双叶清肺止咳糖浆止咳药效学及对大鼠感染后支气管模型BALF中P物质、CGRP、NGF的影响

目的:研究双叶清肺止咳糖浆的祛痰、抗炎作用及其作用机制。方法:通过大鼠玻璃毛细管排痰实验和小鼠气管酚红排泌实验,观察双叶清肺止咳糖浆的祛痰作用;通过小鼠耳肿胀实验观察双叶清肺止咳糖浆的抗炎作用,通过小剂量脂多糖(LPS)诱导革兰阴性菌感染,建立大鼠感染后支气管模型,用ELISA法检测空白组、双叶清肺止咳糖浆高、中、低剂量组、阳性对照组左肺BALF中P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、鼠神经生长因子(NGF)的含量。结果:(1)大鼠排痰实验中,双叶清肺止咳糖浆高、中剂量组、氯化铵组大鼠排痰量较空白组增加,差异显著(P<0.01);(2)小鼠气管酚红排泌实验中,双叶清肺止咳糖浆高剂量组、氯化铵组、急支糖浆组能升高排泌酚红浓度,与空白组比较,差异显著(P<0.05,P<0.01);(3)小鼠耳肿胀实验中,双叶清肺止咳糖浆高剂量组、醋酸泼尼松组、急支糖浆组耳肿胀度较空白组降低,差异显著(P<0.05,P<0.01);(4)模型实验中,与正常组比较,模型组SP、CGRP、NGF的含量明显升高,双叶清肺止咳糖浆高、中剂量组、美敏伪麻溶液组SP、CGRP、NGF的含量与模型组比较显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:双叶清肺止咳糖浆能促进排痰,减轻炎症反应,减少大鼠咳嗽次数,保护受损炎症组织,其机制可能与改善大鼠SP和CGRP、NCF表达有关。

细胞密度对组织工程化三维支气管模型体外再造影响的研究

研究种子细胞接种密度对体外构建组织工程化三维支气管模型的影响,并筛选出适宜体外构建支气管模型的细胞密度。以人支气管上皮细胞系和人胎肺成纤维细胞系为种子细胞,胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,将两种细胞按照6×104/ml、6×105/ml、6×106/ml和6×107/ml四个接种密度共培养,应用静态拉伸系统体外构建组织工程化三维支气管模型。通过宏观观察、相差显微镜观察和组织学检测的方法对模型中种子细胞的生长情况进行鉴定。结果表明:6×104/ml细胞密度未见到组织片层形成,其余三个细胞密度可以看到收缩良好的组织片层,并具有一定韧性;相差显微镜下观察6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层可以形成网状结构,6×107/ml细胞密度的组织片层结构疏松;HE染色证实6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层中有三维网状结构形成,免疫组织化学染色广谱CK和Vimentin均呈阳性,前者的细胞活性较后者更好,而6×107/ml细胞密度组织片层基本丧失细胞活性。体外构建组织工程化三维支气管模型其种子细胞密度在6×105/ml至6×106/ml之间较为适宜。

组织工程化三维支气管模型体外再造的实验研究

目的以人支气管上皮细胞系和人胎肺成纤维细胞系为种子细胞、胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,探索采用体外构建组织工程化三维支气管模型的可行性,为研究支气管上皮细胞和成纤维细胞相互作用提供模型。方法将支气管上皮细胞和肺脏成纤维细胞在添加Matrigel的液态Ⅰ型胶原中共培养,应用静态拉伸系统体外构建支气管模型。通过大体观察、相差显微镜观察、HE染色和免疫组织化学染色(广谱CK等)的方法对细胞的生长情况及形成的三维组织结构进行鉴定。结果在体外应用静态拉伸系统能构建出组织工程化三维支气管模型。大体观察可以看到收缩良好的组织片层,并具有一定韧性;相差显微镜下可以观察到网状结构的形成,细胞活性良好;HE染色表明了三维网状结构的形成;免疫组织化学染色广谱CK和Vimentin呈阳性。结论体外成功构建出组织工程化三维支气管模型,种子细胞共培养可在支架材料中完成极性生长过程并形成网状结构。

