气管滴注法建立肉鸡感染O157:H7型大肠杆菌模型

本试验旨在建立肠出血性大肠杆菌O157:H7(E.coli)感染肉鸡动物模型。将100只麻黄羽肉鸡饲喂至7日龄,挑选健康、体质量均一的鸡随机分为6组:空白对照组、A组(1×10^(7)cfu/mL E.coli感染组)、B组(1×10^(8)cfu/mL E.coli感染组)、C组(1×10^(9)cfu/mL E.coli感染组)、D组(1×10^(10)cfu/mL E.coli感染组)、E组(1×10^(11)cfu/mL E.coli感染组),每组设3个重复,每个重复5只鸡。感染组每只肉鸡气管滴注大肠杆菌菌悬液0.5 mL,空白对照组肉鸡气管滴注相同体积的磷酸缓冲液(PBS)。分别在试验开始前与感染后7 d记录肉鸡的体质量,试验期间记录肉鸡的采食量,并观察其临床变化。在感染后7 d对肉鸡颈静脉采血以检测肝功能。解剖摘取肉鸡肝脏、脾脏和结肠组织,计算肝脏和脾脏脏器指数,并对肝脏、脾脏和结肠进行载菌量检测和组织病理学观察。结果显示,与空白对照组相比,感染大肠杆菌后肉鸡的料重比和肝脏指数、脾脏指数显著升高(P<0.05),肝脏、脾脏中均检测出大肠杆菌,结肠中大肠杆菌数量明显增多。A~E组肉鸡血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(T-BiL-V)含量均显著高于空白对照组(P<0.05);D组与E组肉鸡血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量显著高于空白对照组(P<0.05);D组、E组肉鸡血清中总胆汁酸(TBA)含量显著低于空白对照组(P<0.05)。病理组织学观察显示,C~E组肉鸡肝脏眼观呈绿棕色,并存在白色坏死点,镜检发现浆液性渗出和红细胞、炎性细胞浸润现象;E组肉鸡脾脏出现明显的毛细血管玻璃样变和毛细血管充血现象;C~E组肉鸡结肠绒毛萎缩、肠壁变薄,同时,D组、E组肉鸡结肠出现毛细血管充血现象。气管滴注可以用于构建鸡的肠出血性大肠杆菌模型,此模型可显著诱导肉鸡肝脏和结肠损伤。

气管滴注大气细颗粒物对大鼠心脏的急性毒性及其机制研究

为探讨大气细颗粒物(PM2.5)对大鼠心脏的急性毒性及其机制,将28只健康雄性Wistar大鼠随机分为空白膜对照组、7.5mg·kg-1、15mg·kg-1和30mg·kg-1剂量组.细颗粒物采用一次性咽喉部气管滴注染毒,24h后处死动物.分别于染毒30min、1h和24h后测定大鼠心电图,采用间接免疫荧光化学方法测定大鼠心脏缝隙连接蛋白Cx43的分布,采用免疫印迹法(Western blot)测定连接蛋白Cx43的表达;光镜下观察心脏的组织病理学改变.结果发现,染毒30min后,各组大鼠心律失常发生率均高于基础测量时,染毒1h后对照组恢复正常心律,而颗粒物染毒组仍显示异常心律,与对照组相比,15mg·kg-1和30mg·kg-1剂量组大鼠心律失常发生频率显著增加(p<0.05),染毒24h后各组均恢复正常心律.Cx43免疫荧光结果显示,染毒24h后,15mg·kg-1和30mg·kg-1剂量组大鼠心肌Cx43荧光强度显著降低(p<0.01);Western blot测定结果显示,随着PM2.5染毒剂量的增加,心肌组织Cx43表达逐渐减少,15mg·kg-1和30mg·kg-1剂量组Cx43蛋白水平分别为对照的57%和51%,与对照组相比,差异具有显著性(p<0.01);病理切片结果发现,对照组和各剂量均可见到心肌横纹,心肌排列正常,横纹清晰,未见明显心肌细胞萎缩、变性,亦未见炎细胞浸润.本次研究结果表明,大气PM2.5可引起健康Wistar大鼠心律异常的发生,心肌组织Cx43分布和表达的异常可能是其机制之一.

