍冬乙醇提取物中活性物质,采用20 mg/mL的D–半乳糖处理MEF细胞,建立细胞衰老模... 为探讨灰毡毛忍冬乙醇提取物对D–半乳糖诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)氧化应激的保护作用及其潜在机制,通过广泛靶标代谢组测序和高效液相色谱法检测灰毡毛忍冬乙醇提取物中活性物质,采用20 mg/mL的D–半乳糖处理MEF细胞,建立细胞衰老模型,试验设置对照组(0 mg/mL的D–半乳糖)、模型组(20 mg/mL的D–半乳糖)、灰毡毛忍冬乙醇提取物组(100、500、1000μg/mL的灰毡毛忍冬乙醇提取物添加20 mg/mL的D–半乳糖)、阳性对照组(50μg/mL的三七总皂苷添加20 mg/mL的D–半乳糖),按照试验分组,将细胞在37℃、5%的CO_(2)培养箱中培养48 h,检测细胞抑制率、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位(MMP)和线粒体活性氧(mtROS)水平,以及p53、p16、线粒体复合体基因、Bcl–2、Caspase–3的表达水平。结果表明:灰毡毛忍冬乙醇提取物中含有酚酸、黄酮、有机酸、萜类等大量活性物质;与对照组相比,模型组细胞抑制率显著增加,细胞数量显著减少,MMP下降,mtROS水平增加,SOD含量降低,MDA含量增加,线粒体复合体蛋白NDUFV1和抑凋亡蛋白Bcl–2明显下降,Caspase–3明显上升;与模型组相比较,灰毡毛忍冬乙醇提取物组和阳性对照组有效降低了细胞抑制率,显著提高了细胞数量和SOD活性,降低了MDA含量,提高MMP水平,降低mtROS含量,有效降低p53、p16、Caspase–3的蛋白水平,升高Bcl–2、NDUFV1的蛋白水平。说明在MEF细胞中,灰毡毛忍冬乙醇提取物可通过增加线粒体复合体I蛋白富集和减缓细胞凋亡来减弱D–半乳糖所诱导的氧化应激效应。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 乙醇提取物 D–半乳糖 小鼠胚胎成纤维细胞 线粒体 氧化应激
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灰毡毛忍冬UGTPg17、UGTPg36基因克隆及功能研究
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作者 杨敏 龙雨青 +6 位作者 曾娟 曾梅 周新茹 王玲 付学森 周日宝 刘湘丹 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期256-267,共12页
克隆灰毡毛忍冬糖基转移酶UGTPg17、UGTPg36基因,并进行其不同花期表达量与皂苷含量相关性分析。根据灰毡毛忍冬转录组Unigene序列设计特异性引物进行UGTPg17、UGTPg36克隆;使用生物信息学网站对克隆的UGTPg17、UGTPg36编码蛋白进行理... 克隆灰毡毛忍冬糖基转移酶UGTPg17、UGTPg36基因,并进行其不同花期表达量与皂苷含量相关性分析。根据灰毡毛忍冬转录组Unigene序列设计特异性引物进行UGTPg17、UGTPg36克隆;使用生物信息学网站对克隆的UGTPg17、UGTPg36编码蛋白进行理化性质、蛋白结构和进化关系等分析;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析基因在不同花期表达情况;HPLC法测定灰毡毛忍冬皂苷含量;利用SPSS分析基因表达量与皂苷含量相关性。UGTPg17、UGTPg36基因开放阅读框长度分别为1410 bp、1428 bp,分别编码469、475个氨基酸,分别包含4、7个糖基化位点,均属于不稳定、亲水性蛋白,不具跨膜区域;UGTPg36蛋白不存在信号肽序列,UGTPg17蛋白平均S值>0.5,推测其可能含有信号肽。UGTPg17、UGTPg36在不同花期中表达均为上升趋势,皂苷含量在不同花期中存在波动,两者相关性分析得出,2个UGT基因与皂苷含量呈极显著负相关。成功从灰毡毛忍冬中克隆了UGTPg17、UGTPg36基因,其在不同花期表达存在差异性,且相关性分析表明UGTPg17、UGTPg36基因与灰毡毛忍冬皂苷生物合成相关,为进一步探索其具体功能奠定了基础。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 糖基转移酶 基因克隆 生物信息学 表达分析 皂苷含量
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灰毡毛忍冬皂苷乙抑制人肝癌Hepal-6细胞的分子机制的研究 被引量:1
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作者 姚晓云 钭方芳 +1 位作者 郑智 饶军 《实用癌症杂志》 2023年第3期360-365,共6页