大鼠慢性支气管炎模型在颗粒物PM_(2.5)毒性研究中的应用

目的研究颗粒物PM2.5对慢性支气管炎大鼠与正常大鼠的急性毒效应,以及这种毒效应在模型组和正常组之间的差异。方法采用气管滴注的方法,对慢性支气管炎模型组和正常组连续染毒3天,在最后一次染毒24小时后处死动物,分析肺灌洗液中白蛋白(ALB)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量。结果颗粒物PM2.5对模型组和正常组动物均产生急性毒作用,且存在剂量反应关系;模型组肺灌洗液中ALB、LDH、AKP和MDA四项指标在高剂量组均明显高于正常组(P<0.05),而GSH低于正常组(P<0.05)。结论颗粒物PM2.5可以导致大鼠急性肺损伤,并且慢性支气管炎模型组比正常组对颗粒物PM更加易感。

大鼠吸烟致慢性支气管炎模型气道炎症研究

目的 建立大鼠慢性支气管炎形成过程系列模型,探讨早期不同阶段炎症细胞浸润的特点。方法 混合烟雾吸入法建立慢性支气管炎形成的系列发展模型;HE染色观察不同阶段的病理形态学改变并进行半定量评分。光镜下行支气管肺泡灌洗液(BALF)和外周血炎症细胞计数和分类,生化测定肺组织和外周血髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果 随着烟雾刺激时间的增加,大鼠气道炎症病损逐渐加重,至第7周形成慢性支气管炎典型病理变化,BALF中炎症细胞总数、淋巴细胞百分比呈增加趋势(P<0.05),与气道病理变化呈正相关。中性粒细胞百分比在1周时处于较高水平(P<O.05),以后则保持一低水平,与对照组无明显差异(P>O.05)。肺组织MPO活性呈逐渐增加趋势,与气道病理变化呈正相关(P<0.01)。结论 混合烟雾吸入法大鼠模型用于研究慢性支气管炎炎症的发生发展简便、可靠;半定量分析的形态学评价为其提供了更客观的方法。大鼠慢性支气管炎形成过程早期,支气管管腔内炎症细胞类型符合慢性炎症的特点。

滴鼻和雾化两种不同激发方式对小鼠支气管哮喘模型气道炎症的影响

目的探讨滴鼻和雾化两种不同激发方式对小鼠支气管哮喘模型气道炎症的影响,为研究和优化支气管哮喘动物模型提供实验和理论依据。方法选择鸡卵清蛋白(OVA)致敏的BALB/c小鼠,分别采用滴鼻和雾化两种不同方式进行激发,复制哮喘模型,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数和细胞分类计数,ELISA方法检测BALF上清中IL-4、IL-13含量,常规病理切片苏木精-伊红(HE)染色观察肺内炎症情况。结果滴鼻组小鼠BALF中白细胞总数最高,其次为雾化组小鼠;且滴鼻组小鼠嗜酸性粒细胞总数及中性粒细胞总数亦明显高于雾化组与正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。滴鼻组小鼠BALF中IL-4、IL-13水平明显高于雾化组与正常组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);雾化组小鼠BALF中IL-4、IL-13水平高于正常组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。滴鼻组肺组织炎症反应最明显,并可见上皮细胞破坏,杯状细胞增生,支气管和血管周围有大量炎症细胞浸润,以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主。雾化组炎症程度较轻,正常对照组无明显炎症改变。结论雾化吸入和经鼻滴入的激发方式都可以成功制作出支气管哮喘模型,经鼻滴入方式可以引起肺部更加明显的炎症浸润及细胞因子表达,为哮喘研究提供更好的选择。

电喷汽油机进气管空气动态模型的仿真与试验研究

由理想气体状态方程、质量守恒方程、能量守恒方程和速度密度方程建立了电控燃油喷射汽油机进气歧管空气动态的均值模型。为满足基于模型进行空燃比实时控制的要求,基于以下两个假设对模型进行了简化:(1)假设进气流量与模型所建立的关于节气门开度和进气压力的表达式的乘积成线性关系;(2)充量系数和进气压力的乘积与进气压力成线性关系。在MATLAB/Simulink仿真环境中对模型进行了仿真分析,得到了模型的主要参数。最后分别在稳态和瞬态工况下将仿真结果与台架试验结果进行了对比,结果表明:模型中所作的假设成立,稳态和瞬态工况下模型的误差分别在2%和3%以内,说明模型具有较高的精度,且结构简单,能够满足控制过程实时性的要求。