暴露式与非暴露式气管滴注方法建立小鼠急性肺损伤模型及其效果比较

目的:比较暴露式与非暴露式气管滴注方法建立的小鼠急性肺损伤(ALI)模型的各种指标,确立更有效的气管滴注方法。方法:45只健康雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、非暴露组和暴露组,每组15只。以脂多糖(LPS)作为刺激物,非暴露组和暴露组小鼠分别采用非暴露式和暴露式气管滴注方法建立ALI模型,造模后24h进行支气管肺泡灌洗液(BALF)生化指标检测、BALF细胞分类计数、肺湿/干重(W/D)比值测定以及肺组织病理形态学观察。结果:暴露组小鼠造模的成功率(100%)高于非暴露组(86.7%)。与对照组比较,非暴露组和暴露组小鼠BALF中总蛋白浓度、碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、中性粒细胞数量以及肺W/D比值显著升高(P<0.05);暴露组小鼠BALF总蛋白浓度、ALP和LDH活性、中性粒细胞数量以及肺W/D比值明显高于非暴露组(P<0.05)。非暴露组小鼠主要表现为肺间质水肿;暴露组小鼠主要表现为渗出性肺水肿。结论:暴露式气管滴注方法对于建立小鼠ALI模型更有效。

气管滴注纳米氧化锌对小鼠的急性毒性作用

[目的]初步探讨气管滴注纳米氧化锌(N-ZnO)的急性毒性。[方法]50只雄性ICR小鼠随机分为5组,高、中、低剂量组(HG、MG、LG)用N-ZnO悬浮液进行单次气管滴注染毒,剂量分别为每只20、10、5μg。空白对照组(BG)不作处理,阴性对照组(NG)采用磷酸缓冲盐溶液(PBS)气管滴注。染毒后第7天对小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)、血常规以及主要脏器病理进行分析。[结果]观察终点HG小鼠仅存1只,故未纳入统计。HG和MG一般情况差,染毒后1、3、5天体重降幅高于BG及NG(P<0.05);MG、LG的BALF中总蛋白、羟脯氨酸、碱性磷酸酶(AKP)活性,全血红细胞平均容量(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血小板平均体积(MPV)高于BG及NG (P<0.05);而全血红细胞计数(RBC)低于BG及NG(P<0.05)。MG单核细胞百分比(MOD%)高于BG、NG及LG,红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)低于BG及NG(P<0.05);同时,染毒后3天和5天的体重降幅、RDW、MPV、MOD%及肺灌洗液AKP在染毒组问也存在差异(P<0.05)。病理发现各染毒组小鼠肺内有明显的炎症反应,肺泡壁细胞增生和肺泡壁增厚现象,且随染毒剂量增加而加重。[结论]气管滴注N-ZnO诱发了比较明显的肺部炎症,并引起小鼠体重明显降低并发贫血。

气管滴注纳米材料对妊娠大鼠胚胎毒性影响的初步研究

选择4种典型纳米材料(纳米碳、纳米氧化锌、碳纳米管、纳米二氧化硅),采用气管滴注染毒方式染毒受孕1d Wistar 大鼠,连续给药7d,染毒剂量为 10mg/kg 体重,对照组滴注相同体积的纳米颗粒悬液——新生小牛血清;于妊娠第20d 处死动物,剖腹取胎,记录大鼠最终妊娠数、胎鼠数;测量胎仔体重、身长、尾长及股骨长.结果表明 nano-C、nano-ZnO、CNT 和 nano-SiO_2组孕鼠的妊娠率均显著低于溶剂对照组(CT)(P<O.05);nano-ZnO 组的孕鼠的产仔数,胎鼠的体重、身长、尾长与各组比较显著降低(P<0.05);nano-C 组胎鼠的体重、股骨长与各组比较差异显著(P<0.05).CNT 和 nano-SiO_2组胎鼠的体重、身长、尾长及股骨长与溶剂对照组比较差异无显著性(P>0.05).在本实验条件下纳米材料降低受孕大鼠妊娠力;不同种类的纳米材料对胎鼠的毒性效应不同.

应用冷光源内窥镜和点样吸头完成的新型小鼠气管滴注法

目的建立一套新型易操作的小鼠气管插管、滴注方法.方法依靠冷光源内窥镜和电泳点样吸头为插管工具,建立一套新型的插管操作系统.利用高倍放大,完成小鼠气管插管、滴注,研究中1周内对20只♂ CB17-SCID小鼠（体质量24～28g）进行插管和滴注80μL环境污染细颗粒物悬液.结果共完成80次插管、滴注操作,末次滴注24h后解剖小鼠可见气管低端和肺内有散在的空气污染细颗粒物分布.结论应用冷光源内窥镜和电泳点样吸头进行的气管滴注新方法操作快速、简洁、可重复性好,能够广泛用于小鼠呼吸系统的插管和滴注操作.

