产气荚膜梭菌qPCR法在动物模型和临床病例中的应用

目的 利用产气荚膜梭菌qPCR法检测A型产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens type A）感染小鼠的后肢的气性坏疽动物模型和一例阳性病例,以验证此法在早期诊断优势.方法 小鼠随机分成4组,10只/组分别肌肉注射3.5×109、3.5×108和3.5×107cfu/ml浓度的A型产气荚膜梭菌（ATCC13124）菌液0.1 ml,空白对照组肌肉注射生理盐水0.1 ml,建立小鼠感染的动物模型,利用产气荚膜梭菌qPCR方法 对动物模型及一例病例进行检测分析.结果 不同浓度菌液组（3.5×109、3.5×108、3.5×107cfu/ml实验组）和对照组在肌肉注射72 h内的死亡率为：90%、70%、10%和0;各组平均存活时间（hh：mm）依次为：20∶43±11∶12、37∶24±25∶39、68∶36±10∶45和72∶00±0∶00,各组荧光定量Ct值均值为：21.21±2.69、28.45±2.74、32.49±2.87和0.00±0.00,组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.利用该法检测病者两处分泌物,Ct值为30.67、30.44.结论 利用产气荚膜梭菌qPCR法成功检测出未发病的小鼠中的产气荚膜梭菌,并成功的应用于一例病例中.