化痰五味散对慢性支气管炎模型作用的实验研究

目的通过实验观察化痰五味散对慢性支气管炎模型的作用。方法采用豚鼠组胺引喘实验、豚鼠离体气管条实验、小鼠二氧化硫引咳实验及抗炎实验,对化痰五味散的平喘、止咳、抗炎作用进行实验研究。结果化痰五味散可明显延长引喘潜伏期,对组胺引起的豚鼠离体气管条收缩具有较好的抑制作用,明显延长二氧化硫所致小鼠的咳嗽潜伏期,具有改善慢性支气管炎性病变的作用。结论化痰五味散具有明显平喘、止咳、抗炎作用,可用于慢性支气管炎的治疗。

基于Nfr2/HO-1信号通路探讨清肺止咳方对急性支气管炎模型小鼠的影响

目的:基于抗氧化应激角度探讨Nfr2/HO-1信号通路对急性支气管炎的作用机制,验证清肺止咳方对急性支气管炎的疗效.方法:将80只SPF级小鼠随机分为模型组(64只)、正常组(16只),采用烟熏法制备急性支气管炎模型小鼠,烟熏1周后,随机从两组中各选4只小鼠,取其肺组织进行病理形态学检测,进行模型鉴定.造模成功后,将模型组随机平均分为5组:空白模型组,小儿清热止咳口服液阳性对照组,清肺止咳方低、中、高剂量组;正常组、空白模型组给予生理盐水灌胃,余组予相应药物灌胃治疗,共计1周.治疗结束后,运用免疫组化法测定全部小鼠肺组织IL-1β、IL-6的平均积分光密度,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定全部小鼠肺组织中Nfr2、HO-1蛋白表达水平.结果:与正常组相比,空白模型组IL-1β、IL-6积分光密度升高(P<0.05),Nfr2、HO-1蛋白表达水平下降,均具有统计学差异(P<0.05).与空白模型组相比,各药物组IL-1β、IL-6积分光密度均降低(P<0.05);Nfr2、HO-1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与阳性对照组相比,清肺止咳方低、中、高剂量组IL-1β、IL-6积分光密度均下降(P<0.05),Nfr2、HO-1蛋白表达水平均升高(P<0.05);清肺止咳方低中高组间比较,IL-1β、IL-6的平均积分光密度及Nfr2、HO-1蛋白表达水平无统计学差异.结论:Nfr2/HO-1信号通路在急性支气管炎的炎症反应过程中发挥着重要作用,清肺止咳方可能可通过调节该信号通路,促进Nfr2、HO-1表达,抑制IL-1β、IL-6的表达,进而治疗急性支气管炎.

补中柴前连梅煎对支气管扩张症大鼠模型肺气管组织病理学的影响

目的:探讨补中柴前连梅煎对支气管扩张症模型大鼠气管肺组织病理学的影响。方法:以铜绿假单胞菌液注入大鼠气管内的方法建立大鼠支气管扩张症模型,以补中柴前连梅煎进行干预,比较补中柴前连梅煎对支气管扩张症模型大鼠气管支气管组织、肺脏组织病理学的影响。结果:在气管支气管组织病理评分上,模型组、治疗组与空白组在柱状纤毛上皮、腺体细胞病理评分比较差异无统计学意义(P>0.05),模型组、治疗组与空白组在管腔内分泌物、炎性细胞浸润病理评分比较差异有统计学意义(P<0.05),在总分上模型组与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05),而治疗组与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05);在肺脏组织病理评分上,模型组与空白组在细支气管支气管周围浸润部位、浸润的定性、血管周围浸润、间质性肺炎病理评分及总分比较差异有统计学意义(P<0.05),而模型组与空白组在细支气管支气管腔渗出比较差异无统计学意义(P<0.05);治疗组与空白组在气管支气管周围浸润部位、浸润的定性、管腔渗、血管周围浸润、间质性肺炎病理评分及总分比较均差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补中柴前连梅煎可明显改善支气管扩张症模型大鼠气管支气管周围炎性浸润、血管周围炎性浸润及间质性肺炎,其对气管支气管组织病理学改善主要表现为整体调理作用。