气管滴注大气细颗粒物构建大鼠慢性阻塞性肺疾病模型

目的:采用气管滴注大气细颗粒物(PM_(2.5))建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺功能损伤大鼠模型,并对该模型进行评价。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、2.5 mg/kg PM_(2.5)组、5 mg/kg PM_(2.5)组和10 mg/kg PM_(2.5)组。按1 mL/kg气管滴注PM_(2.5)溶液,连续5次。采用小动物呼吸肺功能测量系统测定大鼠肺功能;ELISA法测定大鼠血清中炎症指标;收集大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),对BALF进行涂片和染色,对炎症细胞进行分类和计数;检测肺组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;通过HE、Masson和弹性纤维染色检测各组大鼠肺组织病理变化。结果:PM_(2.5)滴注对大鼠体重无显著影响,可引起大鼠呼吸频率和呼吸指数增加(P<0.05),降低最大吸气流速和肺动态顺应性(P<0.05)。PM_(2.5)滴注可引起大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-β)和IL-6含量显著增高(P<0.05),大鼠BALF中白细胞和单核细胞比值显著升高(P<0.05,P<0.01),嗜酸性粒细胞比值降低(P<0.01)。PM_(2.5)滴注可显著降低大鼠肺组织匀浆中GSH-Px活性(P<0.05)。PM_(2.5)滴注可引起大鼠气道管腔变形、炎症细胞浸润、胶原纤维和弹性纤维表达增加,在巨噬细胞内可观察到PM_(2.5)颗粒。结论:PM_(2.5)气管滴注可成功构建大鼠COPD肺功能损伤模型。

剂量精确的大鼠无创气管滴注方法

目的建立一种滴注剂量精确的大鼠无创气管滴注方法。方法选用一次性使用静脉输液针的胶管制作套管,透射光插管法行大鼠气管插管,微量进样器平头针经由套管插入气管进行滴注。滴注液体为生理盐水,滴注剂量5～200μL,精确度为1μL。结果在体重200～350 g的10只大鼠上共完成50次气管滴注操作,实验过程中和实验之后大鼠均无异常表现。结论套管微量进样器法具有无创、精确、安全的特点,可广泛应用于大鼠经气管给药或染毒的各类研究。

小鼠体内气管滴注纳米二氧化硅对体内主要脏器的影响

目的:探讨气管滴注纳米二氧化硅(SiO_2)在体内对小鼠各脏器的影响,为纳米SiO_2的安全性评估提供参考依据。方法:40只6~8周龄BALB/c雌鼠随机分为对照组(生理盐水)、低剂量SiO_2组(7mg·kg^(-1))、中剂量SiO_2组(21mg·kg^(-1))和高剂量SiO_2组(35mg·kg^(-1))(n=10),非暴露式气管滴注染毒5次,每3d1次,最后一次染毒1和15d后取小鼠左肺、右肾、肝脏、心脏和脾脏制成石蜡切片,苏木精-伊红(HE)染色后光镜下进行组织形态学检查;摘眼球取血,检测肝肾功能生化指标。结果 :与对照组比较,各实验组尤其是中和高剂量SiO_2组小鼠肺组织出现肺泡间隔增厚、炎性细胞浸润的炎症实变表现以及少量的小动脉血栓;肝脏出现肉芽肿样炎性细胞浸润及少量的局灶性肝细胞坏死;脾脏红髓增大充血,巨噬细胞增生并可见散在的巨核细胞;上述表现存在剂量依赖效应,随着时间的推移,15d后这些损伤表现均有减轻的趋势;肾组织则表现为轻微的炎性细胞浸润。血生化指标检测,丙氨酸氨基转移酶(ALT)与天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平在实验组中有一定的波动,提示肝细胞有不同程度损伤;实验组小鼠尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平变化提示有肾功能损害,但无明显剂量及时间效应。结论:气管滴注纳米SiO_2对不同脏器的影响主要表现在炎症及损伤方面,受影响的脏器主要有肺脏、肝脏、脾脏和肾脏。