目的 探讨灰毡毛忍冬皂苷乙(MB)在体外对人肝癌细胞株Hepal-6的抑制作用及可能机制的研究。方法 不同浓度的MB(0、 100、 200、 400μmol/L)作用肝癌Hepal-6细胞后,CCK-8法检测肝癌细胞株Hepal-6的存活率;通过测定了Hepal-6细胞中ROS的... 目的 探讨灰毡毛忍冬皂苷乙(MB)在体外对人肝癌细胞株Hepal-6的抑制作用及可能机制的研究。方法 不同浓度的MB(0、 100、 200、 400μmol/L)作用肝癌Hepal-6细胞后,CCK-8法检测肝癌细胞株Hepal-6的存活率;通过测定了Hepal-6细胞中ROS的含量、MDA水平以及SOD、GSH、GSH-px的活性,探讨不同浓度的MB对Hepal-6细胞氧化应激水平的影响;通过检测FADD、Caspase8、RIPK1、RIPK3和MLKL的mRNA表达水平来检测不同浓度的MB对Hepal-6细胞坏死性凋亡相关基因的影响。结果 MB对肝癌Hepal-6细胞的抑制作用呈明显的剂量依赖性。结论 MB对肝癌细胞Hepal-6抑制存活率作用明显;MB破坏Hepal-6细胞内氧化还原系统的动态平衡,最终启动凋亡程序。另外,MB对坏死性凋亡相关基因表达影响,进而诱导肝癌细胞的坏死性凋亡而实现。 展开更多
关键词 肝癌 毡毛忍冬皂苷乙 活性氧 坏死性凋亡 CASPASES
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灰毡毛忍冬化学成分研究V灰毡毛忍冬素F和G的结构测定 被引量:41
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作者 陈敏 吴威巍 +2 位作者 沈国强 罗思齐 李惠庭 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第8期617-620,共4页
灰毡毛忍冬化学成分研究V灰毡毛忍冬素F和G的结构测定陈敏,吴威巍,沈国强,罗思齐,李惠庭(上海医药工业研究院200040)灰毡毛忍冬(LoinceramacranthoidesHand.-Mazz)系忍冬科忍冬属植物... 灰毡毛忍冬化学成分研究V灰毡毛忍冬素F和G的结构测定陈敏,吴威巍,沈国强,罗思齐,李惠庭(上海医药工业研究院200040)灰毡毛忍冬(LoinceramacranthoidesHand.-Mazz)系忍冬科忍冬属植物,别名大花忍冬,分布于贵州、广西、... 展开更多
关键词 毡毛忍冬 毡毛忍冬 化学成分
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细毡毛忍冬与灰毡毛忍冬的形态组织学对比 被引量:3
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作者 马逾英 杨苗 +2 位作者 马羚 杨爱薇 赵阳 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期511-513,共3页
目的确定细毡毛忍冬的鉴别特征,找出细毡毛忍冬和灰毡毛忍冬在外观形态和组织构造上的主要区别。方法按生药学常规方法对两种忍冬进行形态组织学对比研究,对部分显微特征进行显微摄影。结果对两种忍冬在植物形态、药材性状、组织构造上... 目的确定细毡毛忍冬的鉴别特征,找出细毡毛忍冬和灰毡毛忍冬在外观形态和组织构造上的主要区别。方法按生药学常规方法对两种忍冬进行形态组织学对比研究,对部分显微特征进行显微摄影。结果对两种忍冬在植物形态、药材性状、组织构造上的进行了鉴别。结论为细毡毛忍冬和灰毡毛忍冬的品种鉴别提供了参考依据。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 毡毛忍冬 植物形态 药材性状 显微鉴定
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土壤质地对山银花灰毡毛忍冬质量的影响研究
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作者 陈仕高 张苏杭 +1 位作者 杨美森 李红梅 《安徽农学通报》 2023年第12期51-54,共4页
探究土壤质地对山银花灰毡毛忍冬质量的影响,为中药材山银花高质量发展提供理论依据,本研究选取重庆秀山县有代表性的灰毡毛忍冬种植基地,采集黏土和砂土质地的灰毡毛忍冬“渝蕾1号”样品进行检测。结果表明,黏土有利于山银花灰毡毛忍... 探究土壤质地对山银花灰毡毛忍冬质量的影响,为中药材山银花高质量发展提供理论依据,本研究选取重庆秀山县有代表性的灰毡毛忍冬种植基地,采集黏土和砂土质地的灰毡毛忍冬“渝蕾1号”样品进行检测。结果表明,黏土有利于山银花灰毡毛忍冬的绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的合成,其含量更高,与砂土比较,差异达显著或极显著水平;砂土有利于山银花灰毡毛忍冬的木犀草苷合成,其含量更高,与黏土比较,差异达显著水平。可见,土壤质地对山银花灰毡毛忍冬质量的影响显著。本研究结果对全国砂土和黏土并存地区规划种植灰毡毛忍冬,提升产品质量起到重要指导作用。 展开更多
关键词 土壤质地 山银花灰毡毛忍冬 产品质量
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