黄芪注射液对支气管哮喘模型大鼠的免疫调节作用

[目的]应用黄芪注射液治疗支气管哮喘模型大鼠,对黄芪注射液治疗哮喘的机理进行初步的研究。[方法]建立支气管哮喘大鼠模型,应用流式细胞计数仪和酶联免疫吸附试验检测黄芪注射液对支气管哮喘模型大鼠的免疫调节作用,并与模型组和正常对照组作比较。[结果]黄芪注射液治疗组大鼠CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值均显著高于正常对照组和模型组(P﹤0.01,P﹤0.05),治疗组CD8+T细胞百分率显著低于模型组(P﹤0.05);模型组大鼠脾脏淋巴细胞体外培养分泌IL-2、IL-4水平显著高于对照组和治疗组(P﹤0.01)。[结论]黄芪注射液可以有效改善支气管哮喘模型大鼠的临床症状、恢复大鼠机体的免疫平衡调节作用,为黄芪注射液的进一步临床应用提供了实验依据。

支气管炎模型研究进展

急性支气管炎是支气管黏膜发生炎症，多继发于上呼吸道感染之后，气管常同时受累；慢性支气管炎是发生于气管、支气管黏膜及其周围组织的一种常见的慢性炎症性疾病。二者是最常见的呼吸道疾病，普遍性、多发性和反复性是二者的发病特点，严重影响患者的身心健康。急慢性支气管炎的实验研究也引起人们的日益重视，本文就急慢性支气管炎的模型研究进行以下回顾。

气管插管模型在临床技能教学中的应用

目的:分析和评价气管插管模型在气管插管教学中的应用效果。方法:对60例医学本科五年级学生进行气管插管教学,随机分为两组分别进行传统理论教学和模型教学,每组30例,学习结束后通过理论考试、技能测试以及问卷调查来评估教学效果。结果:模型教学组的技能测试成绩42.51±6.18优于传统教学组35.74±5.48,差异有统计学意义(P<0.05)。传统教学组插管成功率明显低于模型教学组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用气管插管模型进行技能教学,不仅可以明显提高医学生的操作能力,还可作为气管插管术有效的考评方法。

淫羊藿苷对气管切开模型大鼠早期β-防御素-2和T细胞亚群的影响

目的:探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对气管切开模型大鼠早期免疫相关指标的影响。方法:将54只SPF级雄性SD大鼠随机分成正常对照组(A组)、模型组(B组)、模型+ICA治疗组(C组),每组18只。B,C组制备大鼠气管切开模型。模型成功6 h后给予C组ICA干预,A,B组给予等量生理盐水。分别在第24,72,168 h取肺组织、肺泡灌洗液及外周血。用RT-PCR检测大鼠肺组织中β-防御素-2 mRNA表达,ELISA检测肺泡灌洗液及外周血血清中β-防御素-2含量,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+)含量,并计算CD4+/CD8+值。结果:气管切开后B组大鼠肺组织β-防御素-2 mRNA及肺泡灌洗液β-防御素-2含量在24 h明显升高,随后逐渐降低,至168 h降低最明显(均P<0.05);外周血血清β-防御素-2含量逐渐降低,168 h明显低于24 h(P<0.05),但3个时间点与A组比较差异均无统计学意义(均P>0.05);外周血CD3+T细胞水平24 h明显低于A组(P<0.05),CD4+和CD8+T细胞水平3个时间点与A组比较差异均无统计学意义,且各组组内差异亦均无统计学意义(均P>0.05)。C组ICA干预后:肺组织、肺泡灌洗液、外周血血清β-防御素-2含量及外周血中CD3+和CD4+T细胞水平均逐渐升高,明显高于B组(均P<0.05);CD8+在24 h明显低于A组(P<0.05),其余时间点3组组间组内比较差异均无统计学意义(均P>0.05);CD4+/CD8+值在168 h明显高于A,B组(均P<0.01)。结论:ICA可以改善气管切开模型大鼠早期肺部免疫功能,这可能与上调肺组织β-防御素-2 mRNA表达及肺泡灌洗液、外周血血清中β-防御素-2含量,提高外周血中CD3+和CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+值,降低CD8+T细胞水平有关。