使用耳镜改良的大鼠气管滴注法

在常规气管滴注操作方法基础上使用耳镜进行改良,观察其操作效率及准确率。方法:对80 只雄性wistar 大 鼠进行插管并滴注1ml 环境污染细颗粒物悬液(PM2.5 悬液),并在24 小时后解剖大鼠,观察其肺组织。设计两组气管滴注 系统(每组大鼠40 只),第一组为单独的内窥镜组,即在冷光源内窥镜的高倍视野下完成气管插管、滴注。第二组为耳镜组, 即在第一组基础上加用耳镜协助完成插管、滴注。结果:在两组插管、滴注操作过程中,单独的内窥镜组成功率为80%,平 均用时至少50s。耳镜组成功率为100%,平均用时10s。两组大鼠肺组织中均可见散在的空气污染细颗粒物分布。结论:使 用耳镜所改良的大鼠气管滴注法,使气管滴注操作更为简便快速,提高操作效率及准确率,可以广泛应用于大鼠呼吸系统研 究的插管及滴注操作中。

气管滴注^(99m)Tc-C_(60)(OH)_x大鼠的SPECT显像观察

为了解C_(60)(OH)_x经呼吸道进入体内后的分布情况,用放射性标记技术和单光子发射计算机断层(Single photon emission computed tomography,SPECT)成像技术,研究了^(99m)Tc-C_(60)(OH)_x经气管滴注后在SD大鼠体内分布、吸收和代谢的情况,及其与纳米颗粒粒径的依赖关系。用^(99m)Tc标记了富勒烯多羟基衍生物C_(60)(OH)_x(x=22,24),标记率为93%。标记物在体外和体内都有良好的稳定性。比较了^(99m)Tc-C_(60)(OH)_x和Na^(99m)TcO_4经气管滴注后在SD大鼠体内的SPECT成像。结果表明,与水溶性的小分子Na^(99m)TcO_4不同,纳米尺度的^(99m)Tc-C_(60)(OH)_x标记物大多滞留于肺中,且清除缓慢;少部分^(99m)Tc-C_(60)(OH)_x能迅速通过肺泡-毛细管屏障进入血液,主要分布于肝、骨和脾中,并通过肾代谢排泄,显示了纳米颗粒生物分布的主要特征。由此可见,纳米颗粒穿越气血屏障的能力与颗粒物的粒径相关。研究结果为纳米颗粒的呼吸毒性研究提供了重要基础资料。

吸入式气管滴注法的建立

目的:建立一种廉价、高效的呼吸道给药或染毒方法。方法:24只雄性BALB/c小鼠随机平均分为两组,分别进行鼻腔滴注和吸入式气管滴注。24只雄性SD大鼠随机平均分为两组,分别给予非暴露式气管滴注和吸入式气管滴注。小鼠每只滴注50μL生理盐水,大鼠每只滴注100μL生理盐水;每组中取1只动物按相应方法滴注用生理盐水配制的含体积分数50%的蓝墨水,解剖观察肺部形态,评价滴注效果;记录操作时间(从麻醉结束至滴注完成)和成功率。结果:小鼠鼻腔滴注的操作时间为(92.6±5.4)s,吸入式气管滴注操作时间为(25.2±4.0)s;大鼠非暴露式气管滴注操作时间为(102.6±6.5)s,吸入式气管滴注操作时间为(39.9±3.3)s;吸入式气管滴注操作时间均明显较短(t=35.042、29.849,P<0.001)。吸入式气管滴注组小鼠和非暴露式气管滴注组大鼠的肺组织散在分布蓝色印迹,而鼻腔滴注组小鼠的肺部着色不明显;鼻腔滴注和吸入式气管滴注的成功率为100%,而非暴露式气管滴注的成功率为83.7%。结论:吸入式气管滴注兼具廉价、快捷、无创、高效的优点,可广泛应用于呼吸道给药或染毒实验以及疾病模型的建立。

基于多次非暴露式气管滴注的染毒法研究温石棉致大鼠肺损伤的作用

温石棉是一种安全性存在争议的石棉,合理可行并且能够真实反映其暴露致病过程的染毒方法对深入研究其致病机理有着重要意义。本文采用多次非暴露式气管滴注的染毒方法对雄性Wistar大鼠分别进行不同浓度温石棉悬液的染毒,在染毒1、3和6个月后记录体重和肺脏器系数,观察肺组织大体及苏木素-伊红(HE)染色的病理形态,对支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数进行分类计数,并测定总蛋白(TP)、乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)的含量。结果表明,多次滴注的方式大鼠死亡率较低,并且每次滴注后能够苏醒的大鼠没有死亡发生;随着四川新康温石棉染毒时间的延长和染毒剂量增加,大鼠体重增长缓慢,肺脏器系数升高,肺大体出现水肿、肉芽肿、萎缩实质化,HE染色观察则表现为炎性细胞增多、肺泡结构遭到破坏以及出现纤维化;随着染毒时间的延长,支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞总数、中性粒细胞和淋巴细胞百分比呈上升趋势,巨噬细胞百分比呈下降趋势,TP、LDH、ACP和AKP均表现为上升的趋势,并呈现一定的剂量-效应关系。综上所述,多次非暴露式气管滴注方法可用于模拟温石棉慢性暴露的致病过程,四川新康温石棉可以通过破坏巨噬细胞、肺泡上皮细胞及肺泡上皮-毛细血管屏障造成大鼠的肺损伤。

鼻内滴注与气管滴注PM2.5建立大鼠急性肺损伤模型的比较研究

目的:通过比较鼻内滴注与非暴露式气管滴注细颗粒物(PM2.5)混悬液构建急性肺损伤(ALI)大鼠模型的差异,为研究PM2.5气道染毒选择合理的动物模型提供参考。方法:以200μL/kg的PM2.5混悬液(10mg/kg)鼻腔滴注或气管滴注10次,每3 d一次,构建ALI模型。通过HE染色观察肺组织结构及中性粒细胞浸润情况;用试剂盒检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;ELISA检测血清中白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子β(TGF-β)含量;免疫组化检测肺组织中TGF-β和IL-17的蛋白表达;RT-qPCR检测肺组织中IL-17和叉头框蛋白P3(Foxp3)的mRNA表达。结果:与对照组相比,鼻内滴注组和气管滴注组大鼠肺组织均出现显著的病理损伤;血清中IL-6水平显著升高,TGF-β水平显著下降(P<0.05);BALF中ACP、AKP和LDH活性均显著升高(P<0.05);肺组织中IL-17的蛋白和mRNA表达,以及Th17/Treg比值显著升高(P<0.05),TGF-β蛋白和Foxp3 mRNA表达量显著下降(P<0.05)。两组不同部位滴注组相比,气管滴注组肺损伤较鼻内滴注组严重,血清中IL-6水平和BALF中ACP活性显著升高(P<0.05);肺组织Th17/Treg值显著升高,TGF-β蛋白表达显著下降(P<0.05);其他指标无显著差异。结论:两种方式滴注PM2.5均能造成不同程度的肺部损伤,增加促炎细胞因子的产生,加强Th2应答;两种不同部位滴注相比,气管滴注造成的肺组织损伤和炎症反应较严重。

气管滴注PM_(2.5)混悬液对肺纤维化小鼠的影响及新对叶百部碱的干预作用

为了研究PM_(2.5)混悬液对博来霉素(BLM)诱导的肺纤维化小鼠的影响以及新对叶百部碱(NTS)的干预作用,本实验采用析因实验设计研究了PM_(2.5)混悬液给药次数(每周1次或2次)和BLM剂量(1.5、3.0 U/kg)对小鼠肺纤维化模型的影响。小鼠于第0天经气管滴注1.5或3.0 U/kg的BLM;从第1天开始,小鼠每周1次或2次气管滴注5 mg/kg的PM_(2.5)混悬液;从第8天开始,给药组小鼠每天1次灌胃给予30 mg/kg的NTS直至21 d;21 d后观察肺组织病理切片的苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色结果,计算小鼠肺系数、肺组织羟脯胺酸(HYP)含量和基于病理切片的HE炎性评分和胶原容积分数(CVF)。结果显示,对于单独滴注PM_(2.5)混悬液的小鼠,每周1次时只有HE炎性评分显著升高,每周2次时HYP和HE炎性评分增加但CVF无显著升高;而PM_(2.5)与BLM联合滴注的各组小鼠的CVF均显著增加;新对叶百部碱能够显著改善联合滴注小鼠的肺组织病理改变、减少胶原沉积,降低小鼠的CVF和α-SMA蛋白的表达,具有抑制肺纤维化的作用。本研究结果表明,单独滴注PM_(2.5)主要引起肺部炎症,即使多次给药引起肺纤维化的可能性也较小;但PM_(2.5)与BLM联合滴注则小鼠肺组织胶原沉积显著增加,大大加重了BLM引起的肺纤维化,提示PM_(2.5)对有呼吸系统疾病或基础性疾病的患者影响很大,而新对叶百部碱对联合滴注模型小鼠的肺纤维化具有明显的改善作用。