越桔提取物对二氧化硫性慢性支气管炎模型小鼠的影响

目的阐明越桔提取物临床治疗急、慢性支气管炎的药效学基础。方法给小鼠长期吸入二氧化硫气体,造成慢性支气管炎模型,观察越桔提取物对模型小鼠浓氨水致咳和支气管病理学检查的影响。结果越桔提取物可明显延长浓氨水的咳嗽潜伏期,并减少3分钟内的咳嗽次数。抑制二氧化硫引起的支气管腺体的病理性改变。结论越桔提取物对二氧化硫性慢性支气管炎模型小鼠具有治疗作用。

环孢素A对小鼠气管移植模型中气管上皮细胞的影响

背景:气管上皮的再生及完整性对预防肺移植后闭塞性细支气管炎起着最为关键的作用。目的:观察环孢素A对小鼠气管异位移植模型中移植气管上皮细胞增殖的影响。方法:将BALB/c小鼠气管异位移植到C57BL/6小鼠颈背部皮下,建立异位气管移植模型,将受体小鼠随机分组:实验组腹腔注射环孢素A25mg/(kgd),对照组不注射环孢素A。结果与结论:移植气管病理检查显示,环孢素A具有延缓上皮细胞剥离、减少淋巴细胞浸润以及延缓纤维化过程的作用,但最终仍无法阻止移植物管腔闭塞的发生。上皮细胞定量分析显示,环孢素A可以延缓上皮纤毛细胞下降幅度,延缓上皮细胞增殖高峰期,加快上皮细胞凋亡高峰期。细胞因子检测显示,环孢素A对白细胞介素4分泌具有促进作用,对干扰素γ分泌具有早期促进,中晚期抑制作用。

麻芍平喘汤对支气管哮喘大鼠气道重塑及IL-5、IL-13影响研究

目的:探讨麻芍平喘汤对支气管哮喘大鼠气道重塑及血清IL-5、IL-13的影响。方法:雄性SD大鼠70只随机分为正常组、模型组、地塞米松组、阳和平喘组和麻芍平喘高、中、低剂量组,每组10只,造模28天后,正常组、模型组每天给予生理盐水灌胃,其他各组给予相应药物灌胃,2周后解剖大鼠并取出肺组织。结果:模型组肺组织病理学改变明显,对大鼠血清中IL-5和IL-13的影响麻芍平喘汤各剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),中药组与地塞米松组比较差异有统计学意义(P<0.05),麻芍平喘高剂量组与阳和平喘组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:麻芍平喘汤具有减轻哮喘气道炎症,干预气道重塑的作用。

TBL教学法在纤维支气管镜教学中的探索研究

目的文章旨在探索以团队协作为基础的TBL教学法制作支气管模型在纤维支气管镜操作教学中的应用效果。方法挑选2017年12月—2018年12月于本院呼吸与危重症医学科进行临床实习的学生、进修生、规培生共72名,将72人随机划分为每组为36人的实验组和常规组,分别应用TBL教学法和传统教学法对纤维支气管镜进行教学操作,对比两组教学效果。结果与常规组对比,实验组实践操作、主观题、病例分析题平均得分较高,两组数据差异具有统计学意义(P<0.05)。与常规组相比,实验组教学模式更具有趣味性,可以激发学员的求知欲和学习兴趣,可以培养学生问题分析能力、团队协作处理能力,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论纤维支气管镜操作临床实践带教中TBL教学法的应用效果较好,可以激发学员的学习兴趣和自主学习能力,学员更重视团队的凝聚力,教学效果更好。

慢支固本冲剂治疗慢性支气管炎的药效实验

慢支固本冲剂的药效学实验系在慢性支气管炎(慢支)模型鼠中进行,其中一组经口喂饲慢支固本冲剂,另一组喂水作对照,病理学检查给药组未发现明显的气管粘膜上皮损害,而未给药的模型组则出现典型的慢支病变,细菌感染试验给药组鼠的气管培养活菌计数远较未给药的模型组为少。此外,给药组在镇咳、平喘、祛痰及提高机体免疫力和体力等方面均有显著的疗效。上述效果可能是通过保护和修复呼吸道粘膜上皮的屏障作用而获得的。