肺表面活性物质气管灌洗、气管滴注联合高频振荡通气在新生儿胎粪吸入综合征中的应用

目的:探讨肺表面活性物质(PS)气管灌洗、气管滴注联合高频振荡通气在新生儿胎粪吸入综合征(MAS)中的应用。方法:回顾性分析60例新生儿MAS临床资料,振荡组28例患儿给予基础治疗+高频振荡通气治疗,联合组32例患儿均给予PS气管灌洗、气管滴注+高频震荡通气+基础治疗,比较两组临床症状好转时间、治疗前后血气分析和肺氧合功能指标、疗效、并发症发生率。结果:治疗后联合组患儿临床症状好转时间均短于振荡组(P<0.05),两组患儿血气分析和氧合功能指标均改善(P<0.05),联合组优于振荡组(P<0.05)。联合组总有效率高于振荡组(P<0.05),并发症发生率低于振荡组(P<0.05)。结论:对新生儿MAS给予PS气管灌洗、气管滴注联合高频震荡通气疗效显著,能够促进症状好转,改善血气分析指标和肺氧合功能,减少并发症。

锦灯笼对于PM_(2.5)非暴露式气管滴注建立小鼠模型的治疗作用

目的观察锦灯笼水提液对于PM_(2.5)非暴露气管滴注小鼠模型的治疗作用。方法利用非暴露气管滴注的方法建立PM_(2.5)小鼠模型,采用不同浓度的锦灯笼水提液灌胃治疗,以地塞米松为阳性对照药物,分组治疗后观察小鼠肺部组织HE染色切片,白细胞计数及血常规检测结果,血清及肺部组织的炎性因子表达水平。结果PM_(2.5)非暴露滴注造成小鼠肺部炎性浸润,生理结构改变,白细胞计数结果显示肺部炎症,血清及肺部组织中的炎性因子升高;锦灯笼水提液可以减轻PM_(2.5)造成的肺部炎症,改善其生理结构,使白细胞计数回复正常,降低血清及肺部炎性因子的水平。结论锦灯笼水提液可以降低PM_(2.5)造成的小鼠肺部炎症,改善小鼠肺部因PM2.5所受的损伤。

气管滴注纳米银后对小鼠肺部的毒性研究

目的探讨气管滴注的纳米银对小鼠肺部的毒性作用。方法将小鼠随机分为4组,气管滴注染毒组和对照组,染毒组剂量分别为4.5、45、450μg,对照组滴注同等体积的去离子水。滴注后第1、7、28天取部分小鼠处死,进行肺灌洗液、肺组织匀浆的生化分析和肺的病理组织切片的观察。结果与对照组相比,45μg和450μg组小鼠的肺灌洗液中中性粒细胞和淋巴细胞显著升高;并且在滴注后的第7天,肺的病理组织切片中出现坏死的情况,但在第28天的时候,肺的病理组织切片恢复正常。450μg组小鼠的肺灌洗液中,蛋白含量在第7天和第28天均升高;LDH活性在整个实验观察期中均升高。在整个实验观察期中没有发生氧化应激反应。结论暴露于高于美国政府工业卫生会议(ACGIH)所规定0.1mg/m3的银尘限制阈值的100倍能够引起小鼠肺部的毒性反应。

大鼠气管滴注方法的改良及效果评价

目的建立一种可视、简易快速、精确滴注的大鼠无创气管滴注方法。方法采用1 mL医用注射器和毛细管制作进样器,采用光纤实现可视化操作,采用肥皂水检验气管插管是否正确,进样器经呼吸导管插入气管完成滴注。20只大鼠随机分为两组,分别滴注0.9%NaCl溶液和细颗粒物(PM_(2.5))混悬液。结果20只大鼠共完成120次气管插管与滴注操作,末次滴注24 h后取大鼠肺组织进行HE染色,可见PM_(2.5)组动物肺组织出现明显病理变化,基本符合慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)特征。结论改良的大鼠无创气管滴注方法操作简单、快速安全,无需特殊器材,可广泛应用于大鼠呼吸道给药、染毒等相关研究。

头灯下经口直视的大鼠非暴露式气管滴注法的建立

目的探索建立一种操作便捷而高效的大鼠非暴露式气管滴注方法。方法选用自制一次性静脉留置针在头灯的照射下行气管插管,用1 mL注射器吸取0.1 mL生理盐水对10只SD雄性大鼠(体质量200~350 g)以2日1次的频率重复操作。结果共完成40次气管滴注的操作,每只动物的操作耗时约3 min,整个实验操作安全顺利,并未给动物造成创伤,实验过程中及实验结束3 d后动物均无异常反应。结论该气管滴注方法具有快捷、安全和高效的特点,可广泛应用于大鼠呼吸道给药相关实验研究。